用于口腔护理应用的适配体制造技术

本发明专利技术公开了一种适配体组合物，其具有一种或多种寡核苷酸，所述寡核苷酸包括脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸的衍生物、核糖核苷酸的衍生物、或它们的混合物中的至少一种。所述适配体组合物具有对牙齿、牙釉质、牙本质、碳酸化缺钙羟基磷灰石、或它们的混合物中的至少一种材料的结合亲和力。

Aptamers for oral care applications

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于口腔护理应用的适配体
本专利技术一般涉及对牙齿具有高结合亲和力和特异性的核酸适配体。本专利技术还涉及此类适配体作为活性成分递送载体至口腔的用途。
技术介绍
适配体是特异性且复杂的三维形状的短单链寡核苷酸，其结合至靶标分子。适配体的分子识别基于结构相容性和分子间相互作用，包括芳环与靶标物质的静电力、范德华相互作用、氢键合和π-π堆积相互作用。适配体的靶标包括但不限于肽、蛋白质、核苷酸、氨基酸、抗生素、低分子量有机或无机化合物、甚至全细胞。适配体的解离常数通常在微摩尔水平和皮摩尔水平之间变化，这与抗体对它们的抗原的亲和力相当。适配体也可被设计成具有高特异性，使得能够区分靶标分子与密切相关的衍生物。通常通过指数富集的配体系统进化技术(SELEX)从随机核酸的大文库中体外设计适配体。当针对低分子量染料选择单链RNA时，在1990年首次引入了SELEX方法(Ellington,A.D.,Szostak,J.W.,1990.Nature346:818-822)。几年后，还描述了单链DNA适配体和包含化学修饰的核苷酸的适配体(Ellington,A.D.,Szostak,J.W.,1992.Nature355:850-852；Green,L.S.等人,1995.Chem.Biol.2:683–695)。自那时起，已选择用于数百个微观靶标诸如阳离子、小分子、蛋白质、细胞或组织的适配体。来自文献的实例汇编包括在以下网站的数据库中：http://www.aptagen.com/aptamer-index/aptamer-list.aspx。然而，仍然需要选择性结合到口腔中的表面(包括牙齿)的适配体。
技术实现思路
在本专利技术中，我们已证明了SELEX在针对牙齿选择适配体中的用途以及使用此类适配体将活性成分递送至口腔的用途。在本专利技术的某些实施方案中，提供了适配体组合物。所述适配体组合物包含至少一种寡核苷酸，所述寡核苷酸可包括：脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸的衍生物、核糖核苷酸的衍生物、或它们的混合物；其中所述适配体组合物具有对选自牙齿、牙釉质、牙本质、碳酸化缺钙羟基磷灰石、或它们的混合物中的材料的结合亲和力。在本专利技术的另一个实施方案中，提供了适配体组合物。所述适配体组合物包括至少一种寡核苷酸，所述寡核苷酸包含SEQIDNO1、SEQIDNO9、SEQIDNO25、SEQIDNO112、SEQIDNO120、SEQIDNO136、或SEQIDNO223至SEQIDNO234。在本专利技术的另一个实施方案中，适配体组合物包括至少一种具有一个或多个基序的寡核苷酸，所述基序包含SEQIDNO235、SEQIDNO236、SEQIDNO237、SEQIDNO238、SEQIDNO239、SEQIDNO240、SEQIDNO241、SEQIDNO242、SEQIDNO243或SEQIDNO244。在本专利技术的另一个实施方案中，提供了口腔护理组合物。所述口腔护理组合物包含至少一种核酸适配体；其中所述至少一种核酸适配体具有对口腔部分的结合亲和力。在本专利技术的另一个实施方案中，所述口腔部分包含以下中的至少一种：牙齿、牙釉质、牙本质或口腔中的任何其他表面。在仍另一个实施方案中，所述口腔部分是牙齿。在本专利技术的另一个实施方案中，提供了向口腔递送一种或多种口腔护理活性成分的方法。所述方法包括施用包含至少一种核酸适配体和一种或多种口腔护理活性成分的口腔护理组合物；其中所述至少一种核酸适配体和所述一种或多种口腔护理活性成分是共价或非共价附接的；并且其中所述至少一种核酸适配体具有对口腔部分的结合亲和力。在本专利技术的另一个实施方案中，提供了向口腔递送一种或多种口腔护理活性成分的方法。所述方法包括施用口腔护理组合物，所述组合物包含：至少一种核酸适配体和一种或多种纳米材料；其中所述至少一种核酸适配体和所述一种或多种纳米材料是共价或非共价附接的；并且其中所述至少一种核酸适配体具有对口腔部分的结合亲和力。附图说明为了更全面地理解本公开，应当参考以下专利技术详述和附图。图1示出了实验A在不同选择轮的拷贝数方面的前二十个序列的富集轨迹。图2示出了实验B在不同选择轮的拷贝数方面的前二十个序列的富集轨迹。图3A示出了阴性对照。图3B示出了鉴定为“OC1R-B1”的适配体与牙齿的结合。图3C示出了鉴定为“OC1R-B9”的适配体与牙齿的结合。图3D示出了鉴定为“OC1R-B25/OC1R-A9”的适配体与牙齿的结合。图4例证了通过聚群(Ward.D2方法)对实验B的拷贝数方面的前100个序列的富集轨迹排序的相关性矩阵。图5例证了适配体OC1R-B1的随机区的基序分析的结果。图6例证了适配体OC1R-B1的预测二级结构及其保守基序。图7例证了适配体OC1R-B9的随机区的基序分析的结果。图8例证了适配体OC1R-B9的预测二级结构及其保守基序。图9例证了适配体OC1R-A9的随机区的基序分析的结果。图10例证了适配体OC1R-A9的预测二级结构及其保守基序。图11例证了适配体OC1D-A9的预测二级结构。图12例证了在选择过程中鉴定的具有至少90％的核苷酸序列同一性的示例性序列的比对。图13例证了在选择过程中鉴定的具有至少70％的核苷酸序列同一性的示例性序列的比对。图14例证了在选择过程中鉴定的具有至少50％的核苷酸序列同一性的示例性序列的比对。图15例证了结合到牙齿上的DNA适配体的量。图16例证了在每次洗涤后结合到牙齿上的DNA适配体的量。图17例证了结合的(剩余的)、洗涤的(洗脱的)和未从牙齿回收的(损失的)DNA适配体总量。图18A例证了适配体OC1D-B1的预测二级结构。图18B例证了适配体OC1D-B1.1的预测二级结构。图18C例证了适配体OC1D-B1.2的预测二级结构。图18D例证了适配体OC1D-B1.3的预测二级结构。图19A例证了适配体OC1D-B9的预测二级结构。图19B例证了适配体OC1D-B9.1的预测二级结构。图19C例证了适配体OC1D-B9.2的预测二级结构。图20A例证了适配体OC1D-A9的预测二级结构。图20B例证了适配体OC1D-A9.1的预测二级结构。图21A-C例证了截短的DNA适配体与牙齿的结合。具体实施方式本专利技术包括口腔护理组合物，所述组合物包含一种或多种适配体，其中所述适配体被设计成结合到口腔内的特定靶标，诸如牙齿表面或粘膜组织。口腔护理活性物质可结合到适配体，从而允许所述活性物质被递送至特定口腔靶标，从而获得更高的效率和影响。定义如本文所用，术语“适配体”是指对特定靶标具有结合亲和力的单链寡核苷酸或肽。如本文所用，术语“核酸”是指核苷酸的聚合物或低聚物。当核苷酸的糖部分是D-核糖时，核酸也被称为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含寡核苷酸的适配体组合物，所述寡核苷酸为脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸的衍生物、核糖核苷酸的衍生物、或它们的混合物中的至少一种；其中所述适配体组合物具有对牙齿、牙釉质、牙本质、碳酸化缺钙羟基磷灰石、或它们的混合物中的至少一种的结合亲和力。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170809 US 62/5429361.一种包含寡核苷酸的适配体组合物，所述寡核苷酸为脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸的衍生物、核糖核苷酸的衍生物、或它们的混合物中的至少一种；其中所述适配体组合物具有对牙齿、牙釉质、牙本质、碳酸化缺钙羟基磷灰石、或它们的混合物中的至少一种的结合亲和力。


