一种南五味子药材UPLC特征图谱的构建方法及其鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种南五味子药材UPLC特征图谱构建方法及其鉴别方法，所述的南五味子药材UPLC特征图谱的构建方法包含如下步骤：（1）精密称取南五味子药材，制备得到南五味子药材供试品溶液；（2）将南五味子药材供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到南五味子药材UPLC特征图谱。本发明专利技术采用UPLC法能从根本上快速、准确的鉴别和区分南五味子，具有一定的特征性；本发明专利技术所述的方法稳定且专属性强，基线平稳，为南五味子药材质量控制提供科学的新方法；本发明专利技术使南五味子药材的质量控制从原来的某几个成分含量测定，上升为对整个药品的品质检测，避免了单一的化学成分检验的缺陷。

Construction and identification of UPLC characteristic map of Schisandra chinensis

【技术实现步骤摘要】
一种南五味子药材UPLC特征图谱的构建方法及其鉴别方法
本专利技术属于中药鉴别领域，具体涉及一种南五味子药材UPLC特征图谱的构建方法及其鉴别方法。
技术介绍
《中国药典》2015年版一部收载南五味子来源为木兰科植物华中五味子的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采摘，晒干，除去果梗和杂质。《本经》记载：“南五味子主益气，咳逆上气，劳伤赢瘦，补不足，强阴，益男子精”。南五味子中药功效在于滋补强壮之力，药用价值极高，具有益气生津、敛肺滋肾、止泻、涩精、安神等功效，用于久嗽虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴、气短脉虚、内热、消渴、心悸失眠等证。南五味子主要含有五味子甲素、五味子酯甲、乙、丙、丁、戊等木脂素类及挥发油类成分。现代药理研究表明，南五味子具显著的抗氧化、抗癌、抗病毒、护肝等作用，可用于治疗糖尿病、小儿泄泻、失眠、顽固性荨麻疹等病症。近年来，由于中药有效成分多样性及复杂性，过往单一成分含量测定不足以说明中药材的质量，亦缺乏专属性。中药指纹图谱既能全面反映中药个体之间的共性，亦能反映中药种群之间的唯一性。运用中药指纹图谱控制中药质量，比目前沿用的方法提供的信息更为全面、丰富，可以为南五味子质量控制提供全面的质量控制手段。目前，鉴别方法包括传统方法和与现代科技结合的色谱方法。现阶段，传统的眼看、口尝、鼻闻、手摸等简便方法由于主观性强，在中药材鉴别已非常局限，而色谱方法诸如UV、IR、NIR、TLC中存在大量的假阳性和假阴性问题，容易导致结论的偏差。目前文献研究关于南五味子的指纹图谱研究并不多，因此，本专利技术采用超高效液相色谱法（UPLC法）建立南五味子特征图谱，能快速，准确的鉴别南五味子药材。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种南五味子药材的UPLC特征图谱的构建方法及其鉴别方法，该方法快速、稳定且专属性强，能够更全面的反应南五味子药材的特征，为南五味子药材质量控制提供科学的新方法。本专利技术所要解决的上述技术问题，通过如下技术方案予以实现：一种南五味子药材UPLC特征图谱的构建方法，其包含如下步骤：（1）精密称取南五味子药材，制备得到南五味子药材供试品溶液；（2）将南五味子药材供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到南五味子药材UPLC特征图谱。作为一种优选方案，所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05~0.15%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.25~0.35mL/min，柱温为25~35℃，检测波长为210~250nm，进样量为0.6~1.8μl。作为一种最优选方案，所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.3mL/min，柱温为30℃，检测波长为230nm，进样量为1μl。作为一种优选方案，梯度洗脱条件为：0~10min，流动相A的体积分数变化为2~10%，流动相B的体积分数变化为98~90%；10~11min，流动相A的体积分数变化为10~51%，流动相B的体积分数变化为90~49%；11~26min，流动相A的体积分数变化为51~54%，流动相B的体积分数变化为49~46%；26~40min，流动相A的体积分数变化为54~95%，流动相B的体积分数变化为46~5%；40~40.01min，流动相A的体积分数变化为95~2%，流动相B的体积分数变化为5~98%；40.01~45min，流动相A的体积分数为2%，流动相B的体积分数为98%。作为一种优选方案，所述的供试品溶液通过如下步骤的方法制备得到：取南五味子粉末0.3~0.7g，精密称定，置具容器中，精密加入60~80%乙醇40~60ml，称定重量，超声处理20~40分钟，放冷，再称定重量，用60~80%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。作为一种最优选方案，所述的供试品溶液通过如下步骤的方法制备得到：取南五味子粉末0.5g，精密称定，置具容器中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。本专利技术还提供了一种南五味子药材的鉴别方法，包括如下步骤：（1）精密称取待鉴别南五味子药材，制备得到待鉴别南五味子药材样品溶液；（2）精密吸取待鉴别南五味子药材样品溶液，注入超高效液相色谱仪，测定，即得待鉴别南五味子药材UPLC特征图谱；（3）将测得的UPLC特征图谱与构建出的南五味子药材UPLC特征图谱进行比对，若与南五味子药材UPLC特征图谱一致，则为质量合格的南五味子药材。作为一种优选方案，所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05~0.15%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.25~0.35mL/min，柱温为25~35℃，检测波长为210~250nm，进样量为0.6~1.8μl。作为一种最优选方案，所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.3mL/min，柱温为30℃，检测波长为230nm，进样量为1μl。作为一种优选方案，梯度洗脱条件为：0~10min，流动相A的体积分数变化为2~10%，流动相B的体积分数变化为98~90%；10~11min，流动相A的体积分数变化为10~51%，流动相B的体积分数变化为90~49%；11~26min，流动相A的体积分数变化为51~54%，流动相B的体积分数变化为49~46%；26~40min，流动相A的体积分数变化为54~95%，流动相B的体积分数变化为46~5%；40~40.01min，流动相A的体积分数变化为95~2%，流动相B的体积分数变化为5~98%；40.01~45min，流动相A的体积分数为2%，流动相B的体积分数为98%。作为一种优选方案，所述的供试品溶液通过如下步骤的方法制备得到：取南五味子粉末0.3~0.7g，精密称定，置具容器中，精密加入60~80%乙醇40~60ml，称定重量，超声处理20~40分钟，放冷，再称定重量，用60~80%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。作为一种最优选方案，所述的供试品溶液通过如下步骤的方法制备得到：取南五味子粉末0.5g，精密称定，置具容器中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。有益效果：（1）本专利技术采用UPLC法能从根本上快速、准确的鉴别和区分南五味子，具有一定的特征性；（2）本专利技术所述的方法稳定且专属性强，基线平稳，为南五味子药材质量控制提供科学的新方法；（3）本专利技术通过对13批不同产地南五味子药材进行测定，共确定了7个特征峰，对7个共有峰进行了化学成分的指认，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种南五味子药材UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，包含如下步骤：/n（1）精密称取南五味子药材，制备得到南五味子药材供试品溶液；/n（2）将南五味子药材供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到南五味子药材UPLC特征图谱。/n

