一种提高虾青素产量的生产方法技术

本发明专利技术涉及一种提高虾青素产量的生产方法，该方法包括：取红法夫酵母菌发酵液于75℃恒温水浴中5h后，加入酶活浓度0.15U/mL的(1→3)‑β‑D‑葡聚糖酶酶解0.5h，沸水浴灭活酶，离心，取上清液；向所述上清液中加入3mL 3mol/L HCl，沸水浴处理3min，冷却，离心分离洗涤两次，再添加5mL甲醇振荡提取1min，离心，取上清液，即获得虾青素。该方法可使红法夫酵母的破壁效率达90％，可提高虾青素含量。

A method of increasing astaxanthin production

【技术实现步骤摘要】
一种提高虾青素产量的生产方法
本专利技术涉及虾青素
，具体涉及一种提高虾青素产量的生产方法。
技术介绍
虾青素(astaxanthin)，又名虾红素，是一种极具开发潜力的营养色素和抗氧化剂，具有强抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗机体着色、抗癌等许多重要的生物学功能，在食品、医药、化妆品、水产养殖、畜禽养殖、化工等行业具有广阔的应用前景。虾青素的生产方法可分为化学合成和生物合成。目前，化学合成虾青素工艺成熟，成本低，但与天然虾青素相比，化学合成的虾青素生物活性较低。法夫酵母因显著的虾青素合成能力而备受关注，是天然虾青素的重要来源。相关技术中，有通过高产法夫酵母菌株的选育、虾青素发酵条件的优化、虾青素提取工艺的优化来提高虾青素的产量。但，目前由法夫酵母培养获得虾青素的产率还不高，不适应工业化的需求。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的目的在于提供一种提高虾青素产量的生产方法。该方法可使红法夫酵母的破壁效率达90％，可提高虾青素含量。为此，在本专利技术的一方面，本专利技术提出了一种提高虾青素产量的生产方法，包括以下步骤：(1)取红法夫酵母菌发酵液于75℃恒温水浴中5h后，加入酶活浓度0.15U/mL的(1→3)-β-D-葡聚糖酶酶解0.5h，沸水浴灭活酶，离心，取上清液；(2)向所述上清液中加入3mL3mol/LHCl，沸水浴处理3min，冷却，离心分离洗涤两次，再添加5mL甲醇振荡提取1min，离心，取上清液，即获得虾青素。根据本专利技术的一种提高虾青素产量的生产方法，通过(1→3)-β-D-葡聚糖酶对红法夫酵母菌进行破壁处理，破壁效率可达到90％，能够有效实现规模化生产破壁红法夫酵母产品和虾青素产品，提高虾青素的产量。另外，根据本专利技术上述实施例提出的一种提高虾青素产量的生产方法，还可以具有如下附加的技术特征：根据本专利技术的实施例，所述步骤(1)还包括：制备培养基，培养基组成成分包括混合碳源30g/L、混合氮源7g/L、MgSO4·7H2O1.5g/L、(NH4)3C6H5O72.0g/L、Na2HPO42.0g/L；其中，混合碳源包括糖蜜40％和淀粉糖60％；混合氮源包括玉米浆40％和(NH4)2SO460％；制备红法夫酵母发酵液，取1环红法夫酵母菌苔接种于含30mL种子培养基的250mL三角瓶中，20℃、160r/min培养48h；再将摇瓶种以10％的接种量接入装有含30mL发酵培养基的250mL三角瓶中，20℃、160r/min培养72h以获得所述红发夫酵母发酵液。根据本专利技术的实施例，所述步骤(1)中，红法夫酵母菌发酵液与(1→3)-β-D-葡聚糖酶的体积比为5:1。根据本专利技术的实施例，所述步骤(1)中，离心为：10000r/min离心10min。根据本专利技术的实施例，在步骤(2)之后，还包括高效液相色谱分析的步骤，所述高效液相色谱分析的色谱条件为：柱温：30℃；流动相：乙睛:甲醇＝1:9(V/V)；检测波长：474nm；进样量：10uL；流速：1.0mL/min；色谱柱为：AgilentZORBAX-C18150×4.6mm。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。具体实施方式以下通过特定的具体实例说明本专利技术的技术方案。应理解，本专利技术提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤；还应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本专利技术可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更
技术实现思路
