塞内卡病毒A免疫原性组合物及其方法技术

本发明专利技术涉及杀死的/灭活的和/或重组的塞内卡病毒A免疫原性组合物和疫苗，以及用此类免疫原性组合物和疫苗预防或治疗有需要的动物的方法。

Immunogenic composition and method of Seneca virus A

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】塞内卡病毒A免疫原性组合物及其方法序列表本申请含有根据37C.F.R.1.821–1.825的序列表。本申请所附的序列表通过引用整体并入本文。专利技术背景A.
本专利技术涉及塞内卡谷病毒A或塞内卡病毒A(SVA)，及其作为免疫原性组合物或疫苗以治疗受塞内卡病毒A感染的动物的用途。B.相关技术描述SVA是微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)内的无包膜、单链、正义RNA病毒。口蹄疫病毒(FMDV)和猪水泡病病毒(SVDA)也是微小核糖核酸病毒科的成员。该病毒最初作为来自细胞培养基的污染物被发现(参见Hales，L.M.等人，CompletegenomesequenceanalysisofSenecaValleyvirus-001，anoveloncolyticpicornavirus.JGenVirol，2008.89(Pt5)：第1265-75页，通过引用整体并入本文)。然而，已在猪、牛、鼠和人中检测到针对该病毒的中和抗体(参见Knowles，N.J.等人，EpidemiologyofSenecaValleyVirus:IdentificationandCharacterizationofIsolatesfromPigsintheUnitedStates，inTheNorthernLightsEUROPIC2006-14thmeetingoftheEuropeanStudyGroupontheMolecularBiologyofPicornaviruses.2006:Saairselka，Inari，芬兰，通过引用整体并入本文)。感染后报告的临床体征包括口鼻部和冠状带上的水泡病变，急性跛行，冠状带溃疡和蹄脱落(Singh，K.等人，SenecaValleyVirusandvesicularlesionsinapigwithidiopathicvesiculardisease.JVetSciTechnol，2012.3(6)，以及Pasma，T.，S.Davidson和S.L.Shaw，IdiopathicvesiculardiseaseinswineinManitoba.CVJ，2008.49:第84-85页，两者均通过引用整体并入本文)。在2016年，当细胞培养繁殖的SVA分离株用于接种常规动物，并且在接种后四天观察到水泡病变时，Koch的假设得以实现(Montiel，N.等人，VesicularDiseasein9-Week-OldPigsExperimentallyInfectedwithSenecavirusA.EmergInfectDis，2016.22(7)：第1246-8页，通过引用整体并入本文)。US8,039,606描述了塞内卡谷病毒治疗肿瘤的用途。然而，这种塞尼卡谷病毒不同于本专利技术的SVA。在美国、加拿大、澳大利亚、意大利、新西兰和巴西，已存在无法解释的SVA病例增加。进一步地，由于临床体征与FMDV的相似性，这种病毒引起了养猪业的兴趣。兽医生物制品中心(CenterforVeterinaryBiologics)(CVB)通知16-03确认，CVB对许可用于SVA病毒的生物制品和/或预防剂感兴趣。
技术实现思路
本专利技术提供了克服本领域缺陷的免疫原性组合物、疫苗和相关方法。所述组合物和方法提供了免疫原性组合物，其包括SVA的无包膜(+)单链RNA病毒的灭活/杀死的和/或重组形式。特别地，本申请提供了用于在猪中生成免疫应答的疫苗，用于保护免受与塞内卡病毒A相关的疾病。本文的塞内卡病毒A分离株NAC#20150909(SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和/或SEQIDNO：3)从由5月龄的猪收集的水泡液中分离，所述猪显示出在口鼻部和冠状带上的水泡病变。本专利技术的免疫原性组合物和疫苗包含SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和/或SEQIDNO：3。本专利技术的示例性组合物包含SEQIDNO：3的多肽序列或其对SVA具有免疫反应性的片段。本专利技术的免疫原性组合物和疫苗包含SVA抗原，在一个非限制性实例中，所述SVA抗原经由重组杆状病毒在昆虫细胞中表达，所述重组杆状病毒表达经修饰的SVAP1、2A，部分2B和3B、以及3C蛋白酶，例如编码氨基酸序列(SEQIDNO：19)的经修饰的SVA核酸序列(SEQIDNO：18)，并且通常还包括佐剂。疫苗还可以包括其它组分，例如防腐剂、稳定剂和针对其它猪病原体的抗原。适用于本专利技术的优选的P1-2A-P3核酸序列是编码P1-2A-P3多肽的多核苷酸，所述多核苷酸与SEQIDNO：18、20、22、24、32和33具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％或89％，更优选至少90％、91％、92％、93％或94％，且最优选至少95％、96％、96.1％、96.2％、96.3％、96.4％、96.5％、96.6％、96.7％、96.8％、96.9％、97％、97.1％、97.2％、97.3％、97.4％、97.5％、97.6％、97.7％、97.8％、97.9％、98％、98.1％、98.2％、98.3％、98.4％、98.5％、98.6％、98.7％、98.8％、98.9％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％的序列相同性。“如本文使用的，应特别理解术语“与SEQIDNO：X的序列相同性”或“相同SEQIDNO：X”分别等价于术语“在SEQIDNO：X的长度上与SEQIDNO：X的序列相同性”或“在SEQIDNO：X的长度上与SEQIDNO：X的序列相同”，分别地，其中在此上下文中，“X”是选自18、20、22、24、32和33”的任何整数。适用于本专利技术的优选P1-2A-P3多肽是具有SEQIDNO:19、21、23、25、27和29中所示的序列的多肽，与SEQIDNO:19、21、23、25、27和29具有至少80％的同源性，例如与SEQIDNO:19、21、23、25、27和29具有至少85％的同源性，例如与SEQIDNO:19、21、23、25、27和29具有至少85％的同源性，例如与SEQIDNO:19、21、23、25、27和29具有至少90％的同源性，例如与SEQIDNO:19、21、23、25、27和29具有至少95％、至少98％或至少99％的同源性。在另一个方面，本专利技术提供了编码一种或多种多肽、抗体构建体或抗体缀合物的核酸序列。编码多肽的基因序列包含与SEQIDNO：1或SEQIDNO：2的序列至少95％、90％、85％或甚至80％同源和/或相同的核酸序列，或其编码对SVA具有免疫反应性的多肽的片段。本专利技术的示例性核酸序列包括SEQIDNO：1、SEQIDNO：2及其编码对SVA具有免疫反应性的多肽的片段的任何一种序列。此外，如本文使用的，本专利技术的多肽包括但不限于包含以下的多肽：i)包含SEQIDNO：3的氨基酸序列的多肽；ii)与i本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸，其包含具有选自以下的核苷酸序列的多核苷酸：/n(a)选自SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的核苷酸序列；/n(b)与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、至少99.9％相同的核苷酸序列；/n(c)编码具有选自SEQ ID NO：3的氨基酸序列的多肽的核苷酸序列；/n(d)编码具有氨基酸序列的多肽的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO：3至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、至少99.9％相同；/n(e)(a)至(d)的任何核苷酸序列的互补链；/n(f)(a)至(e)的任何核苷酸序列的DNA等价物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170712 US 62/531,578;20171122 US 62/590,2091.一种核酸，其包含具有选自以下的核苷酸序列的多核苷酸：
(a)选自SEQIDNO：1和SEQIDNO：2的核苷酸序列；
(b)与SEQIDNO：1或SEQIDNO：2至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、至少99.9％相同的核苷酸序列；
(c)编码具有选自SEQIDNO：3的氨基酸序列的多肽的核苷酸序列；
(d)编码具有氨基酸序列的多肽的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQIDNO：3至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、至少99.9％相同；
(e)(a)至(d)的任何核苷酸序列的互补链；
(f)(a)至(e)的任何核苷酸序列的DNA等价物。


