间充质干细胞分化制造技术

本发明专利技术提供用于治疗或防止关节炎和关节损伤的方法和组合物。

Mesenchymal stem cell differentiation

【技术实现步骤摘要】
间充质干细胞分化本申请是申请人于2010年7月13日提交的题为“间充质干细胞分化”的中国专利申请201080031985.4的分案申请。对相关申请的交叉参考引用本申请根据美国法典35第1.119(e)款，要求美国临时申请号61/225,293(2009年7月14日递交)的权利，该临时申请的全部内容通过参考引用并入本文。专利技术背景骨关节炎(OA)是最常见的肌骨疾病。目前，大约有4千万美国人患有该病，由于人口老龄化和平均寿命的增加，该数字在接下来的20年内预计将增加到6千万，使得该疾病成为导致残疾的第四位主要原因。OA的特征在于关节的缓慢退行性降解，包括关节软骨(含有为关节提供润滑和缓冲的细胞和基质)和位于关节软骨下的软骨下骨。目前，对OA的疗法包括以口服NSAIDs或选择性环加氧酶2(COX-2)抑制剂来减轻痛苦、以例如皮质类固醇和透明质素等药剂进行关节内(IA)注射、以及外科手术的方法。间充质干细胞(MSCs)存在于成人的关节软骨中，其分离后能够在体外被程序化以经历分化而成软骨细胞和其它间充质细胞谱系。这部分地受生长因子(TGFβs、BMPs)、血清条件和细胞-细胞接触的调节。专利技术概要本专利技术提供了改善或防止哺乳动物关节炎或关节损伤的方法。在一些实施方案中，本专利技术方法包括对哺乳动物的关节施用组合物，所述组合物包含有效量的多肽，所述多肽包含与SEQIDNO:1或25具有至少95％同一性的氨基酸序列，从而改善或防止哺乳动物关节炎或关节损伤。在一些实施方案中，个体具有关节炎或关节损伤。在一些实施方案中，个体没有关节炎或关节损伤，但具有关节炎或关节损伤的风险。在一些实施方案中，多肽包含SEQIDNO:1或25。在一些实施方案中，氨基酸序列与SEQIDNOs:2、3、4、26、27或28具有至少95％同一性。在一些实施方案中，氨基酸序列包含SEQIDNOs:2、3、4、26、27或28。在一些实施方案中，氨基酸序列与SEQIDNOs:5-24之任一至少80％相同。在一些实施方案中，氨基酸序列包含SEQIDNOs:5-24之任一。在一些实施方案中，关节炎选自骨关节炎、创伤性关节炎和自身免疫性关节炎。在一些实施方案中，哺乳动物为人。在一些实施方案中，组合物还包括透明质酸。本专利技术也提供了诱导间充质干细胞分化形成软骨细胞的方法，所述软骨细胞形成软骨基质。在一些实施方案中，本专利技术方法包括使间充质干细胞与足够量的多肽接触以诱导干细胞分化形成软骨细胞，所述多肽包含与SEQIDNO:1或25具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本专利技术方法在体外进行。在一些实施方案中，本专利技术方法在体内进行，干细胞存在于哺乳动物体内。在一些实施方案中，哺乳动物为人。在一些实施方案中，多肽包含SEQIDNO:1或25。在一些实施方案中，氨基酸序列与SEQIDNOs:2、3、4、26、27或28具有至少95％同一性。在一些实施方案中，氨基酸序列包含SEQIDNOs:2、3、4、26、27或28。在一些实施方案中，氨基酸序列与SEQIDNOs:5-24之任一至少80％相同。在一些实施方案中，氨基酸序列包含SEQIDNOs:5-24之任一。本专利技术也提供了用于关节内递送和全身递送的药物组合物。在一些实施方案中，组合物包含药学有效量的多肽，所述多肽包含与SEQIDNO:1或25具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，组合物还包括透明质酸。在一些实施方案中，多肽包含SEQIDNO:1或25。在一些实施方案中，氨基酸序列与SEQIDNOs:2、3、4、26、27或28具有至少95％同一性。在一些实施方案中，氨基酸序列包含SEQIDNOs:2、3、4、26、27或28。在一些实施方案中，氨基酸序列与SEQIDNOs:5-24之任一至少80％相同。在一些实施方案中，氨基酸序列包含SEQIDNOs:5-24之任一。本专利技术的其它特征、优点和实施方案可以从以下详细描述和权利要求中得到阐明或显而易见。此外，应理解的是，上述专利技术概述和以下的详细描述均是举例说明性的，旨在提供进一步的解释而不是限制本专利技术的保护范围。