一种组织细胞固定液及其制备方法、应用方法技术

本发明专利技术公开了一种组织细胞固定液及其制备方法、应用方法，以重量份计，包括以下成分：甲醛28～36份、乙二醇1～2份、山梨醇1～4份、异丁醇2～3份、高碳醇7～9份、NaH

A kind of tissue cell fixative and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种组织细胞固定液及其制备方法、应用方法
本专利技术涉及了生物
，具体的是一种组织细胞固定液及其制备方法、应用方法。
技术介绍
为了防止组织细胞的死后变化，防止组织细胞的自溶和腐败，保持组织细胞的固有形态。通常需要用到组织细胞固定液。组织细胞固定液能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长以使组织细胞保持固有形态。传统的组织细胞固定液一般采用醛类物质。醛类物质的使用对环境及操作人员的健康造成不利影响。因此，需要对现有的组织细胞固定液进行进一步的改进，以使其在保持较好固定作用的基础上，还能更加环保。
技术实现思路
为了克服现有技术中的缺陷，本专利技术实施例提供了一种组织细胞固定液及其制备方法、应用方法，其能够很好的保持组织细胞的固有形态，并且更加环保。本专利技术公开了一种组织细胞固定液，以重量份计，包括以下成分：甲醛28～36份、乙二醇1～2份、山梨醇1～4份、异丁醇2～3份、高碳醇7～9份、NaH2PO4·2H2O2.5～3.6份、Na2HPO4·12H2O8.2～9.3份、H2O400～500份。2.根据权利要求1所述的组织细胞固定液，其特征在于，所述高碳醇的制备方法包括以下步骤：将司盘80和吐温60复配成HLB值为13～16乳化剂；将0.5份硬脂酸、0.5份甘油、1.5份聚乙烯醇、4份单硬脂酸乙二醇酯，2份十四醇以及5份石蜡混合均匀得到油相；>将0.2份氢氧化钠和30份去离子水混合均匀得到水相；将所述乳化剂、所述油相以及所述水相加入三颈瓶中搅拌反应，即得所述高碳醇。作为优选，所述搅拌反应的温度为80～90℃，反应时间为40～60min。本专利技术还提供了一种组织细胞固定液的制备方法，包括以下步骤：将2.5～3.6份NaH2PO4·2H2O、8.2～9.3份Na2HPO4·12H2O与400～500份H2O混合成a液；取所述a液总量的四分之三与28～36份甲醛混合成b液；取所述a液总量的四分之一与1～2份乙二醇、1～4份山梨醇、2～3份异丁醇以及7～9份高碳醇混合成c液；将所述b液、所述c液混合均匀，得到所述组织细胞固定液。作为优选，将所述b液以及所述c液在40～60℃下混合30～40min。本专利技术同时提供了一种组织细胞固定方法，所述组织细胞固定方法为：将组织细胞取材后，向组织细胞中加入组织细胞固定液，混合固定，其混合温度为室温，混合时间为3～24h。作为优选，向组织细胞中加入组织细胞体积6～10倍体积的组织细胞固定液。本专利技术的有益效果如下：本专利技术组织细胞固定液能够防止组织细胞的死后变化，防止自溶和腐败，以保持组织细胞的固有形态。能够使细胞内的蛋白质、脂肪、糖和酶等各种抗原成分转变成不溶性物质。同时使组织中的各种物质沉淀和凝固起来而产生不同的折射率，造成光学上的差异，以便染色后易于鉴别和观察。还兼有硬化作用，使组织硬化，增加组织硬度，以便于制片。并能够防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态结构。使用本专利技术组织细胞固定液固定的组织细胞能对染料产生不同亲和力而着色清晰，便于辨认。本专利技术组织细胞固定液添加了醇类物质，同时减少甲醛的使用，不仅能对组织细胞达到较佳的固定效果，还能够降低组织细胞固定液的刺激性、毒性以及腐蚀性，同时降低了对环境的危害以及降低了对作业人员健康的危害，具有很好的应用价值。为让本专利技术的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，作详细说明如下。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。