【技术实现步骤摘要】
一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法
本专利技术涉及真菌药用有效成分提取纯化
,尤其是一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法。
技术介绍
灵芝孢子油,是从破壁的灵芝孢子中提取的油状脂质物,集成了灵芝孢子的多种活性成分。一般为黄色透明液体,其成份为饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、三萜及甾醇等。灵芝酸A是灵芝三萜的重要组成成分,可抑制细胞组织胺的释放,增强消化系统各种器官的机能,具有降血脂、降血压、护肝、调节肝功能等作用。但在灵芝孢子油中,灵芝酸A一般含量微乎其微,提升灵芝酸A的含量是对灵芝孢子油品质的提升具有重要意义。但是,传统的灵芝孢子油提取方法,局限性大,从破壁的灵芝孢子中提取的灵芝孢子油中的灵芝酸A的含量提高难度大,且非常有限;同时灵芝酸A提取物与灵芝孢子油并不相融,灵芝孢子油中直接富集灵芝酸A提取物会造成混乱不均匀,达不到保健食品均一性的要求。如何解决灵芝孢子油、灵芝酸A的提取纯化,以及灵芝孢子油的灵芝酸A再融合问题,是非常有必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种灵芝酸A富集 ...
【技术保护点】
1.一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n(1)灵芝酸A的提取制备/nS1、灵芝粗提物的制备:选取灵芝子实体,粉碎成粒径小于3cm的粉末,加入子实体粉末重量30~40倍的乙酸乙酯,然后放入水浴恒温振荡器60~70℃孵育2~5h,再用锤熔玻璃漏斗(G3)过滤,滤液用旋转蒸发仪浓缩干燥,得乙酸乙酯提取物H1;/nS2、粗提物初分:将上一步骤制得的乙酸乙酯提取物S1,用乙酸乙酯溶解,用硅胶干粉拌样,晾干,装入空样品管以备干法上样;利用快速中压分离设备,用流动相正己烷平衡硅胶柱30min,接上样品管,开始梯度洗脱,经HPLC图谱检测,得到灵芝酸A粗提组分 ...
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)灵芝酸A的提取制备
S1、灵芝粗提物的制备:选取灵芝子实体,粉碎成粒径小于3cm的粉末,加入子实体粉末重量30~40倍的乙酸乙酯,然后放入水浴恒温振荡器60~70℃孵育2~5h,再用锤熔玻璃漏斗(G3)过滤,滤液用旋转蒸发仪浓缩干燥,得乙酸乙酯提取物H1;
S2、粗提物初分:将上一步骤制得的乙酸乙酯提取物S1,用乙酸乙酯溶解,用硅胶干粉拌样,晾干,装入空样品管以备干法上样;利用快速中压分离设备,用流动相正己烷平衡硅胶柱30min,接上样品管,开始梯度洗脱,经HPLC图谱检测,得到灵芝酸A粗提组分H2;
S3、灵芝酸A的HPLC纯化:将上一步骤制得的灵芝酸A粗提组分H2,进行HPLC制备,并采用梯度洗脱,得到灵芝酸A纯化组分,经浓缩结晶,得到纯化的灵芝酸A湿结晶体H3;
S4、灵芝酸A混合液的制备:在灵芝酸A混合液制备恒温反应釜中,加入一定量纯化水,升温至75~80℃,再加入H1、H2或H3,在30~60rpm/min条件下,保温匀速搅拌20~40min,最后再加入适量蔗糖脂肪酸酯、甘油、以及融化的蜂蜡,在80~150rpm/min条件下,继续保温匀速搅拌40~60min,制得混合的灵芝酸A混合液H4;
(2)灵芝孢子油的制备
S5、超临界CO2萃取灵芝孢子油:选取优质灵芝孢子,经破壁、制粒后,再采用超临界CO2萃取技术,收集得到灵芝孢子油;
(3)、灵芝酸A的富集
S6、富含灵芝酸A的灵芝孢子油的制备:在混合油液制备恒温反应釜中,加入一定量S5步骤中精制的灵芝孢子油,升温至50~60℃,匀速搅拌;再将制得的灵芝酸A混合液H4,在20~40min内匀速加入至混合油液制备恒温反应釜中,在55~65℃、120~180rpm/min条件下,保温匀速搅拌30~60min;在55~60℃、30~60rpm/min条件下,再加入维生素E,保温匀速搅拌15~30min后,自然冷却,从而制得稳定的富含灵芝酸A的灵芝孢子油。
2.根据权利要求1所述一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法,其特征在于,在S1灵芝粗提物的制备步骤中,所述灵芝子实体,具体为赤芝2号子实体。
3.根据权利要求1或2所述一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法,其特征在于,所述灵芝子实体,为菌柄全部切除或含菌柄为1.2cm以内的灵芝子实体,经粉碎的颗粒直径为10μm~4mm。
4.根据权利要求1所述一种灵芝酸A富集到灵芝孢子油的方法,其特征在于,在S2粗提物初分步骤中,所述梯度洗脱时的洗脱方法为:
技术研发人员:李赛飞,张正高,晏礼明,周俊,
申请(专利权)人:中国科学院微生物研究所,安徽黄山云乐灵芝有限公司,安徽祥云谷现代中药有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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