提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法技术

本发明专利技术公开了一种提高2C‑like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法，第一步是从小鼠ESCs培养体系中去除胎牛血清，使小鼠ESCs仍保持原有的多能性特征。第二步是利用视黄酸（RA）在不含有胎牛血清的培养液中提高小鼠ESCs中2C‑like细胞的比例，结果从对照组的0.2%提高到3.3%。本发明专利技术利用特定的诱导方法提高了小鼠ESCs中2C‑like细胞比例，并通过实验手段验证了小鼠ESCs在不含有胎牛血清的培养液中2C‑like基因表达水平和蛋白水平，对哺乳动物全能干细胞研究提供新思路。

Culture medium and culture method of mouse embryonic stem cells to enhance 2C like cells

【技术实现步骤摘要】
提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法
本专利技术涉及小鼠胚胎干细胞诱导培养液，尤其是一种提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法。
技术介绍
哺乳动物合子基因组激活（ZGA）是胚胎发生的关键步骤，发生在小鼠的1-2细胞阶段和人类的4-8细胞阶段，这一阶段对于哺乳动物早期胚胎发育和全能性的形成具有重要意义。在小鼠ESCs中含有部分（小于1%）异质性细胞，即类似2-细胞期胚胎样细胞（2C-like细胞）。2C-like细胞不仅可以表达ZGA转录本，而且具有与2细胞胚胎相似的表观遗传特征。此外，小鼠ESCs中的2C-like细胞在体内发育状态下可同时贡献胚胎和胚外组织中。所以这部分2C-like细胞是体外进行全能性干细胞研究的珍贵模型。但是到目前为止还没有在化学成分明确的培养条件下维持小鼠ESCs中的2C-like状态细胞的维持与自我更新。因此，有效提高哺乳动物ESCs中2C-like细胞比率是展开后续研究的重中之重。专利技术内容本专利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液，其特征在于，每500ml诱导培养液N2B27+2i/LIF+RA组成为：/nN2细胞培养添加剂 2-3 ml/nB27细胞培养添加剂 4-6 ml/n牛血清白蛋白 20-30 mg/n非必需氨基酸 4-6 ml/n左旋谷氨酰胺 4-6 ml/nβ巯基乙醇 ...

【技术特征摘要】
1.一种提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液，其特征在于，每500ml诱导培养液N2B27+2i/LIF+RA组成为：
N2细胞培养添加剂2-3ml
B27细胞培养添加剂4-6ml
牛血清白蛋白20-30mg
非必需氨基酸4-6ml
左旋谷氨酰胺4-6ml
β巯基乙醇0.5-2ml
青霉素链霉素4-5ml
PD03259011.0mM
CHIR990213.0mM
白血病抑制因子LIF500-1500U/ml
视黄酸RA5-15mM
基础培养液余量
所述基础培养液为基础培养液DMEM/F12和基础培养液Neurobasal，二者体积比为1:1。


2.根据权利1所述提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液，其特征在于，每500ml诱导培养液N2B27+2i/LIF+RA组成为：
基础培养液DMEM/F12238.0ml
基础培养液Neurobasal238.0ml
N2细胞培养添加剂2.5ml
B27细胞培养添加剂5...

【专利技术属性】
技术研发人员：包斯琴，吴宝江，王艳秋，李喜和，
申请(专利权)人：内蒙古大学，
类型：发明
国别省市：内蒙;15