非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒制造技术

本实用新型专利技术涉及试剂盒技术领域，具体公开一种非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒。所示试剂盒包括盒体，固定于盒体内的隔板，隔板上开设有第一标准管孔、第二标准管孔、对照管孔，隔板将盒体分隔成并排的第一腔室和第二腔室，第一腔室盛装有第一固定块，第二腔室盛装有第二固定块，第一固定块上开设有用于插装第一PCR试剂管的若干第一试剂孔，第二固定块上开设有用于插装第二PCR试剂管的若干第二试剂孔；第一标准管孔插装第一标准品管，第二标准管孔插装有第二标准品管，对照管孔插装有阴性对照品管。本实用新型专利技术提供的试剂盒为直用型，对用户的操作要求低，可有效减少试剂反复冻融的风险，使得实验操作更为简单、更准确。

Non deletion alpha / beta thalassemia gene typing test kit

【技术实现步骤摘要】
非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒
本技术涉及试剂盒
，尤其涉及一种非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒。
技术介绍
地中海贫血是由于组成血红蛋白的珠蛋白基因缺陷，使珠蛋白肽链1种或几种合成减少或不能合成，而导致的一种溶血性贫血。根据缺陷的珠蛋白肽链种类一般将地中海贫血主要分为α-地中海贫血和β-地中海贫血。地中海贫血是全球发病率最高的常染色体单基因隐性遗传病，该病主要分布在地中海沿岸和东南亚各国，我国长江以南发病率较高，尤其是广东、广西、海南发病率最高，其中海南黎族人群地中海贫血基因携带率高达65％。轻型地中海贫血对健康无明显影响，而重型地中海贫血则是严重危害人类健康的疾病，重型α-地中海贫血多在胎儿期或出生后数小时死亡，重型β-地中海贫血需终身输血治疗，这会给家庭和社会带来严重的经济负担。目前地中海贫血防治中最行之有效的方法是加强高危人群的筛查，避免重型地中海贫血新生儿的出生。地中海贫血基因检测能明确诊断被检测者是否携带地中海贫血基因，是地中海贫血筛查中最准确、最有效的手段。因此，建立一种快速、准确率高而且操作简便的地中海贫血基因检测方法，是地中海贫血防治的重点。目前临床医学检验上用于快速检测非缺失型α/β地中海贫血基因分型的试剂盒，按照检测方法可分为固相检测的试剂盒和均相检测的试剂盒。其中，固相检测的试剂盒具有固相检测的检测通量大的优点，但是成分复杂，除了提取试剂，扩增试剂，还要提供反向斑点杂交的试剂及设备，代表的厂家有深圳益生堂生物企业，亚能生物技术等，市场占有额最大。均相检测的试剂盒具有均相检测的操作较固相检测简单，无需开盖处理避免PCR产物气溶胶污染等优点，代表的厂家有厦门致善科技的β-地中海贫血基因检测试剂盒，其市场占有额不如固相检测的试剂盒。现有的一种β-地中海贫血快速检测测序试剂盒通过在试管固定槽中设有稳定夹持片，防止试剂盒在操作过程中试管脱离试管固定槽导致试剂混合或者洒出；并且采用配制精确的试剂进行测序，简化了测序流程、降低测序的成本、提高测序的效率，并由此缩短β-地中海贫血基因测序的周期。目前市场上已报道的均相检测的非缺失型α/β地中海贫血基因分型试剂盒比较少。无论是固相还是均相检测的非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒，其扩增试剂都不是严格意义上的直用型试剂，大部分都需要用户将各PCR试剂组分和酶，引物等成分按体积要求精密加样混合后才可以与样本DNA混合，对用户的操作要求较高，且操作较为繁琐，且容易出错。每次混合试剂都是一次试剂的冻融，会降低试剂尤其是酶的活性，且会增加试剂的损耗和实验操作时长。分装好的直用型试剂则可以避免上述这些缺点。
技术实现思路
针对现有非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒检测时操作繁琐、精密度要求高而导致容易出现差错等问题，本技术提供一种非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒。为达到上述技术目的，本技术采用了如下的技术方案：一种非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒，包括盒体，固定于所述盒体内的隔板，所述隔板上开设有第一标准管孔、第二标准管孔、对照管孔，所述隔板将所述盒体分隔成并排的第一腔室和第二腔室，所述第一腔室盛装有第一固定块，所述第二腔室盛装有第二固定块，所述第一固定块上开设有用于插装第一PCR试剂管的若干第一试剂孔，所述第二固定块上开设有用于插装第二PCR试剂管的若干第二试剂孔；所述第一标准管孔插装第一标准品管，所述第二标准管孔插装有第二标准品管，所述对照管孔插装有阴性对照品管；所述第一标准品管内盛装有第一标准溶液，所述第一标准溶液含有等浓度混合的αQSα杂合子质粒、αWSα杂合子质粒、βIVSⅡ654杂合子质粒、βCD-17杂合子质粒和β-28杂合子质粒；所述第二标准品管内盛装有第二标准溶液，所述第二标准溶液含有等浓度混合的βCD41-42杂合子质粒、αCSα杂合子质粒、βCD-71-72杂合子质粒和βCD-26杂合子质粒；每个所述第一PCR试剂管里均盛装有HSTaq聚合酶，UNG酶，MgCl2，1×PCRBuffer，dUplusdNTPMIX，αQSα、αWSα、βIVSⅡ654、βCD-17和β-28四个待检基因的基因位点的上下游引物及对应的探针；每个所述第二PCR试剂管里均盛装有HSTaq聚合酶，UNG酶，MgCl2，1×PCRBuffer，dUplusdNTPMIX，βCD41-42、αCSα、βCD-71-72和βCD-26四个待检基因的基因位点的上下游引物及对应的探针。优选地，所述阴性对照品管里盛装有阴性对照品，所述阴性对照品为灭菌水。优选地，所述第一固定块、第二固定块均为弹性体。优选地，所述弹性体为海绵或橡胶。优选地，所述第一固定块上开设有2～6组所述第一试剂孔，每组有8个所述第一试剂孔；所述第二固定块上开设有2～6组所述第二试剂孔，每组有8个所述第二试剂孔。优选地，所述第一固定块上插装有2～6组所述第一PCR试剂管，每组有8个所述第一PCR试剂管；所述第二固定块上插装有2～6组所述第二PCR试剂管，每组有8个所述第二PCR试剂管。优选地，还包括用于对所述盒体进行盖合的盖体。本技术的有益效果为：本技术提供的非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒，属于直用型试剂盒，结构简单，方便携带，易于保存，不易受污染，在用于检测人非缺失型α/β地中海贫血基因分型时，具有检测速度快、准确、灵敏度高等特点。此外，本技术采用直用型试剂的思路，将试剂配制好后分装到PCR管中，用户可以直接使用，而无需用户配制PCRMIX的步骤，对用户的操作要求低，且可以有效减少试剂反复冻融的风险，使得实验操作更为简单、更准确。附图说明为了更清楚地说明本技术实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本技术非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒盒体示意图；图2是本技术非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒第一固定块示意图；图3是本技术非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒第二固定块示意图；图4为本技术非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒(未插装相应的试剂管)示意图；图5为本技术非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒示意图；图6为本技术实施例1提供的非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒中样本的FAM检测通道结果示意图；图7为本技术实施例1提供的非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒中样本的HEX检测通道结果示意图；图8为本技术实施例1提供的非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒中样本的TexasRed检测通道结果示意图；图9为本技术实施例1提供的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒，其特征在于，包括盒体，固定于所述盒体内的隔板，所述隔板上开设有第一标准管孔、第二标准管孔、对照管孔，所述隔板将所述盒体分隔成并排的第一腔室和第二腔室，所述第一腔室盛装有第一固定块，所述第二腔室盛装有第二固定块，所述第一固定块上开设有用于插装第一PCR试剂管的若干第一试剂孔，所述第二固定块上开设有用于插装第二PCR试剂管的若干第二试剂孔；/n所述第一标准管孔插装第一标准品管，所述第二标准管孔插装有第二标准品管，所述对照管孔插装有阴性对照品管；/n所述第一标准品管内盛装有第一标准溶液，所述第一标准溶液含有等浓度混合的α