2.根据权利要求1所述的适配体组合物，其中所述适配体组合物具有对牙齿的结合亲和力。


3.根据权利要求1或2所述的适配体组合物，其包含至少一种与SEQIDNO1至SEQIDNO234具有至少50％的核苷酸序列同一性的寡核苷酸，优选地其中所述寡核苷酸为SEQIDNO1至SEQIDNO234中的至少一种。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的适配体组合物，其包含寡核苷酸，所述寡核苷酸为SEQIDNO1、SEQIDNO9、SEQIDNO25、SEQIDNO112、SEQIDNO120、SEQIDNO136、或SEQIDNO223至SEQIDNO234中的至少一者。


5.根据权利要求1或2所述的适配体组合物，其中所述寡核苷酸包含一个或多个基序，所述基序为SEQIDNO235、SEQIDNO236、SEQIDNO237、SEQIDNO238、SEQIDNO239、SEQIDNO240、SEQIDNO241、SEQIDNO242、SEQIDNO243和SEQIDNO244中的至少一者。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的适配体组合物，其中所述寡核苷酸包含天然或非天然核酸碱基，优选的其中所述非天然核酸碱基是下列中的至少一种：次黄嘌呤、黄嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、5,6-二氢尿嘧啶、5-5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、硫尿嘧啶、1-甲基次黄嘌呤、6-甲基异喹啉-1-硫酮-2-基、3-甲氧基-2-萘基、5-丙炔基尿嘧啶-1-基、5-甲基胞嘧啶-1-基、2-胺基腺嘌呤-9-基、7-去氮-7-碘腺嘌呤-9-基、7-去氮-7-丙炔基-2-胺基腺嘌呤-9-基、吩噁嗪基、吩噁嗪基-G-clam、或它们的混合物。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的适配体组合物，其中所述寡核苷酸的核苷通过化学基序链接，所述化学基序是下列中的至少一种：天然磷酸二酯、手性硫逐磷酸酯、手性膦酸甲酯、手性氨基磷酸酯、手性磷酸酯手性三酯、手性硼磷酸酯、手性硒代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硫代氨基磷酸酯、亚甲基甲基亚胺基、3’-酰胺、3’非手性氨基磷酸酯、3’非手性亚甲基膦酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：JE贝拉斯克斯，AV特雷霍，PA萨格尔，GA彭纳，
申请(专利权)人：宝洁公司，
类型：发明
国别省市：美国;US