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一种活性污泥碱性磷酸酶活性测定方法技术

技术编号:23309166 阅读:43 留言:0更新日期:2020-02-11 16:22
本发明专利技术公开一种活性污泥碱性磷酸酶活性测定方法,主要步骤为:(1)标准曲线绘制、(2)样品测定和(3)碱性磷酸酶活性计算;所述步骤(2)样品测定分为酶反应和测试分析两部分。酶反应具体步骤为:取5mL活性污泥混合液,加2mL甲苯,37℃下200r/min水浴振荡15min后,加入10mL 0.5%磷酸苯二钠,仔细摇匀后,37℃下140r/min水浴振荡培养16h;测试分析具体步骤为:将酶反应液全部转移至50mL比色管,加蒸馏水定容至50mL,使甲苯在刻度线以上,摇匀并静置5min使液面分层,取下层反应液,亲水PTFE滤膜过滤;吸取3mL滤液于50mL比色管中,每管加入5mL pH9.4硼酸盐缓冲液和200μL氯代二溴对苯醌亚胺试剂,显色后稀释至刻度,摇匀;30min后在分光光度计上610nm处比色。

A method for the determination of alkaline phosphatase activity in activated sludge

【技术实现步骤摘要】
一种活性污泥碱性磷酸酶活性测定方法
本专利技术属于微生物活性测定
,特别涉及废水生物处理工艺中活性污泥碱性磷酸酶活性的测定方法。
技术介绍
磷酸酶是一种磷酸酯水解酶,主要形式有碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和磷酸二脂酶,广泛存在于自然界中,如人体,动植物,土壤,沉积物,污泥等。碱性磷酸酶是一种非特异性磷酸酯水解酶,在碱性条件下具有较高的活性,能够催化磷酸脂的水解和多聚磷酸盐的降解,并参与蛋白质、多糖、脂质、核酸等有机物的代谢活动,对自然界磷代谢起着重要的作用。污水生物处理工艺主要以活性污泥为主体。污水中的有机磷化合物经胞外的碱性磷酸酶水解后,可以被微生物吸收和利用。因此,活性污泥碱性磷酸酶活性可用来表示活性污泥分解有机磷能力的高低。了解活性污泥碱性磷酸酶活性有助于深入了解有机物的生物降解过程和生物除磷过程,从而为污水处理工艺的升级改造提供思路。然而,目前的研究大部分是以土壤、水体和沉积物等为研究对象,只有少量研究关注到污水处理过程的碱性磷酸酶活性。碱性磷酸酶活性的测定方法早期是针对土壤样品提出的,然而土壤和活性污泥的性状和组成有差异,目前本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性污泥碱性磷酸酶活性测定方法,其特征在于,包括三个部分,(1)标准曲线绘制、(2)样品测定和(3)碱性磷酸酶活性计算;/n所述步骤(2)样品测定分为酶反应和测试分析两部分:/n其中,酶反应具体步骤为:取5mL活性污泥混合液,置于50mL具塞三角瓶中,加2mL甲苯,37℃下200r/min水浴振荡15min后,加入10mL 0.5%磷酸苯二钠(pH9.4硼酸盐缓冲液配制),仔细摇匀后,37℃下140r/min水浴振荡培养16h;/n其中,测试分析具体步骤为:将酶反应液全部转移至50mL比色管,加蒸馏水定容至50mL,使甲苯在刻度线以上,摇匀并静置5min使液面分层,取下层反应液,0.4...

【技术特征摘要】
1.一种活性污泥碱性磷酸酶活性测定方法,其特征在于,包括三个部分,(1)标准曲线绘制、(2)样品测定和(3)碱性磷酸酶活性计算;
所述步骤(2)样品测定分为酶反应和测试分析两部分:
其中,酶反应具体步骤为:取5mL活性污泥混合液,置于50mL具塞三角瓶中,加2mL甲苯,37℃下200r/min水浴振荡15min后,加入10mL0.5%磷酸苯二钠(pH9.4硼酸盐缓冲液配制),仔细摇匀后,37℃下140r/min水浴振荡培养16h;
其中,测试分析具体步骤为:将酶反应液全部转移至50mL比色管,加蒸馏水定容至50mL,使甲苯在刻度线以上,摇匀并静置5min使液面分层,取下层反应液,0.45微米亲水PTFE滤膜过滤;吸取3mL滤液于50mL比色管中,每管加入5mLpH9.4硼酸盐缓冲液和200μL氯代二溴对苯醌亚胺试剂,显色后稀释至刻度,摇匀;30min后在分光光度计上610nm处比色。


2.根据权利要求1所述的一种活性污泥碱性磷酸酶活性测定方法,其特征在于,所述步骤(1)标准曲线绘制,具体如下:
取1g重蒸酚溶于1L蒸馏水中,得1g/L酚原液。取10mL酚原液,用蒸馏水稀释至1L,得10mg/L酚工作...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵林龙莎
申请(专利权)人:天津大学
类型:发明
国别省市:天津;12

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