一种光甘草定的提取分离方法技术

本发明专利技术关于一种光甘草定的提取分离方法，所述提取方法采用常温套提，所述分离方法采用了大孔树脂预处理得到粗总黄酮，采用聚合物色谱填料精细分离，可以有效除去大多数其他黄酮，得到的光甘草定粗品含量高，再经过乙醇重结晶，即可得到90％以上的光甘草定产品。本发明专利技术的提取分离方法始终只使用乙醇一种有机溶剂，工艺路线简单，制备过程不使用环境不友好溶剂，成本低，且适合工业化生产。

Extraction and separation of glycyrrhizin

【技术实现步骤摘要】
一种光甘草定的提取分离方法
该专利技术涉及一种分离纯化
，具体涉及一种从光果甘草药材或光甘草定药材经水提后的药渣中提取纯化高纯度的光甘草定的方法。
技术介绍
光甘草定是从光果甘草中提取的一种黄酮类物质，分子式为C20H20O4，分子量为324.36。它是目前化妆品行业最有效最安全的天然美白添加剂，被称为美白黄金。同时，光甘草定还有抗氧化、抗炎，抗动脉粥样硬化，能量代谢调节，神经保护，抗骨质疏松等功能。2011年，欧盟法规授权可将含有光甘草定的甘草黄酮产品作为新型食品成分投放市场。但目前由于光甘草定极高的生产成本，导致市场上光甘草定的价格非常昂贵。光甘草定成本高的原因是，一是原料含量低，甘草或甘草渣中的光甘草定含量在千分之二左右，二是提取时会把包括光甘草定在内的一类黄酮物质提取出来，普通的分离方法很难有效分离。据文献报道，光甘草定占光果甘草总黄酮的11％左右，要得到高纯度的光甘草定，必须把其他黄酮类物质设法除去。在现有技术中，光甘草定的提取、纯化多采用溶剂(二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇)提取、大孔树脂，酸碱处理，聚酰胺分离、硅胶分离、混合溶剂结晶等方法。硅胶分离，需要使用如乙酸乙酯、石油醚等一类易挥发的溶剂，安全性差，同时硅胶再生困难。大孔树脂、聚酰胺只能进行粗分离，无法做到精细分离，因此含量低，需要多步过柱。由于市场要求90％以上的光甘草定产品，现有工艺需多步过柱，多步纯化，繁琐的操作导致成本的提高及工业化难以实现。专利CN1295230C采用原料为甘草，用有机溶剂无水乙醇或乙酸乙酯提取，经超滤膜过滤，吸附大孔树脂或聚酰胺吸附、丙酮或丙酮混合溶剂结晶得到90％以上光甘草定，收率0.2％左右。该方法提到用无水乙醇或乙酸乙酯进行原料的提取，实际上在工业上，每次都用无水乙醇抽提植物原料是不可能实现的，原料中的水分存在会影响回收乙醇的浓度，而用乙酸乙酯抽提则安全性较低，环境不友好，粗提黄酮中会有乙酸乙酯残留，不利于作为食品原料使用。甘草黄酮在提取阶段会全部被提取出来，分离纯化必须想办法除去其他黄酮才能得到高含量的光甘草定，而大孔吸附树脂或聚酰胺一般只适合粗分离，其选择性不强，层析分离效果一般，因此得到高含量光甘草定实际上会比较困难。专利CN103848841B利用甘草废渣，采用甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等溶剂两两混合为溶剂，常温提取，浓缩后加水分离杂质，过滤得到的固体物用酸碱溶解分离除杂两次，然后用大孔树脂纯化可得到60％含量的浅黄色固体粉末，产品收率0.6％。该法也是用到了非酒精的有机溶剂，安全性较低，环境不友好，然后酸碱处理两次，产生的酸碱废水会比较多。专利CN109081843A甘草渣经80-95％乙醇醇提，然后利用大孔吸附树脂和聚酰胺两次柱层析，乙醇水重结晶得到较高含量的光甘草定。但工艺操作采用与大孔吸附树脂与聚酰胺树脂以拌样的形式上样，实际工业化生产中难以实现，因为目前工业水上柱都是以溶液吸附的方式上样，拌样的形式上样不适于工业化。专利CN105777771A甘草渣用乙醇、甲醇或乙酸乙酯溶剂提取2次，硅胶层析，乙酸乙酯和石油醚为洗脱剂，然后用溶剂洗去硅胶层析得到的产品中的油，可得到较高含量的产品，收率0.3％以上。该专利采用硅胶层析，乙酸乙酯、石油醚等溶剂，安全性较低，环境不友好，同时硅胶层析所需的溶剂量很大，硅胶的重复利用是很大难题，成本较难控制。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种从甘草或甘草渣中提取分离高纯度光甘草定的方法，该方法始终只使用乙醇一种有机溶剂，工艺路线简单，制备过程不使用环境不友好溶剂，成本低，适合工业化生产。此外，本专利技术所述提取方法采用常温套提，套提所用的溶剂少，常温提取生产过程中易操作，提出来的杂质少，光甘草定含量高，还能减少溶剂的挥发，提高了生产中的安全性，并降低了成本。本专利技术所述分离方法采用了大孔树脂预处理得到粗总黄酮，采用聚合物色谱填料精细分离，可以有效除去大多数其他黄酮，得到的光甘草定粗品含量高，再经过乙醇重结晶，即可得到90％以上的产品。本专利技术采用的技术方案为：一种光甘草定的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)：甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡提取，浸泡提取次数为1～3次，每次1～3小时，收集提取液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；步骤2)：步骤1)所得浓缩液上大孔吸附树脂柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓为10-80％；步骤3)：步骤2)所得浓缩液上聚合物色谱填料柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得到浅黄色粗品；步骤4)：所述浅黄色产品用5～10倍(V/m)的50-90％乙醇重结晶，得到含量≥90％的光甘草定。