的情况下，当亦视为本专利技术可实施的范畴。为了更好的理解上述技术方案，下面更详细地描述本专利技术的示例性实施例。虽然显示了本专利技术的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。本专利技术采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。本专利技术提出了一种提高虾青素产量的生产方法，包括以下步骤：(1)取红法夫酵母菌发酵液于75℃恒温水浴中5h后，加入酶活浓度0.15U/mL的(1→3)-β-D-葡聚糖酶酶解0.5h，沸水浴灭活酶，离心，取上清液。其中，红法夫酵母菌发酵液是采用如下方法制备：取1环红法夫酵母菌苔接种于含30mL种子培养基的250mL三角瓶中，20℃、160r/min培养48h；再将摇瓶种以10％的接种量接入装有含30mL发酵培养基的250mL三角瓶中，20℃、160r/min培养72h以获得所述红发夫酵母发酵液。其中，培养基组成成分包括混合碳源30g/L、混合氮源7g/L、MgSO4·7H2O1.5g/L、(NH4)3C6H5O72.0g/L、Na2HPO42.0g/L；其中，混合碳源包括糖蜜40％和淀粉糖60％；混合氮源包括玉米浆40％和(NH4)2SO460％。(2)向所述上清液中加入3mL3mol/LHCl，沸水浴处理3min，冷却，离心分离洗涤两次，再添加5mL甲醇振荡提取1min，离心，取上清液，即获得虾青素。根据本专利技术的一种提高虾青素产量的生产方法，通过(1→3)-β-D-葡聚糖酶对红法夫酵母菌进行破壁处理，破壁效率可达到90％，能够有效实现规模化生产破壁红法夫酵母产品和虾青素产品，提高虾青素的产量。下面参考具体实施例，对本专利技术进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本专利技术。实施例1制备培养基，培养基组成成分包括混合碳源30g/L、混合氮源7g/L、MgSO4·7H2O1.5g/L、(NH4)3C6H5O72.0g/L、Na2HPO42.0g/L；其中，混合碳源包括糖蜜40％和淀粉糖60％；混合氮源包括玉米浆40％和(NH4)2SO460％；制备红法夫酵母发酵液，取1环红法夫酵母菌(购买于北纳生物科技有限公司)苔接种于含30mL种子培养基(上述培养基的组分)的250mL三角瓶中，20℃、160r/min培养48h；再将摇瓶种以10％的接种量接入装有含30mL发酵培养基(上述培养基的组分)的250mL三角瓶中，20℃、160r/min培养72h以获得所述红发夫酵母发酵液。实施例2提取虾青素：取5mL实施例1获得的红法夫酵母菌发酵液于75℃恒温水浴中5h后，加入1mL酶活浓度0.15U/mL的(1→3)-β-D-葡聚糖酶(购买于上海鼓臣生物技术有限公司)溶液酶解0.5h，反应结束后沸水浴终止反应，10000r/min离心10min，取上清液。向所述上清液中加入3mL3mol/LHCl，沸水浴处理3min，迅速冷却，离心分离洗涤两次，再添加5mL甲醇振本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高虾青素产量的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)取红法夫酵母菌发酵液于75℃恒温水浴中5h后，加入酶活浓度0.15U/mL的(1→3)-β-D-葡聚糖酶酶解0.5h，沸水浴灭活酶，离心，取上清液；/n(2)向所述上清液中加入3mL 3mol/L HCl，沸水浴处理3min，冷却，离心分离洗涤两次，再添加5mL甲醇振荡提取1min，离心，取上清液，即获得虾青素。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高虾青素产量的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取红法夫酵母菌发酵液于75℃恒温水浴中5h后，加入酶活浓度0.15U/mL的(1→3)-β-D-葡聚糖酶酶解0.5h，沸水浴灭活酶，离心，取上清液；
(2)向所述上清液中加入3mL3mol/LHCl，沸水浴处理3min，冷却，离心分离洗涤两次，再添加5mL甲醇振荡提取1min，离心，取上清液，即获得虾青素。


2.如权利要求1所述的提高虾青素产量的生产方法，其特征在于，所述步骤(1)还包括：
制备培养基，培养基组成成分包括混合碳源30g/L、混合氮源7g/L、MgSO4·7H2O1.5g/L、(NH4)3C6H5O72.0g/L、Na2HPO42.0g/L；其中，混合碳源包括糖蜜40％和淀粉糖60％；混合氮源包括玉米浆40％和(NH4)2SO460％；
制备红法夫酵母发酵液，取1环红法夫酵母菌苔接种于含30mL种子培养基的250...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜宗然，沈美雄，
申请(专利权)人：厦门昶科生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35