以下实施例1～3中，高碳醇的制备方法包括以下步骤：将司盘80和吐温60复配成HLB值为15的乳化剂；将0.5份硬脂酸、0.5份甘油、1.5份聚乙烯醇、4份单硬脂酸乙二醇酯，2份十四醇以及5份石蜡混合均匀得到油相；将0.2份氢氧化钠和30份去离子水混合均匀得到水相；将上述配置得到的乳化剂、油相以及水相加入三颈瓶中搅拌反应，搅拌反应的温度为85℃，反应时间为50min即得高碳醇。实施例1制备组织细胞固定液：将3.6份NaH2PO4·2H2O、8.2份Na2HPO4·12H2O与500份H2O混合成a液；取a液总量的四分之三与28份甲醛混合成b液；取a液总量的四分之一与2份乙二醇、1份山梨醇、3份异丁醇以及7份高碳醇混合成c液；将b液以及c液在60℃下混合30min，得到所述组织细胞固定液。固定组织细胞：将组织细胞取材后，向组织细胞中加入组织细胞体积10倍体积的组织细胞固定液，混合固定，其混合温度为室温，混合时间为3h。实施例2制备组织细胞固定液：将2.5份NaH2PO4·2H2O、9.3份Na2HPO4·12H2O与400份H2O混合成a液；取a液总量的四分之三与36份甲醛混合成b液；取a液总量的四分之一与1份乙二醇、4份山梨醇、2份异丁醇以及9份高碳醇混合成c液；将b液以及c液在40℃下混合40min，得到所述组织细胞固定液。固定组织细胞：将组织细胞取材后，向组织细胞中加入组织细胞体积6倍体积的组织细胞固定液，混合固定，其混合温度为室温，混合时间为24h。实施例3制备组织细胞固定液：将3.05份NaH2PO4·2H2O、8.75份Na2HPO4·12H2O与450份H2O混合成a液；取a液总量的四分之三与32份甲醛混合成b液；取a液总量的四分之一与1.5份乙二醇、2.5份山梨醇、2.5份异丁醇以及8份高碳醇混合成c液；将b液以及c液在45℃下混合35min，得到所述组织细胞固定液。固定组织细胞：将组织细胞取材后，向组织细胞中加入组织细胞体积8倍体积的组织细胞固定液，混合固定，其混合温度为室温，固定时间为13.5h。对比例1本对比例与实施例3的区别在于，将组织细胞固定液c液中的所有醇类物质均换成甲醛。具体如下：制备组织细胞固定液：将3.05份NaH2PO4·2H2O、8.75份Na2HPO4·12H2O与450份H2O混合成a液；取a液总量的四分之三与32份甲醛混合成b液；取a液总量的四分之一与14.5份甲醛混合成c液；将b液以及c液在45℃下混合35min，得到所述组织细胞固定液。固定组织细胞：将组织细胞取材后，向组织细胞中加入组织细胞体积8倍体积的组织细胞固定液，混合固定，其混合温度为室温，固定时间为13.5h。结果测试：<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组织细胞固定液，其特征在于，以重量份计，包括以下成分：/n甲醛28～36份、/n乙二醇1～2份、/n山梨醇1～4份、/n异丁醇2～3份、/n高碳醇7～9份、/nNaH

【技术特征摘要】
1.一种组织细胞固定液，其特征在于，以重量份计，包括以下成分：
甲醛28～36份、
乙二醇1～2份、
山梨醇1～4份、
异丁醇2～3份、
高碳醇7～9份、
NaH2PO4·2H2O2.5～3.6份、
Na2HPO4·12H2O8.2～9.3份、
H2O400～500份。


2.根据权利要求1所述的组织细胞固定液，其特征在于，所述高碳醇的制备方法包括以下步骤：
将司盘80和吐温60复配成HLB值为13～16乳化剂；
将0.5份硬脂酸、0.5份甘油、1.5份聚乙烯醇、4份单硬脂酸乙二醇酯，2份十四醇以及5份石蜡混合均匀得到油相；
将0.2份氢氧化钠和30份去离子水混合均匀得到水相；
将所述乳化剂、所述油相以及所述水相加入三颈瓶中搅拌反应，即得所述高碳醇。


3.根据权利要求2所述的组织细胞固定液，其特征在于，所述搅拌反应的温度为80～90℃，反应时间为40～60min。


4.一种组织...

【专利技术属性】
技术研发人员：王守立，赵飞，沈刚，
申请(专利权)人：苏州堪赛尔医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32