【技术实现步骤摘要】
一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用
本专利技术涉及一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用，属于CHO细胞培养
技术介绍
CHO细胞在生物制药领域具有重要的地位，由于其具有翻译后修饰功能，表达的蛋白质活性比较高，因此被广泛的应用于重组蛋白的表达。血清培养CHO细胞优点是细胞密度及蛋白产量较高，缺点是血清价格昂贵、易被支原体及病毒污染；血清中含有大量的蛋白质不利于生物制品的下游分离纯化，同时造成产物的回收率和纯度较低。此外，由于培养基添加蛋白成分，一方面增加培养基成本，另外一方面给下游蛋白纯化带来困难，用无血清无蛋白培养基培养CHO细胞成为规模化培养的趋势。目前国内CHO细胞无血清培养基细胞生长密度比较低，并且目的蛋白表达量低，公布号为CN109337861A的中国专利技术专利申请中公开了无血清培养基中需要添加胰岛素和人血清白蛋白，增加的培养基成本并且为下游的重组蛋白的纯化带来困难。公布号为CN104073463A的中国专利技术专利申请中公开了无血清培养基细胞生长倍数为11.59(不...
【技术保护点】
1.一种无血清无蛋白CHO细胞培养基，包括氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，其特征在于，所述脂类为：亚麻酸0.02-0.15mg/L、孕酮0.02-0.15mg/L、亚油酸0.04-0.24mg/L、胆固醇1-7.5mg/L和花生四烯酸0.001-0.008mg/L；所述碳水化合物和添加剂为：柠檬酸铁10-40mg/L、柠檬酸钠70-210mg/L、丙酮酸钠55-160mg/L、腐胺0.05-0.6mg/L、氯化胆碱10-40mg/L、胸腺嘧啶0.6-1.8mg/L、抗坏血酸磷酸酯镁0.5-3mg/L、乙醇胺0.5-3mg/L、金精三羧酸1.0-1...
【技术特征摘要】
1.一种无血清无蛋白CHO细胞培养基，包括氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，其特征在于，所述脂类为：亚麻酸0.02-0.15mg/L、孕酮0.02-0.15mg/L、亚油酸0.04-0.24mg/L、胆固醇1-7.5mg/L和花生四烯酸0.001-0.008mg/L；所述碳水化合物和添加剂为：柠檬酸铁10-40mg/L、柠檬酸钠70-210mg/L、丙酮酸钠55-160mg/L、腐胺0.05-0.6mg/L、氯化胆碱10-40mg/L、胸腺嘧啶0.6-1.8mg/L、抗坏血酸磷酸酯镁0.5-3mg/L、乙醇胺0.5-3mg/L、金精三羧酸1.0-12.5mg/L、次黄嘌呤3.5-10.5mg/L、甲基-β-环糊精25-150mg/L、海藻糖50-150mg/L、果糖800-1200mg/L、D-葡萄糖2000-6000mg/L、葡聚糖硫酸钠25-150mg/L和Kolliphorp1881000-2500mg/L。
2.根据权利要求1所述的无血清无蛋白CHO细胞培养基，其特征在于，所述脂类为：亚麻酸0.08mg/L、孕酮0.08mg/L、亚油酸0.168mg/L、胆固醇5mg/L和花生四烯酸0.002mg/L。
3.根据权利要求1所述的无血清无蛋白CHO细胞培养基，其特征在于，所述碳水化合物和添加剂为：柠檬酸铁20mg/L、柠檬酸钠147mg/L、丙酮酸钠110mg/L、腐胺0.3mg/L、氯化胆碱30mg/L、胸腺嘧啶1.2mg/L、抗坏血酸磷酸酯镁2.5mg/L、乙醇胺2.5mg/L、金精三羧酸2.5mg/L、次黄嘌呤7mg/L、甲基-β-环糊精75mg/L、海藻糖100mg/L、果糖1000mg/L、D-葡萄糖5000mg/L、葡聚糖硫酸钠100mg/L和Kolliphorp1882000mg/L。
4.根据权利要求1或2或3所述的无血清无蛋白CHO细胞培养基，其特征在于，所述氨基酸为：L-组氨酸盐酸盐一水合物45-135mg/L、L-异亮氨酸80-250mg/L、L-亮氨酸85-270mg/L、L-赖氨酸盐酸盐135-410mg/L、L-蛋氨酸35-115mg/L、L-苯丙氨酸50-160mg/L、L-苏氨酸80-240mg/L、L-色氨酸25-80mg/L、L-缬氨酸79-240mg/...
【专利技术属性】
技术研发人员：米春柳，王天云，林艳，赵春鹏，樊振林，杨献军，曹祥祥，路江涛，
申请(专利权)人：新乡医学院，河南普诺易生物制品研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
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