【技术特征摘要】
1.一种非缺失型α/β地中海贫血基因分型检测试剂盒，其特征在于，包括盒体，固定于所述盒体内的隔板，所述隔板上开设有第一标准管孔、第二标准管孔、对照管孔，所述隔板将所述盒体分隔成并排的第一腔室和第二腔室，所述第一腔室盛装有第一固定块，所述第二腔室盛装有第二固定块，所述第一固定块上开设有用于插装第一PCR试剂管的若干第一试剂孔，所述第二固定块上开设有用于插装第二PCR试剂管的若干第二试剂孔；
所述第一标准管孔插装第一标准品管，所述第二标准管孔插装有第二标准品管，所述对照管孔插装有阴性对照品管；
所述第一标准品管内盛装有第一标准溶液，所述第一标准溶液含有等浓度混合的αQSα杂合子质粒、αWSα杂合子质粒、βIVSⅡ654杂合子质粒、βCD-17杂合子质粒和β-28杂合子质粒；
所述第二标准品管内盛装有第二标准溶液，所述第二标准溶液含有等浓度混合的βCD41-42杂合子质粒、αCSα杂合子质粒、βCD-71-72杂合子质粒和βCD-26杂合子质粒；
每个所述第一PCR试剂管里均盛装有HSTaq聚合酶，UNG酶，MgCl2，1×PCRBuffer，dUplusdNTPMIX，αQSα、αWSα、βIVSⅡ654、βCD-17和β-28四个待检基因的基因位点的上下游引物及对应的探针；
每个所述第二PCR试剂管里均盛装有HSTaq聚合酶，UNG酶，MgCl2，1×PCRBuffer，dUplu...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟宇萍，吴宇亮，李科铮，胡晓艳，
申请(专利权)人：深圳鼎新融合科技有限公司，北京大学深圳医院，
类型：新型
国别省市：广东;44