2.根据权利要求1的核酸，其中所述核酸编码塞内卡病毒A(SVA)。


3.根据权利要求1或权利要求2的核酸，其中所述塞内卡病毒A(SVA)能够在对象中诱导感染，特别是在具有与此类感染相关或由此类感染引起的临床体征的对象中诱导感染，所述临床体征选自：特发性水疱病，水疱病例如位于口鼻部、口腔粘膜和/或其中皮肤和蹄壁相交处(冠状带)的开放或闭合性水泡或病变，甲床出血，伴随在冠状带处或周围的发红和肿胀的突然/急性跛行；冠状带溃疡和蹄脱落；以及突然停止进食，嗜睡，厌食和/或发烧高达华氏105°(摄氏～40.6°)的繁殖雌性；优选地，所述对象是猪。


4.一种塞内卡病毒A(SVA)，其基因组包含根据权利要求1(a)至(e)的核糖核酸。


5.根据权利要求4的塞内卡病毒A(SVA)，其中所述塞内卡病毒是减毒的或杀死的/灭活的。


6.一种载体，其包含根据权利要求1至3中任一项的核酸。


7.一种宿主细胞，其包含根据权利要求6的载体。


8.一种多肽，其具有选自以下的氨基酸序列：
(a)具有由权利要求1(a)至(b)的核苷酸编码的氨基酸序列的多肽；
(b)具有选自SEQIDNO：3的氨基酸序列的多肽；
(c)具有与SEQIDNO：3至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、至少99.9％相同的氨基酸序列的多肽；
(d)根据(a)、(b)和/或(c)的多肽的多肽片段；
(e)多肽片段，其包含SEQIDNO：3的序列中包括的至少5个，优选8个，更优选10个，甚至更优选15个邻接氨基酸残基；
(f)多肽序列，其是具有氨基酸序列的P1-2A-P3多肽，所述氨基酸序列由选自以下的核苷酸序列编码：SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:24、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33；
(g)多肽序列，其是具有氨基酸序列的P1-2A-P3多肽，所述氨基酸序列由与SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:24、SEQIDNO:32和/或SEQIDNO:33至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％相同的核苷酸序列编码；
(h)多肽序列，其是具有选自以下的氨基酸序列的P1-2A-P3多肽：SEQIDNO：19、SEQIDNO：21、SEQIDNO：23、SEQIDNO：25、SEQIDNO：27、SEQIDNO：...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·V·耶尔，A·R·帕特森，J·G·维多利亚，E·M·沃恩，L·A·赫尔南德斯，J·L·英格利希，
申请(专利权)人：勃林格殷格翰动物保健美国有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US