一种含三甲基哌啶基团和三苯基磷基团的功能化试剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种一端带有三甲基哌啶基团，另一端带有三苯基磷基团的化合物，其结构式如下述式I所示。该试剂应用于叠氮标记翻译后修饰肽段的一步法衍生化、富集和质谱鉴定。TFT试剂衍生化可有效增强翻译后修饰肽段的疏水性和碱性，从而提高了肽段在质谱中的离子化和碎裂效率，显著提高其质谱鉴定灵敏度和谱图解析。另外，TFT试剂的三甲基哌啶基团与anti‑TMT抗体适中的亲和性(k

A functional reagent containing trimethylpiperidine group and triphenylphosphorus group and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种含三甲基哌啶基团和三苯基磷基团的功能化试剂及其制备方法与应用
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种一端带有三甲基哌啶基团，另一端带有三苯基磷基团的化学衍生化-富集试剂(简称TFT试剂)及其制备方法与应用。该试剂通过三苯基磷与叠氮标记的蛋白质翻译后修饰的“施陶丁格连接”反应，以及三甲基哌啶基团与Anti-TMT抗体偶联树脂的特异性、可逆结合，实现翻译后修饰蛋白/肽段的一步衍生化、富集和质谱鉴定。
技术介绍
蛋白质翻译后修饰在很多细胞过程中具有十分重要的作用并且调节着蛋白的多种功能，例如：蛋白质的合成、生物活性、细胞定位、蛋白与蛋白的相互作用等。通过质谱法(MS)进行规模化的翻译后修饰分析为生理学和病理学研究提供了重要信息，但是对于低丰度翻译后修饰的鉴定，仍然存在重大技术挑战。由于低丰度翻译后修饰蛋白/肽段含量低，在质谱检测时易被中高丰度的非修饰肽段抑制，导致其鉴定灵敏度差，因此通常需要对其进行特异性富集后才能实现有效鉴定。针对这一技术瓶颈，目前利用各类翻译后修饰特有的物理、化学性质，已经发展了多种针对性的富集方法，例如：硼酸亲和反本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.式I所示化合物：/n

【技术特征摘要】
1.式I所示化合物：



式I中，Ph＝苯基。


2.制备权利要求1中式I所示化合物的方法，包括如下步骤：
由式8所示化合物与式9所示化合物发生酰胺化反应，得到式I所示化合物。



式9中，Ph＝苯基。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：式9所示化合物与式8所示化合物的投料摩尔比为：1：1-2；
所述酰胺化反应在EDCI/DMAP存在下进行；
所述酰胺化反应在有机溶剂中进行，所述有机溶剂为DMF。


4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述方法中，式8所示化合物通过包括如下步骤的方法制备得到：
以2,6-二甲基哌啶为起始原料与溴乙酸发生取代反应得到式2所示化合物；



式2所示化合物与β-丙氨酸苄酯对甲苯磺酸盐发生酰胺化反应得到式4所示化合物；



式4所示化合物发生酯还原反应得到含有羧基的式5所示化合物；



式5所示化合物与N-叔丁氧羰基乙二胺进一步发生酰胺化反应得到式7所示化合物；



式7所示化合物发生脱保护反应得到含有游离氨基的式8所示化合物。


5.固载权利要求1中式I所示化合物的Anti-T...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦伟捷，钱小红，霍变变，张万军，
申请(专利权)人：北京蛋白质组研究中心，
类型：发明
国别省市：北京;11