【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于计数细胞的系统和方法相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2017年5月19日提交的题为“用于计数细胞的系统和方法”的美国临时申请序列号62/508953的权益,其全部内容通过引用整体并入本文。
本文所描述的技术的方面涉及用于自动化计数容器中的细胞的技术。一些方面涉及这些技术在自动化细胞计数器和细胞培养箱中的实施。
技术介绍
某些科学实验可能需要具有最小浓度(例如,每毫升1300000个细胞)和/或最小数量的细胞(例如,10000000个细胞)的细胞培养物。对于这些实验,通常使用血细胞计数器执行手动细胞计数,以确认用于所述实验的所述细胞培养物中含有足够浓度和/或数量的细胞。所述血细胞计数器可以具有带有网格线的腔室,该网格线形成预定尺寸的框,所述腔室配置为接收例如来自所述细胞培养物的样品。操作员可以在显微镜下观察所述血细胞计数器,并在由所述网格线形成的一个或多个框中计数细胞的数量。因此,所述操作员可以将手动计数的细胞的数量与一个或多个框的已知尺寸结合使用,以鉴别在所述样品中的细胞浓 ...
【技术保护点】
1.一种系统,其包括:/n成像系统,其配置为在多个焦平面对容器中的多个细胞进行成像;/n至少一个控制器,其耦合至所述成像系统;以及/n所述至少一个控制器耦合有包含指令的存储器,所述指令在被执行时:/n控制所述成像系统以捕获至少一些细胞的多个图像,在所述多个焦平面的各个焦平面捕获所述多个图像的每个图像;/n从所述多个图像的每个图像中的所述至少一些细胞中确定至少一个细胞的面积;/n使用所述多个图像的至少一些图像中所述至少一个细胞的面积,从所述多个图像中选择一个图像作为聚焦图像;以及/n估测所述聚焦图像中的细胞的数量。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170519 US 62/508,9531.一种系统,其包括:
成像系统,其配置为在多个焦平面对容器中的多个细胞进行成像;
至少一个控制器,其耦合至所述成像系统;以及
所述至少一个控制器耦合有包含指令的存储器,所述指令在被执行时:
控制所述成像系统以捕获至少一些细胞的多个图像,在所述多个焦平面的各个焦平面捕获所述多个图像的每个图像;
从所述多个图像的每个图像中的所述至少一些细胞中确定至少一个细胞的面积;
使用所述多个图像的至少一些图像中所述至少一个细胞的面积,从所述多个图像中选择一个图像作为聚焦图像;以及
估测所述聚焦图像中的细胞的数量。
2.根据权利要求1所述的系统,其中所述多个细胞已经暴露于选择性标记死细胞的试剂。
3.根据权利要求2所述的系统,其中所述试剂包含对所述死细胞进行选择性着色的染色剂,其中所述成像系统包括配置为过滤至少一些可见光的滤光器。
4.根据权利要求3所述的系统,其中所述成像系统包括单色成像装置和配置为发射可见光的光源,其中所述滤光器设置在所述光源和所述单色成像装置之间。
5.根据权利要求3所述的系统,其中所述滤光器配置为过滤至少一些波长在510纳米(nm)以上的可见光。
6.根据权利要求3所述的系统,其中所述滤光器配置为过滤至少一些波长在650纳米(nm)以下的可见光。
7.根据权利要求5或6所述的系统,其中所述染色剂包含台盼蓝。
8.根据权利要求1所述的系统,其中至少部分地通过使用来自所述多个图像中的具有最小的所述至少一个细胞的面积的一个图像,从所述多个图像中选择所述一个图像作为所述聚焦图像。
9.根据权利要求1所述的系统,其中至少部分地通过计数与所述至少一个细胞相关的像素的数量来鉴别所述至少一个细胞的面积。
10.根据权利要求1所述的系统,其中至少部分地通过估测所述至少一个细胞的轴的长度来鉴别所述至少一个细胞的面积。
11.根据权利要求1所述的系统,其中估测所述聚焦图像中的细胞的数量包括:
鉴别所述聚焦图像中的多个目标物;
将所述多个目标物的第一子集分类为活细胞;以及
计数所述多个目标物的所述第一子集中的活细胞的数量。
12.根据权利要求11所述的系统,其中估测所述聚焦图像中的细胞的数量包括:
将所述多个目标物的第二子集分类为死细胞;以及
计数所述多个目标物的所述第二子集中的死细胞的数量。
13.根据权利要求11所述的系统,其中鉴别所述多个目标物包括:将所述聚焦图像的前景与所述聚焦图像的背景分开并将所述聚焦图像的前景中的至少一部分鉴别为目标物。
14.根据权利要求13所述的系统,其中将所述聚焦图像的所述前景与所述聚焦图像的所述背景分开包括对所述聚焦图像进行阈值化。
15.根据权利要求11所述的系统,其中估测所述聚焦图像中的细胞的数量包括将所述多个目标物的第二子集分类为碎片。
16.根据权利要求11所述的系统,其中将所述多个目标物的所述第一子集分类为活细胞包括:
将来自所述多个目标物的所述第一子集的第一目标物分类为单个活细胞;
将来自所述多个目标物的所述第一子集的第二目标物分类为活细胞簇;以及
至少部分地基于与所述第二目标物相关的强度轮廓来估测所述第二目标物中的活细胞的数量。
17.根据权利要求16所述的系统,其中将来自所述多个目标物的所述第一子集的所述第一目标物分类为单个活细胞包括提供输入至分类器,所述分类器选自由下列各项组成的组:决策树、神经网络、判别函数、贝叶斯网络和支持向量机。
18.根据权利要求16所述的系统,其中将来自所述多个目标物的所述第一子集的所述第二目标物分类为活细胞簇包括提供输入至分类器,所述分类器选自由以下各项组成的组:决策树、神经网络、判别函数、贝叶斯网络和支持向量机。
19.根据权利要求1所述的系统,其中所述系统还包括所述容器,并且其中所述容器为血细胞计数器。
20.根据权利要求1所述的系统,其中所述成像系统包括选自由下列各项组成的组的至少一个成像装置:单色成像装置、红绿蓝(RGB)成像装置、光谱成像装置、荧光成像装置以及多通道成像装置。
21.根据权利要求1所述的系统,其中所述多个图像包括至少一个明场图像。
22.一种方法,其包括:
接收容器中的多个细胞;
捕获所述多个细胞中至少一些细胞的聚焦图像,其中捕获所述聚焦图像包括:
使用成像系统捕获所述至少一些细胞的多个图像,在多个焦平面的各个焦平面捕获所述多个图像的每个图像;
使用至少一个控制器从所述多个图像的每个图像中的所述至少一些细胞中确定至少一个细胞的面积;以及
使用所述至少一个...
【专利技术属性】
技术研发人员:K·L·王,M·斯库利,
申请(专利权)人:兴盛生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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