【技术实现步骤摘要】
一种新型孢子鞭毛染色液以及染色观察方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种新型孢子鞭毛染色液以及染色观察方法。
技术介绍
霜霉菌在分类学上隶属于卵菌。是一类形态和侵染特征与真菌类似的真核微生物。霜霉菌能够侵染许多重要的农作物，引起的霜霉病常常给农户造成巨大的经济损失。游动孢子是霜霉病菌最重要的侵染接种体，游动孢子依靠鞭毛进行运动并靶向寄主植物细胞,一旦接触到寄主植物,即迅速休止并开始萌发，萌发的芽管往往形成附着胞类似结构,以利于进一步侵入寄主植物。因此，游动孢子鞭毛的观察不仅是霜霉病菌生物学基础研究中的重要内容，而且对于对于游动孢子发育机制的研究提供重要的依据。由于鞭毛是附属结构，纤细，光学显微镜下不易观察到，因此，寻求简单易操作，观察效果明显的染色方法，对霜霉病菌游动孢子发育进而形成静止孢子的机制研究是必须的，同时为深入研究鞭毛发育机制、超微结构等提供重要的观察方法。细菌的鞭毛是重要的运动器官，细菌鞭毛的有无对于细菌的分类和鉴定是必须的，因此针对细菌的鞭毛染色技术很多。但是，卵菌不是原核微生物，由于卵菌的游动...
【技术保护点】
1.一种新型孢子鞭毛染色液，其特征在于，所述的染色液为番红或者固绿。/n
【技术特征摘要】
1.一种新型孢子鞭毛染色液，其特征在于，所述的染色液为番红或者固绿。
2.一种新型孢子鞭毛染色观察方法，其特征在于，首先材料需要再15度低温下预培养1.5h，室温下进行染色处理后置于20℃培养箱中染色0.5h，取出冲洗多余的染色液，吸干边缘多余的液体，置于显微镜下观察，可清晰地观察到游动孢子的孢子鞭毛。
3.如权利要求一种新型孢子鞭毛染色观察方法，其特征在于，包含如下步骤，
染色液的配置配制：称取番红0.1g溶入蒸馏水中，定溶至100ml，装入棕色滴瓶中，贴上标签备用；称取0.1g固绿溶入95％乙醇中，定溶至100ml，待全部溶解后转移入棕色滴瓶中，贴标签备用；
霜霉病菌的预培养：将田间采集的霜霉病叶在15-20度培养箱中进行保湿培养12h；采集标准：采集叶片正面具有鲜黄色的多角形病斑，叶背具有灰白色至灰黑色或黑色的霜霉层即霜霉病菌的孢子囊梗或孢子囊，迅速装入保湿袋中，防止叶片失水，影响孢子囊；或者是下午待太阳落山前进行霜霉病叶片采集，迅速装入保湿袋中，防止叶片失水；带回实验室，叶柄用浸透蒸馏水的棉花包裹严实，放入15cm底部铺有饱和水分的滤纸的培养皿中进行保湿培养，放入20度培养箱中保持培养12h；
孢子悬浮液的制备：将预培养的霜霉病菌，用洁净的毛笔刷轻轻刷取霉层即病菌的孢子囊，避开叶片表皮细胞置于凹玻片上的灭菌水中，反复2-3次，盖上盖玻片，放入9cm的培养皿中保湿0.5h，≤26℃的室温环境；
染色：用滴管吸取染色液，滴在凹玻片一边...
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