定义术语“肽模拟物”(peptidomimetic)和“模拟物”(mimetic)指合成的化学化合物，所述化合物与天然或非天然产生的多肽(例如，ANGPTL3)具有基本上相同的结构和功能特征。肽类似物普遍用在制药业中，作为与模板肽具有类似特性的非肽药物。这些类型的非肽化合物被称为“肽模拟物”(peptidemimetics或peptidomimetics)(Fauchere,J.Adv.DrugRes.15:29(1986)；Veber和FreidingerTINSp.392(1985)；和Evans等，J.Med.Chem.30:1229(1987)，通过参考引用将它们整合到本文中)。可以使用在结构上与治疗有用的肽相似的肽模拟物来产生等效的或增强的治疗或预防效果。通常，肽模拟物在结构上与范例多肽(paradigmpolypeptide)(即，具有生物学或药理学活性的多肽)相似，例如在目的多肽中所发现的，但是其一个或多个肽键任选地被选自如下的键替代：例如-CH2NH-、-CH2S-、-CH2-CH2-、-CH＝CH-(顺式和反式)、-COCH2-、-CH(OH)CH2-、和-CH2SO-。模拟物可以完全由合成的、非天然的氨基酸类似物组成，或者是由部分天然肽氨基酸和部分非天然氨基酸类似物组成的嵌合分子。模拟物也可以并入任何数量的天然氨基酸保守性替换，只要该替换不实质性地改变模拟物的结构和/或活性。例如，如果模拟组合物能够执行目的多肽的至少一种活性，它就属于本专利技术的范围内。术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可替换使用，是指氨基酸残基的聚合物。这些术语适用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物，以及适用于其中一个或多个氨基酸残基为对应的天然氨基酸的人工化学模拟物的氨基酸聚合物。术语“氨基酸”是指天然存在的和合成的氨基酸、以及以和天然存在的氨基酸类似的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是那些由遗传密码编码的氨基酸、以及随后被修饰的氨基酸(例如，羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和O-磷酸丝氨酸)。氨基酸类似物是指具有和天然存在的氨基酸相同的基本化学结构(即，与氢、羧基、氨基和R基团结合的α碳)的化合物，例如，高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。这样的类似物具有修饰的R基团(例如，正亮氨酸)或修饰的肽骨架，但是保留了和天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。天然编码的氨基酸为20种常见氨基酸(丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸)以及吡咯赖氨酸和硒代半胱氨酸。“保守修饰的变体”适用于氨基酸和核酸序列。就具体的核酸序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.多肽，其由选自如下的氨基酸序列组成：/n氨基酸序列SEQ ID NO:5、6、7、9、10、11、13、14、15、17、18、19、21、22或23，/n且其中所述多肽具有软骨发生活性。/n

【技术特征摘要】
20090714 US 61/225,2931.多肽，其由选自如下的氨基酸序列组成：
氨基酸序列SEQIDNO:5、6、7、9、10、11、13、14、15、17、18、19、21、22或23，
且其中所述多肽具有软骨发生活性。


2.融合蛋白，其包含权利要求1中的一条多肽，
所述多肽与选自人血清白蛋白(HAS)、免疫球蛋白Fc、多聚组氨酸、谷胱甘肽S转移酶(GST)、硫氧还蛋白、蛋白A、蛋白G、或...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·约翰逊，L·詹宁斯，P·舒尔茨，
申请(专利权)人：斯克里普斯研究所，诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US