本专利技术提供了一些优选实施方式。在一些实施方式中，在步骤1)中，所采用的提取方法为常温套提，所谓套提是指用第一批原料提取、分离所得的第二次提取液、第三次提取液分别作为下一批新原料提取的一次提取溶剂、二次提取液溶剂，然后只补充新溶剂进行最后一次提取，例如，甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min，第一次提取完，分离出第一次提取液，渣子再用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇进行第二次提取，常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min。分离出第二次提取液，用于下一批次原料的套提，即把第二次提取液加入到新的甘草渣中进行第一次提取，提取方法同上。套提所用的溶剂少，常温提取生产过程中易操作，提出来的杂质少，光甘草定含量高，还能减少溶剂的挥发，提高了生产中的安全性并降低了成本。在一些实施方式中，步骤2)中所述大孔吸附树脂柱为AB-8、HP-20、D101、ADS-21、ADS-7或ADS-17柱，树脂高径比为5∶1，上柱流速为2BV/h(BV，柱体积)，上柱后，先用40-60％乙醇淋洗3～8倍柱体积，淋洗流速1～2BV/h，再用3～8倍柱体积的70-90％乙醇洗脱产品，洗脱流速0.5～1.5BV/h，洗脱液在60～80℃真空浓缩调整乙醇浓度为10-80％。在一些实施方式中，所述聚合物色谱填料是指采用高交联度的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)作为基质，利用基质骨架本身就具有的强疏水性能，直接作为反相分离填料，相比常规硅胶反相填料，具有粒径分布均一、粒径可控、耐受pH范围宽，载样量大，填料用料少，溶剂消耗小等优点，此外，聚合物色谱填料具有丰富的网状孔结构和较高的比表面积，非常适合于从甘草或甘草渣，特别是经水提的甘草渣中分离甘草光定。聚合物色谱填料UniPS40、UniPS-30、LX-MS15、LX-MS30、LX-20SS、LX-316、或LX-261装柱，柱高度至少30cm，装完后，用1.5倍柱体积的60-80％乙醇平衡好，用泵把上述浓缩液泵入到聚合物色谱填料柱上，流速0.1BV/min，先用2～4倍柱体积的40-60％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1～2BV/h，再用3～6倍柱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种光甘草定的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1)：甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡提取，浸泡提取次数为1～3次，每次1～3小时，收集提取液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；/n步骤2)：步骤1)所得浓缩液上大孔吸附树脂柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；/n步骤3)：步骤2)所得浓缩液上聚合物色谱填料柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得到浅黄色产品；/n步骤4)：所述浅黄色产品用5～10倍(V/m)的50-90％乙醇重结晶，得到含量≥90％的光甘草定。/n

【技术特征摘要】
1.一种光甘草定的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1)：甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡提取，浸泡提取次数为1～3次，每次1～3小时，收集提取液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；
步骤2)：步骤1)所得浓缩液上大孔吸附树脂柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；
步骤3)：步骤2)所得浓缩液上聚合物色谱填料柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得到浅黄色产品；
步骤4)：所述浅黄色产品用5～10倍(V/m)的50-90％乙醇重结晶，得到含量≥90％的光甘草定。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)的提取方法为套提。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤1)的浸泡提取次数为2次，每次3小时。


4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱为AB-8、HP-20、D101、ADS-21、ADS-7或ADS-17柱。


5.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴启林，孟令超，叶洪波，
申请(专利权)人：辰风天然本草北京科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11