一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法及透明质酸钠凝胶技术

本发明专利技术属于药物及化妆品制备技术领域，涉及一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法及透明质酸钠凝胶。包括以下步骤：(1)将透明质酸钠与氢氧化钠溶液混合，至透明质酸钠完全溶解；(2)将葛根素加入步骤(1)所得的透明质酸钠溶液中进行交联反应；调节交联反应溶液的pH值至中性，终止交联反应；(3)将磷酸盐缓冲溶液加入步骤(2)已终止交联反应的溶液中，自然溶胀，制得交联透明质酸钠凝胶；(4)将交联透明质酸钠凝胶与沉淀剂混合，进行沉淀；(5)将步骤(4)所得沉淀进行真空干燥，得到透明质酸钠凝胶粉末。本发明专利技术采用葛根素做交联剂，可制得具有吸水溶胀性质的凝胶，更好的满足医药、美容、化妆品等领域的不同需求。

Method for preparing sodium hyaluronate gel crosslinked by puerarin and sodium hyaluronate gel

【技术实现步骤摘要】
一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法及透明质酸钠凝胶
本专利技术属于药物及化妆品制备
，更具体地，涉及一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，以及由该方法制得的透明质酸钠凝胶。
技术介绍
透明质酸(hyalouronicacid，HA)是一类由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰基-D-氨基葡萄糖双糖单位重复连接组成的一种线状聚阴离子粘多糖(式I)，广泛存在于动物和人的关节滑液、眼球玻璃体、皮肤、细胞间隙及鸡冠等结缔组织中，是构成关节滑液、玻璃体、皮肤和软骨组织的重要成分，具有独特的理化性质和广泛的生物学功能。透明质酸通常以透明质酸盐的形式存在，即透明质酸钠(sodiumhyaluronate，SH)。SH既可采用动物组织提取也可利用微生物发酵法生产，广泛应用于食品、日化和医药领域，依据分子量不同，可划分为食品级、医用级和化妆品级等多种级别。经过长期的研究开发，高纯度的医用级SH已被制成注射剂，应用于眼科手术、骨科手术、治疗骨性关节炎及类风湿性关节炎和预防术后粘连等。此外，由于透明质酸具有良好的生物相容性、独特的粘弹性和优良的保水性，HA也被用于注入面部皮肤，减轻皱纹，改进皮肤外观和阻止皮肤衰老。天然透明质酸钠易被生物降解，在生物体内存留时间短，硬度和力学强度都不够大，限制了其应用。针对其以上缺陷，通常利用适当的交联剂将透明质酸钠制备成不同分子量的凝胶，经交联修饰的透明质酸钠凝胶分子量增大，可以在保留原有生物相容性的基础上，开发出分子结构更加复杂、粘弹性更强、抗酶解性和机械特性显著提高的透明质酸钠交联改性凝胶，从而使其应用更加广泛。目前所用的交联剂多为化学试剂，对皮肤存在刺激性甚至细胞毒性，其残留对使用者具有较大的潜在危害，限制了其应用，因此利用安全无毒的天然生物交联剂制备透明质酸钠凝胶是解决该问题的有效方法。葛根素亦被称为葛根黄酮，是从干燥的葛根中分离出来的异黄酮类化合物(见式II)，存在于多年生豆科植物葛和野葛的根部，具有退热、镇静、增加脑血流、提高免疫、抗肿瘤、降血糖、解酒等多种作用，临床应用除用于治疗冠心病、高血压外，因其具有β受体阻断作用，还被应用于青光眼及高眼压症的治疗，应用范围日益广泛。目前市场上已有试剂级高纯度的葛根素商品供应，相关产业快速发展，易于获取。作为一种异黄酮类化合物，葛根素结构中含羟基、醚键和不饱和吡喃酮等多个活性官能团，由于其天然无毒、抗氧化、抑菌、产品易得等特点，专利技术人认为其适合作为一种新型生物交联剂用于食品、日化和医药等领域。此外，由于高纯葛根素颜色极浅，利用其制备的凝胶避免了已开发的生物交联剂(如京尼平)所制备凝胶呈现深蓝紫色的缺陷，在应用中具有更好的前景和市场。然而，目前尚未有葛根素用于交联制备透明质酸钠凝胶的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法及透明质酸钠凝胶。本专利技术的第一方面提供一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，该方法包括以下步骤：(1)溶解将透明质酸钠与氢氧化钠溶液混合，至透明质酸钠完全溶解；(2)交联反应将葛根素加入步骤(1)所得的透明质酸钠溶液中，在30℃～70℃下进行交联反应1h～20h；调节交联反应溶液的pH值至中性，终止交联反应；(3)溶胀将磷酸盐缓冲溶液加入步骤(2)已终止交联反应的溶液中，自然溶胀，制得交联透明质酸钠凝胶；(4)沉淀将步骤(3)所得的交联透明质酸钠凝胶与沉淀剂混合，进行沉淀；(5)干燥将步骤(4)所得沉淀进行真空干燥，得到交联度为1％～5％的透明质酸钠凝胶粉末。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(1)中，所述氢氧化钠溶液的质量浓度为0.5％～5％。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(1)中，所述透明质酸钠与氢氧化钠的质量比为1～10:1～10；根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(1)中，所述混合的条件包括：在25℃～65℃下搅拌0.5h～2.5h。本专利技术中，所述葛根素作为交联剂，根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(2)中，所述葛根素与透明质酸钠溶液中的透明质酸钠的质量比为1～10:10～100。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(2)中，调节交联反应溶液的pH值的方式为向交联反应溶液中加入酸性溶液；所述酸性溶液优选为0.008～0.012mol/L盐酸溶液。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(3)中，所述磷酸盐缓冲溶液为浓度0.05mol/L～0.5mol/L，pH6.0～8.0的磷酸盐缓冲溶液；所述磷酸盐缓冲溶液与步骤(2)已终止交联反应的溶液的体积比为1:1～5:1。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(3)中，所述自然溶胀的时间为2h～5h。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(4)中，所述交联透明质酸钠凝胶与沉淀剂的体积比为1:2～1:6。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(4)中，所述沉淀剂为92-97％乙醇。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(4)中，所述沉淀方式为将凝胶加入沉淀剂中，搅拌产生沉淀后放置1h～12h。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(5)中，所述真空干燥的温度为30℃～50℃。根据本专利技术的一种优选实施方式，该方法还包括：(6)灭菌将步骤(5)所得粉末与磷酸盐缓冲液混合，制备成质量分数为1％～5％的凝胶，通过高温短时灭菌，得到颗粒化交联透明质酸钠凝胶。根据本专利技术的一种优选实施方式，步骤(6)中，所述磷酸盐缓冲液为浓度0.05mol/L～0.5mol/L，pH6.0～8.0的磷酸盐缓冲溶液；所述粉末与磷酸盐缓冲液的质量比为1:20～1:100。根据本专利技术的方法，所述透明质酸钠可以通过常规的发酵法或提取法制备得到。本专利技术的第二方面提供由上述方法制得的透明质酸钠凝胶。本专利技术具有以下技术效果：(1)采用葛根素做交联剂，可制得具有吸水溶胀性质的凝胶，实施例中最后一步向干燥后的凝胶粉末中加入磷酸盐缓冲液，粉末吸水溶胀为凝胶颗粒，若未形成凝胶则会发生溶解、形成溶液。(2)由于葛根素天然无毒，可以极大的简化凝胶后期洗脱交联剂的过程，提高制备效率，降低洗脱成本。(3)在采用葛根素做交联剂的基础上，通过进一步优化透明质酸钠原料的分子量、调节交联反应中交联剂与透明质酸钠原料的比例以及交联反应条件，在一定范围内可根据需求定制特定交联度的透明质酸钠凝胶，可以更好的满足医药、美容、化妆品等领域的不同需求。本专利技术的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式下面将更详细地描述本专利技术的优选实施方式。虽然以下描述了本专利技术的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施方式所限制。以下实施例所选透明质酸钠原料为发酵法生产，分子量80万～200万道尔顿。磷酸盐缓冲液的组成为含不同比例的磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的去离子水溶液。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：/n(1)溶解/n将透明质酸钠与氢氧化钠溶液混合，至透明质酸钠完全溶解；/n(2)交联反应/n将葛根素加入步骤(1)所得的透明质酸钠溶液中，在30℃～70℃下进行交联反应1h～20h；调节交联反应溶液的pH值至中性，终止交联反应；/n(3)溶胀/n将磷酸盐缓冲溶液加入步骤(2)已终止交联反应的溶液中，自然溶胀，制得交联透明质酸钠凝胶；/n(4)沉淀/n将步骤(3)所得的交联透明质酸钠凝胶与沉淀剂混合，进行沉淀；/n(5)干燥/n将步骤(4)所得沉淀进行真空干燥，得到交联度为1％～5％的透明质酸钠凝胶粉末。/n

