一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖测序方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖测序方法及其应用。本发明专利技术首次建立了一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖的测序方法，尤其是利用外切型褐藻胶裂解酶AlyPB2在降解多糖及寡糖底物时，是从非还原端逐个切割糖醛酸的特点，利用外切型褐藻胶裂解酶AlyPB2对褐藻胶寡糖进行部分酶切，通过凝胶过滤色谱分离制备不同聚合度的部分酶切寡糖，再利用

A sequencing method of alginate oligosaccharides based on alginate lyase and its application

【技术实现步骤摘要】
一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖测序方法及其应用
本专利技术涉及一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖测序方法及其应用，属于分析化学

技术介绍
褐藻胶(alginate)是海带、马尾藻、巨藻等褐藻类植物细胞壁和胞间质中最丰富的碳水化合物，约占褐藻干重的40％。褐藻胶是由β-D-甘露糖醛酸(β-D-Mannuronate,M)及其C5差向异构体α-L-古罗糖醛酸(α-L-Guluronate,G)通过β-1，4糖苷键连接形成的线性阴离子酸性多糖，根据两种糖醛酸排列顺序的不同，分为聚甘露糖醛酸区段(PolyM)、聚古罗糖醛酸区段(PolyG)以及甘露糖醛酸和古罗糖醛酸交替嵌段(PolyMG/GM)。近年来，褐藻胶因高黏性，凝胶性等特点广泛应用于食品，化工，医药、纺织等行业。但褐藻胶存在分子量较大、水溶性差、难以吸收利用等缺陷导致其应用受到了很大的限制。褐藻胶寡糖是褐藻胶经降解得到的功能性寡聚物，因其稳定性强、易于吸收利用、无毒无害等优点受到了极大的关注。越来越多的报道表明褐藻胶寡糖具有多种重要的生物活性，如促进植物生长、抗肿瘤、抗凝血、抗细菌、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖测序方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将褐藻胶寡糖用重水(D

【技术特征摘要】
1.一种基于褐藻胶裂解酶的褐藻胶寡糖测序方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将褐藻胶寡糖用重水(D2O)溶解，反复冷冻干燥，以完成氢氘置换，然后进行1H-NMR分析，以确定褐藻胶寡糖还原端及非还原端的糖基结构；
(2)另取与步骤(1)同批的褐藻胶寡糖用外切型褐藻胶裂解酶部分降解，将降解产物经多次收集、分别集中后，得到不同聚合度的中间产物寡糖；所述外切型褐藻胶裂解酶为褐藻胶裂解酶AlyPB2；
(3)步骤(2)得到的中间产物寡糖反复冷冻干燥脱盐后，用重水(D2O)溶解，反复冷冻干燥，以完成氢氘置换，并进行1H-NMR分析，以确定各中间产物寡糖的还原端及非还原端的糖基结构，结合步骤(1)中褐藻胶寡糖的1H-NMR结果，完成褐藻胶寡糖的糖链结构测定。


2.如权利要求1所述的褐藻胶寡糖测序方法，其特征在于，所述褐藻胶寡糖是由β-D-1,4-甘...

【专利技术属性】
技术研发人员：李福川，路丹荣，张庆冬，关靖雯，王淑敏，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37