编码视杆细胞来源的视锥细胞活力因子的载体制造技术

本发明专利技术涉及编码和能够表达视杆细胞来源的视锥细胞活力因子(RdCVF)的核酸和含有这些核酸的病毒载体。本发明专利技术还涉及包含这些核酸或载体的组合物和药物制剂，生产或分泌RdCVF的方法以及治疗方法。

Vector encoding cone cell activity factor from rod cells

【技术实现步骤摘要】
编码视杆细胞来源的视锥细胞活力因子的载体本申请是分案申请，其原申请的国际申请号为PCT/US2012/062106，国际申请日为2012年10月26日，中国国家申请号为201280064474.1，进入中国国家阶段的进入日为2014年06月25日，专利技术名称为“编码视杆细胞来源的视锥细胞活力因子的载体”。授权信息在美国国家健康研究院的健康与公共服务部资助的SBIRGrant号EY016262之下借助政府支持完成本专利技术。政府可拥有本专利技术的某些权利。
技术介绍
RdCVF是由视网膜内的视杆感光细胞特异性表达的硫氧还蛋白样蛋白(Léveillard等(2004)NatureGenetics36：755-759和增补信息)。在人中发现两种不同的RdCVF基因，它们命名为RdCVF1和RdCVF2。两种RdCVF基因都通过选择性剪接编码两种产物：全长蛋白和C末端转录后截短蛋白，分别称为长RdCVF和短RdCVF。短RdCVF据描述为用于促进视锥细胞存活的分泌的营养因子，长RdCVF据描述为与胞内蛋白相互作用的具有氧化还原活性的酶(Léveil本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸，所述核酸包含编码RdCVF蛋白的编码序列的核苷酸序列，其中RdCVF编码序列包含重编码核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
20111027 US 61/552,1551.一种核酸，所述核酸包含编码RdCVF蛋白的编码序列的核苷酸序列，其中RdCVF编码序列包含重编码核苷酸序列。


2.如权利要求1所述的核酸，其中，所述RdCVF蛋白是RdCVF1蛋白。


3.如权利要求1所述的核酸，其中，所述RdCVF蛋白是RdCVF2蛋白。


4.如上述权利要求中任一项所述的核酸，其中，所述RdCVF蛋白是短版本的RdCVF蛋白。


5.如权利要求1～3中任一项所述的核酸，其中，所述RdCVF蛋白是长版本的RdCVF蛋白。


6.如上述权利要求中任一项所述的核酸，其中，所述RdCVF蛋白是人RdCVF蛋白。


7.如上述权利要求中任一项所述的核酸，其中，所述重编码核苷酸序列缺少起始甲硫氨酸密码子。


8.如权利要求1所述的核酸，其中，所述RdCVF蛋白的编码序列包含SEQIDNO:1的106～741位核苷酸、SEQIDNO:1的106～429位核苷酸、SEQIDNO:3的106～432位核苷酸或SEQIDNO:3的106～744位核苷酸。


9.如上述权利要求中任一项所述的核酸，其中，所述核酸还包含与所述RdCVF蛋白的编码序列可操作地连接的N末端信号序列的第二编码区。


10.如权利要求9所述的核酸，其中，所述信号序列选自由Igk信号序列、人生长激素(HGH)、脑源性神经营养因子(BDNF)、胰岛素生长因子1(IGF-1)和β-葡糖醛酸糖苷酶(GUSB)组成的组。


11.如权利要求9所述的核酸，其中，所述信号序列包含SEQIDNO:1的1～105位核苷酸。


12.如权利要求9所述的核酸，其中，所述信号序列编码包含SEQIDNO:15、SEQIDNO:2的2～34位氨基酸或SEQIDNO:2的7～21位氨基酸的氨基酸序列。


13.如权利要求1所述的核酸，其中，所述核苷酸序列包含SEQIDNO:1或3。


14.如权利要求1所述的核酸，其中，所述重编码核苷酸序列的至少40％的密码子经重编码。


15.如权利要求1所述的核酸，其中，所述重编码核苷酸序列与相应的天然核苷酸序列相比有至少15％的核苷酸不同。


16.如权利要求1所述的核酸，其中，所述重编码核苷酸序列与相应的天然核苷酸序列具有小于90％的同一性。


17.如权利要求1～7和9～16中任一项所述的核酸，其中，所述重编码核苷酸序列具有选自由以下特征组成的组中的一个或多个特征：无原核生物(procarya)抑制性基序、无共有剪接供体位点、无隐蔽剪接供体位点以及GC含量为60％～65％。


18.如上述权利要求中任一项所述的核酸，其中，启动子序列与所述RdCVF蛋白的编码序列可操作地连接。


19.如权利要求18所述的核酸，其中，所述启动子是巨细胞病毒(CMV)启动子。


20.如权利要求19所述的核酸，其中，所述CMV启动子包含SEQIDNO:11的150～812位。


21.如上述权利要求中任一项所述的核酸，其中，内含子序列与所述RdCVF蛋白的编码序列可操作地连接。


22.如权利要求21所述的核酸，其中，所述内含子序列是β-珠蛋白内含子序列。


23.如权利要求21所述的核酸，其中，所述内含子序列包含SEQIDNO:11的820～1312位核苷酸。


24.如权利要求1所述的核酸，其中，所述核酸包含SEQIDNO:11、SEQIDNO:11的150～2080位核苷酸序列或者SEQIDNO:11的150～812、820～1312和1340～2080位核苷酸序列。


25.一种病毒载体，所述病毒载体包含上述权利要求中任一项所述的核酸。


26.如权利要求25所述的病毒载体，其中，所述病毒载体是腺相关病毒(AAV)载体。


27.如权利要求26所述的病毒载体，其中，所述AAV载体基于AAV血清型2。


28.如权利要求26所述的病毒载体，其中，所述AAV载体基于AAV血清型8。


29.如权利要求25所述的病毒载体，其中，所述病毒载体不是牛免疫缺陷病毒载体。


30.如权利要求25所述的病毒载体，其中，所述病毒载体不是病毒载体。


31.如权利要求25所述的病毒载体，其中，所述病毒载体选自由DNA病毒载体、无包膜病毒载体和腺病毒载体组成的组。


32.一种分离的细胞，所述分离的细胞包含权利要求1～4中任一项所述的核酸，其中所述细胞分泌所述RdC...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗天赐，
申请(专利权)人：威尔斯达眼科制剂公司，
类型：发明
国别省市：美国;US