微生物传感器及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供高通透电化学微生物传感器及其制备方法和应用，其中制备步骤包括：S1制备菌液；S2油包水型高内相乳液的制备；S3微生物传感器制备。该生物传感器采用三电极线性循环伏安法检测不同浓度的甲基磺草酮溶液的电化学行为来分析甲基磺草酮对两种不同细菌的急性生物毒性结果进而使实现其应用。通过该方法得到的微生物传感器，检测快速灵敏，可反映不同毒性物质浓度下微生物的应激电流响应。

Microbial sensor and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
微生物传感器及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物传感器电化学领域，具体涉及微生物传感器及其制备方法和应用。
技术介绍
农业科技的进步离不开农药的大规模使用。近年来，农药对环境污染的影响，特别是通过土壤经雨淋而后到河流、湖泊等天然水体，从而影响大范围人群的健康问题而日益引起人们的重视。目前在各大水体和沉积物中已监测到了有机氯、有机磷、三唑类和拟除虫菊酯类等多种农药。这些农药通过水生生物体富集、再通过食物链传递进而危害人类的健康。然而，许多农药及其代谢产物的毒性和对环境的影响在使用多年后才被认识到或尚未被完全评估出来。例如1957年专利技术的莠去津(2-氯-4-二乙胺基-6-异丙胺基-1，3，5-三嗪，阿特拉津，atrazine)，是世界上最大的除草剂农药品种。经多年研究发现，莠去津的脱氯与烷基代谢产物会造成严重的地下水体污染，其在环境中的积累30年后仍然可被测出。而在2017年10月莠去津才被世卫组织列为3类致癌物，在欧洲已被禁用。于2000年注册的甲基磺草酮(2-(4-甲磺酰基-2-硝基-苯甲酰基)环己烷-1,3-二酮)是莠去津的替代本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.微生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、制备菌液，以土壤细菌胶质芽孢杆菌和大肠杆菌为载体通过培养及后处理工序制备菌液；/nS2、制备油包水型高内相乳液，以苯乙烯-二甲基丙烯酸乙二醇酯为油相，以Span80-Tween80为乳化剂体系，以过硫酸铵-亚硫酸氢钠为引发剂体系，以后处理的菌液为水相制备油包水型高内相乳液；/nS3、制备微生物传感器，将含细菌的稳定的高内相乳液滴加在处理过的电极表面，于37℃烘干，制备微生物传感器。/n

【技术特征摘要】
1.微生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备菌液，以土壤细菌胶质芽孢杆菌和大肠杆菌为载体通过培养及后处理工序制备菌液；
S2、制备油包水型高内相乳液，以苯乙烯-二甲基丙烯酸乙二醇酯为油相，以Span80-Tween80为乳化剂体系，以过硫酸铵-亚硫酸氢钠为引发剂体系，以后处理的菌液为水相制备油包水型高内相乳液；
S3、制备微生物传感器，将含细菌的稳定的高内相乳液滴加在处理过的电极表面，于37℃烘干，制备微生物传感器。


2.根据权利要求1所述的微生物传感器的制备方法，其特征在于，S1步骤中制备菌液的具体方法包括以下步骤：
A1、在琼脂培养基上分别纯化胶质芽孢杆菌和大肠杆菌，取样接种于各自液体培养基；
A2、在对数生长期时取出，离心分离菌体，用0.85%NaCl溶液洗涤并重新离心分离；
A3、用分散液调整光密度值，便制备而得用于高内相乳液水相的菌液。


3.根据权利要求2所述的微生物传感器的制备方法，其特征在于，所述大肠杆菌的培养基为本领域所公知的培养基，为LB培养基、SOB培养基以及SOC培养基其中一种；胶质芽孢杆菌培养基为适合菌体繁殖生长的含氮培养基，其1L培养基的配方为：蔗糖5-10g，K2HPO42-5g，MgSO4·7H2O1.4-5g，CaCO32-10g，酵母2g，(NH4)2SO40.5-2.5g，FeCl3·6H2O0.01-0.05g，NaCl0.2g。


4.根据权利要求3所述的微生物传感器的制备方法，其特征在于，胶质芽孢杆菌和大肠杆菌的培养条件都为37℃16-32h，其中调整菌液光密度的分散液为其液体培养基或0.85%NaCl溶液。


5.根据权利要求1所述的微生物传感器的制备方法，其特征在于，S2步骤中的油包水型高内相乳液选取苯乙烯和二甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐雅玲，屠晓华，李加友，于建兴，张洋，缪程平，
申请(专利权)人：嘉兴学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33