【技术实现步骤摘要】
一种快速检测细菌耐药性的方法
本专利技术涉及细菌检测方法，尤其是涉及一种快速检测细菌耐药性的方法。
技术介绍
细菌耐药性检测的传统方法主要有纸片扩散法、肉汤稀释法和琼脂稀释法(MelvinP,PerformanceStandardsforAntimicrobialSusceptibilityTesting.CLSIM100.28,30(2018))，在利用这些方法进行药敏实验之前都需要经过细菌的培养纯化步骤，培养耗时24～48h，之后的药敏实验同样也是通过观察细菌是否生长增殖如细菌浊度或抑菌斑大小来判断细菌对药物的敏感性，耗时16～20h。临床通过传统药敏检测方法获得一份药敏报告需要经过3～5天，无法满足急性感染科医生和病人对于快速诊断的需求。近两年，有研究者提出利用单细胞拉曼技术结合重水标记对细菌进行快速药敏检测(Tao,Y.,etal,Metabolic-Activity-BasedAssessmentofAntimicrobialEffectsbyD2O-LabeledSingle-CellRamanMicro...
【技术保护点】
1.一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n设置不同浓度的抗生素实验组及阳性对照组与阴性对照组，其中，不同浓度的抗生素实验组是指将不同浓度的抗生素添加到培养基中，阳性对照组培养基中加入抗生素浓度为0，阴性对照组培养基中加入抗生素浓度为0，/n对实验组、阳性对照组、阴性对照组中的细菌进行孵育，然后分别向实验组、阳性对照组菌液中加入重水，而阴性对照组菌液中不加入重水，继续孵育后离心清洗，对实验组、阳性对照组、阴性对照组的样品进行拉曼检测，根据得到的拉曼图谱分别计算实验组、阳性对照组、阴性对照组的C-D/(C-D+C-H)，将不同浓度的抗生素实验组相对于对照组...
【技术特征摘要】
1.一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，包括以下步骤：
设置不同浓度的抗生素实验组及阳性对照组与阴性对照组，其中，不同浓度的抗生素实验组是指将不同浓度的抗生素添加到培养基中，阳性对照组培养基中加入抗生素浓度为0，阴性对照组培养基中加入抗生素浓度为0，
对实验组、阳性对照组、阴性对照组中的细菌进行孵育，然后分别向实验组、阳性对照组菌液中加入重水，而阴性对照组菌液中不加入重水，继续孵育后离心清洗，对实验组、阳性对照组、阴性对照组的样品进行拉曼检测，根据得到的拉曼图谱分别计算实验组、阳性对照组、阴性对照组的C-D/(C-D+C-H)，将不同浓度的抗生素实验组相对于对照组C-D/(C-D+C-H)比值下降的转折点作为抗生素对该菌的最低抑菌浓度，将最低抑菌浓度与CLSI药敏试验标准(2019)中给出的折点比较，判断细菌敏感、中介或耐药。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，进行不同浓度的抗生素实验组设置时，抗生素的浓度设置跨越该类菌CLSI规定的3个折点，即敏感(S)、中介(I)、耐药(R)浓度。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，当最低抑菌浓度<CLSI规定的敏感值(S)，判读为敏感，当CLSI规定的敏感值(S)<最低抑菌浓度<CLSI规定的耐药(R)，判读为中介，当最低抑菌浓度>CLSI规定的耐药(R)，判读为耐药。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，培养基使用MH培养基。
5.根据权利要求1所述的一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，重水添加量占培养基总体积的40％～60％。
在本发明的一个实施方式中，第一次孵育的时间为0.5-3h，孵育温度为37℃，第二次孵育的时间为0.5-3h，孵育温度为37℃。
6.根据权利要求1所述的一种快速检测细菌耐药性的方法，其特征在于，离心清洗的条件为：设置离心机转速3000rpm-10000rpm，时间1-3min，每次加入无菌水后用枪头吹...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗艳君，衣晓飞，彭迪，
申请(专利权)人：上海氘峰医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31
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