【技术特征摘要】
1.一种南五味子药材UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，包含如下步骤：
（1）精密称取南五味子药材，制备得到南五味子药材供试品溶液；
（2）将南五味子药材供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到南五味子药材UPLC特征图谱。


2.根据权利要求1所述的南五味子药材UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05~0.15%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.25~0.35mL/min，柱温为25~35℃，检测波长为210~250nm，进样量为0.6~1.8μl。


3.根据权利要求2所述的南五味子药材UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，梯度洗脱条件为：0~10min，流动相A的体积分数变化为2~10%，流动相B的体积分数变化为98~90%；10~11min，流动相A的体积分数变化为10~51%，流动相B的体积分数变化为90~49%；11~26min，流动相A的体积分数变化为51~54%，流动相B的体积分数变化为49~46%；26~40min，流动相A的体积分数变化为54~95%，流动相B的体积分数变化为46~5%；40~40.01min，流动相A的体积分数变化为95~2%，流动相B的体积分数变化为5~98%；40.01~45min，流动相A的体积分数为2%，流动相B的体积分数为98%。


4.根据权利要求1所述的南五味子药材UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，所述的供试品溶液通过如下步骤的方法制备得到：取南五味子粉末0.3~0.7g，精密称定，置具容器中，精密加入60~80%乙醇40~60ml，称定重量，超声处理20~40分钟，放冷，再称定重量，用60~80%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。


5.根据权利要求1所述的南五味子药材UPLC特征图谱构建方法，其特征在于，所述的供试品溶液通过如下步骤的方法制备得到：取南五味子粉末0.5g，精密称定，置具容器中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。


6.一种南五味子药材的鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈芳，梁月仪，刘晓霞，李乐，孙冬梅，王利伟，陈向东，魏梅，程学仁，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44