【技术特征摘要】
1.一种葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)溶解
将透明质酸钠与氢氧化钠溶液混合，至透明质酸钠完全溶解；
(2)交联反应
将葛根素加入步骤(1)所得的透明质酸钠溶液中，在30℃～70℃下进行交联反应1h～20h；调节交联反应溶液的pH值至中性，终止交联反应；
(3)溶胀
将磷酸盐缓冲溶液加入步骤(2)已终止交联反应的溶液中，自然溶胀，制得交联透明质酸钠凝胶；
(4)沉淀
将步骤(3)所得的交联透明质酸钠凝胶与沉淀剂混合，进行沉淀；
(5)干燥
将步骤(4)所得沉淀进行真空干燥，得到交联度为1％～5％的透明质酸钠凝胶粉末。


2.根据权利要求1所述的葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，其中，步骤(1)中，所述氢氧化钠溶液的质量浓度为0.5％～5％；
所述透明质酸钠与氢氧化钠的质量比为1～10:1～10；
所述混合的条件包括：在25℃～65℃下搅拌0.5h～2.5h。


3.根据权利要求1所述的葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，其中，步骤(2)中，所述葛根素与透明质酸钠溶液中的透明质酸钠的质量比为1～10:10～100；
调节交联反应溶液的pH值的方式为向交联反应溶液中加入酸性溶液；所述酸性溶液优选为0.008～0.012mol/L盐酸溶液。


4.根据权利要求1所述的葛根素交联制备透明质酸钠凝胶的方法，其中，步骤(3)中，所述磷酸盐缓冲...

【专利技术属性】
技术研发人员：范龙兴，苑帅，朱昱霖，
申请(专利权)人：天津一安生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12