不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法技术

本发明专利技术公开了不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法，包括以下步骤：S1、对照品溶液制备：取精密称取咖啡酸395.00μg、芦丁530.00μg、芹菜苷784.00μg、木犀草苷535.00μg、木犀草素541.00μg、芹菜素406.00μg、黄芩素‑7‑甲醚400.00μg置于25mL量瓶中，加甲醇定容，分别配制成质量浓度为158.00、212.00、313.60、216.40、214.00、162.40、160.00μg/mL的对照品溶液；S2、供试品溶液制备；S3、方法学考察；S4、指纹图谱建立及分析。本发明专利技术通过香薷95%乙醇提取液的分析采用色谱柱，流动相乙腈‑0.2%磷酸，梯度洗脱，柱温30℃，体积流量1.0mL/min，检测波长210nm，建立不同产地香薷HPLC指纹图谱，并测定7种成分的含有量，可用于不同产地香薷的质量控制，该方法准确稳定，重复性好。

Establishment of HPLC fingerprint of Elsholtzia from different habitats and determination of its components

【技术实现步骤摘要】
不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法
本专利技术涉及香薷
，具体来说，涉及不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法。
技术介绍
香薷，又名香葇、香茹，为江西省道地药材，其入药始见于《名医别录》，古人治暑病，常以香薷饮为首药，是唇形科植物石香薷MoslachinensisMaxim或江香薷Moslachinensis‘Jiangxiangru’的干燥地上部分。主要功效为发汗而解表，化湿和中而解暑，开宣肺气而利水消肿。香薷作为全草入药，临床上主要用于治疗暑湿感冒、恶寒发热、头痛无汗、水肿、腹痛吐泻。香薷中的活性成分主要为挥发油类、黄酮类、多糖类等，现代研究表明香薷中黄酮类是其发挥抗菌抗炎症作用的主要成分之一。现对不同产地不同批次的香薷饮片及鲜品建立HPLC指纹图谱，并测定7种黄酮类成分的含有量，以期对香薷质量控制及道地药材考证提供参考。针对相关技术中的问题，目前尚未提出有效的解决方案。
技术实现思路
针对相关技术中的问题，本专利技术提出不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法，以克服现有相关技术所存在的上述技术问题。本专利技术的技术方案是这样实现的：不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法，包括以下步骤：S1、对照品溶液制备：取精密称取咖啡酸395.00μg、芦丁530.00μg、芹菜苷784.00μg、木犀草苷535.00μg、木犀草素541.00μg、芹菜素406.00μg、黄芩素-7-甲醚400.00μg置于25mL量瓶中，加甲醇定容，分别配制成质量浓度为158.00、212.00、313.60、216.40、214.00、162.40、160.00μg/mL的对照品溶液；S2、供试品溶液制备；S3、方法学考察；S4、指纹图谱建立及分析；其中，步骤S2供试品溶液制备，包括以下步骤：S201、鲜品前处理：将新鲜采摘的香薷药材抢水洗净，后放置阴凉通风处阴干，剪成1-2cm短段，备用；S202、溶液制备：精密称取香薷药材2.000g，加入20mL95％乙醇浸泡1h后超声45min，过滤，取续滤液，0.22μm微孔滤膜过滤。进一步的，步骤S3、方法学考察，包括以下步骤：系统适应性试验：取S1对照品溶液，制备色谱图；线性关系考察：精密吸取步骤S1对照品溶液适量至5mL量瓶中，甲醇定容至刻度，配制不同质量浓度的对照品溶液，以峰面积为纵坐标Y，各对照品质量浓度为横坐标X，进行回归，建立线性关系表；精密度试验：精密吸取步骤S1对照品溶液适量，0.22μm微孔滤膜过滤，通过色谱连续进样6次，测得咖啡酸、芦丁、芹菜苷、木犀草苷、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚各主要共有峰相对保留时间和峰面积RSD＜2.75％，确定精密度良好。进一步的，步骤系统适应性试验中，色谱条件为色谱柱250nm×4.6nm，5μm、乙腈流动相-0.2％磷酸，梯度洗脱，检测波长210nm，体积流量1.0mL/min，柱温30℃，进样量10μL。本专利技术的有益效果：本专利技术通过香薷95％乙醇提取液的分析采用色谱柱，流动相乙腈-0.2％磷酸，梯度洗脱，柱温30℃，体积流量1.0mL/min，检测波长210nm，建立不同产地香薷HPLC指纹图谱，并测定7种成分的含有量，可用于不同产地香薷的质量控制，该方法准确稳定，重复性好。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是根据本专利技术实施例的不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法的流程示意图；图2是根据本专利技术实施例的不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法的黄芩素-7-甲醚对照品HPLC图谱。