水稻反转座子基因LOC_Os11g45295及其编码蛋白与应用制造技术

本发明专利技术公开了水稻反转座子基因LOC_Os11g45295及其编码蛋白与应用。本发明专利技术发现水稻反转座子基因LOC_Os11g45295及其编码蛋白在调控植物抗病性中的应用，通过破坏LOC_Os11g45295基因的编码蛋白的生物学功能能够显著提高水稻对白叶枯病的抗性。本发明专利技术利用CRISPR/Cas9技术实现了高效的LOC_Os11g45295基因定点敲除，定点敲除水稻接种白叶枯病菌IV、KS‑6‑6和PXO61后，病斑长度显著缩短。本发明专利技术提供的LOC_Os11g45295基因的新功能为植物抗病育种提供了新方法，在农业生产上具有十分重要的应用价值。

Rice retrotransposon gene LOC Gu os11g45295 and its coding protein and Application

【技术实现步骤摘要】
水稻反转座子基因LOC_Os11g45295及其编码蛋白与应用
本专利技术涉及植物基因工程
，具体涉及水稻反转座子基因LOC_Os11g45295及其编码蛋白与应用。
技术介绍
由黄单胞杆菌水稻致病变种(XanthomonasoryzaepIV.oryzae)引起的白叶枯病是制约水稻生产的一种重要细菌性病害，对于水稻种植产业危害严重，一般可致水稻减产20％-30％左右，严重可达50％。利用抗性基因培育和种植抗病品种是防治水稻白叶枯病最经济有效的措施。然而，目前已报道的44个水稻白叶枯病抗性基因/位点(http://www.shigen.nig.ac.jp/rice/oryzabase/gene/list)大部分表现出抗谱较窄或者难以利用的问题，仅Xa3、Xa4、Xa21和Xa23等基因在生产中得以广泛应用。由于黄单胞杆菌水稻致病变种易于变异，水稻与白叶枯病菌(黄单胞杆菌水稻致病变种)的协同进化导致品种抗性极易丧失。因此，通过鉴定并敲除白叶枯病易感性基因提高水稻品种的抗病性，对培育抗病水稻具有重要的应用价值。r>专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.如下A-C中任一种物质在调控植物抗病性中的应用；/nA、LOC_Os11g45295蛋白；/nB、所述LOC_Os11g45295蛋白的编码核酸；/nC、含有所述核酸的表达盒、重组载体或重组微生物；/n所述LOC_Os11g45295蛋白为如下(a1)-(a4)中任一种：/n(a1)序列表中序列1所示的蛋白质；/n(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；/n(a3)将(a1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与植物抗病相关的蛋白质；/n(a4)与(a1)具有98％以上同一性且与植物抗病性相关的蛋白质。/n

【技术特征摘要】
1.如下A-C中任一种物质在调控植物抗病性中的应用；
A、LOC_Os11g45295蛋白；
B、所述LOC_Os11g45295蛋白的编码核酸；
C、含有所述核酸的表达盒、重组载体或重组微生物；
所述LOC_Os11g45295蛋白为如下(a1)-(a4)中任一种：
(a1)序列表中序列1所示的蛋白质；
(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
(a3)将(a1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与植物抗病相关的蛋白质；
(a4)与(a1)具有98％以上同一性且与植物抗病性相关的蛋白质。


2.b1或b2所示的物质在提高植物抗病性或改良植物抗病性中的应用：
b1、抑制或降低植物中LOC_Os11g45295蛋白活性或者含量的物质；
b2、抑制或降低植物中LOC_Os11g45295蛋白编码核酸表达的物质；
所述LOC_Os11g45295蛋白为如下(a1)-(a4)中任一种：
(a1)序列表中序列1所示的蛋白质；
(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
(a3)将(a1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与植物抗病相关的蛋白质；
(a4)与(a1)具有98％以上同一性且与植物抗病性相关的蛋白质。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：
所述LOC_Os11g45295蛋白编码核酸为如下(b1)-(b3)中任一种：
(b1)编码区为序列表中序列2所示的DNA分子；
(b2)与(b1)具有95％以上同一性且编码所述蛋白质的DNA分子；
(b3)在严格条件下与(b1)或(b2)任一种限定的核苷酸序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子。


4.根据权利要求1-3中任一所述的应用，其特征在于：所述抗病性为抗白叶枯病。


5.根据权利要求2-4中任一所述的应用，其特征在于：
所述b1或b2所示的物质为如下：
1)干扰RNA；
2)CRISPR/Cas9系统；
所述CRISPR/Cas9系统中，所述sgRNA的靶序列为所述LOC_Os11g45295蛋白的编码核酸中的XXXNGG形式的核苷酸序列，其中，XXX为所述LOC_Os11g45295蛋白的编码核酸中任意19-20bp的核酸序列，N为A、T、G、C中的任意一个碱基。


6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：
所述sgRNA为sgRNA1和/或sgRNA2；
所述sgRNA1的靶序列为序列3；所...

【专利技术属性】
技术研发人员：周永力，李全林，史晓荣，卢家玲，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11