AFP5基因及其应用制造技术

技术编号:23144004 阅读:31 留言:0更新日期:2020-01-18 11:34
本发明专利技术提供一个新基因AFP5的序列及其应用,通过ABI5蛋白为诱饵筛选拟南芥cDNA文库,克隆到一个新的基因,根据其与ABI5相互作用的特点而命名为:AFP5。进一步通过AFP5基因的亚克隆并转化拟南芥,最终实现了过表达转基因拟南芥植株的种子萌发率提高、莲座叶叶片数目增多、莲座叶叶片变宽、植株高度增高、植株提前开花等应用。

Afp5 gene and its application

【技术实现步骤摘要】
AFP5基因及其应用
本专利技术涉及植物基因工程领域,具体涉及拟南芥的一个新基因(申请人将其命名为AFP5)及其应用。
技术介绍
植物激素脱落酸(ABA)在植物种子和芽休眠的起始和维持、植物对逆境尤其是水分逆境的响应中起主要作用。此外,ABA通过与其它植物激素相互作用影响着植物生长发育的诸多方面。ABI5是植物ABA信号通路中发现并明确的第5个突变体,它是一个碱性亮氨酸拉链型(bZIP)转录因子。ABI5相互作用蛋白AFPs(ABIFiveBindingProteins)是一类植物特异性的、可能参与了ABA信号转导及其它植物生长发育过程调控的蛋白质亚家族。以ABI5为诱饵蛋白,利用酵母双杂交系统筛选拟南芥cDNA文库,我们克隆了一个与ABI5可相互作用的新基因AFP5。经氨基酸残基序列比对分析,发现AFP5与先前发现的4个拟南芥AFPs的氨基酸残基序列的一致性分别为:与AFP1具有23.19%的一致性,与AFP2具有24.07%的一致性,与AFP3具有25.00%的一致性,与AFP4具有21.25%的一致性。尽管AFPs亚家族氨基酸残基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种拟南芥新基因AFP5,其特征在于,所述AFP5的CDS序列如SEQ ID NO:1所示;其全长cDNA序列如SEQ ID NO:2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种拟南芥新基因AFP5,其特征在于,所述AFP5的CDS序列如SEQIDNO:1所示;其全长cDNA序列如SEQIDNO:2所示。


2.一种拟南芥新基因AFP5克隆方法,包括:(1)总RNA提取反转录;(2)AFP5全长扩增;(3)AFP5酵母双杂交载体构建及序列测定。


3.AFP5互作蛋白筛选及基因名称确定方法,包括:(1)酵母感受态细胞的制备;(2)重组质粒转化酵母感受态细胞;(3)AFP5与ABI5相互作用验证。


4.AFP5超表达转基因拟南芥植物遗传转化方法,包括:(1)AFP5超表达载体构建;(2)AFP5超表达载体转化农杆菌GV3101;(3)农杆菌浸花法转化拟南芥;(4)AFP5超表达转基因系拟南芥植株的筛选及鉴定。


5.AFP5在提高拟南芥种子萌发率中的应用,其...

【专利技术属性】
技术研发人员:马建忠邓子兵王永刚张伟杰蒲秀瑛
申请(专利权)人:兰州理工大学
类型:发明
国别省市:甘肃;62

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