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。根据本专利技术的实施例，提供了不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法。如图1-2所示，根据本专利技术实施例的不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法，包括以下步骤：S1、对照品溶液制备：取精密称取咖啡酸395.00μg、芦丁530.00μg、芹菜苷784.00μg、木犀草苷535.00μg、木犀草素541.00μg、芹菜素406.00μg、黄芩素-7-甲醚400.00μg置于25mL量瓶中，加甲醇定容，分别配制成质量浓度为158.00、212.00、313.60、216.40、214.00、162.40、160.00μg/mL的对照品溶液；S2、供试品溶液制备；S3、方法学考察；S4、指纹图谱建立及分析；其中，步骤S2供试品溶液制备，包括以下步骤：S201、鲜品前处理：将新鲜采摘的香薷药材抢水洗净，后放置阴凉通风处阴干，剪成1-2cm短段，备用；S202、溶液制备：精密称取香薷药材2.000g，加入20mL95％乙醇浸泡1h后超声45min，过滤，取续滤液，0.22μm微孔滤膜过滤。其中，步骤S3、方法学考察，包括以下步骤：系统适应性试验：取S1对照品溶液，制备色谱图；线性关系考察：精密吸取步骤S1对照品溶液适量至5mL量瓶中，甲醇定容至刻度，配制不同质量浓度的对照品溶液，以峰面积为纵坐标Y，各对照品质量浓度为横坐标X，进行回归，建立线性关系表，如表一所示：表一精密度试验：精密吸取步骤S1对照品溶液适量，0.22μm微孔滤膜过滤，通过色谱连续进样6次，测得咖啡酸、芦丁、芹菜苷、木犀草苷、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚各主要共有峰相对保留时间和峰面积RSD＜2.75％，确定精密度良好。其中，步骤系统适应性试验中，色谱条件为色谱柱250nm×4.6nm，5μm、乙腈流动相-0.2％磷酸，梯度洗脱，检测波长210nm，体积流量1.0mL/min，柱温30℃，进样量10μL。另外，预先将12批次样品HPLC指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，以1号批次香薷药材为参照图谱，以平均数法、时间窗宽度0.1生成对照图谱。详细比较了所有批次样品的HPLC色谱图，共确定了14个特征共有峰，其中2号峰为咖啡酸、4号峰为芦丁、5号峰为芹菜苷、6号峰为木犀草苷、7号峰为木犀草素、9号峰为芹菜素、10号峰为黄芩素-7-甲醚。以10号峰为参照峰，计算各色谱峰保留时间和保留峰面积与同一图谱中10号峰的保留时间和保留峰面积比值，共有峰相对保留时间的RSD值较小，而相对峰面积的RSD值较大，表明不同产地香薷的指纹图谱中主要峰本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、对照品溶液制备：取精密称取咖啡酸395.00μg、芦丁530.00μg、芹菜苷784.00μg、木犀草苷535.00μg、木犀草素541.00μg、芹菜素406.00μg、黄芩素-7-甲醚400.00μg置于25mL量瓶中，加甲醇定容，分别配制成质量浓度为158.00、212.00、313.60、216.40、214.00、162.40、160.00μg/mL的对照品溶液；/nS2、供试品溶液制备；/nS3、方法学考察；/nS4、指纹图谱建立及分析；/n其中，步骤S2供试品溶液制备，包括以下步骤：/nS201、鲜品前处理：将新鲜采摘的香薷药材抢水洗净，后放置阴凉通风处阴干，剪成1-2cm短段，备用；/nS202、溶液制备：精密称取香薷药材2.000g，加入20mL95%乙醇浸泡1h后超声45min，过滤，取续滤液，0.22μm微孔滤膜过滤。/n

【技术特征摘要】
1.不同产地香薷HPLC指纹图谱的建立及其成分测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、对照品溶液制备：取精密称取咖啡酸395.00μg、芦丁530.00μg、芹菜苷784.00μg、木犀草苷535.00μg、木犀草素541.00μg、芹菜素406.00μg、黄芩素-7-甲醚400.00μg置于25mL量瓶中，加甲醇定容，分别配制成质量浓度为158.00、212.00、313.60、216.40、214.00、162.40、160.00μg/mL的对照品溶液；
S2、供试品溶液制备；
S3、方法学考察；
S4、指纹图谱建立及分析；
其中，步骤S2供试品溶液制备，包括以下步骤：
S201、鲜品前处理：将新鲜采摘的香薷药材抢水洗净，后放置阴凉通风处阴干，剪成1-2cm短段，备用；
S202、溶液制备：精密称取香薷药材2.000g，加入20mL95%乙醇浸泡1h后超声45min，过滤，取续滤液，0.22μm微孔滤膜过滤。


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【专利技术属性】
技术研发人员：龚千锋，于欢，严丽萍，张依欣，
申请(专利权)人：江西中医药大学，
类型：发明
国别省市：江西;36