一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，属于食品质量安全检测技术领域。所述蔗糖转化酶酶值的检测方法包括以下步骤：(1)蜂蜜样品中酶液的提取；(2)酶液的显色反应；(3)蔗糖转化酶酶值计算。所述检测方法是基于酶液催化蔗糖产生的还原糖溶液和3,5‑二硝基水杨酸溶液共热后，3,5‑二硝基水杨酸能够被还原成棕红色氨基化合物的原理建立的蜂蜜中蔗糖转化酶酶值实现。本发明专利技术采用超滤的方法富集了蜂蜜中的酶，并去除了蜂蜜中还原糖的干扰，对反应中显色剂溶液用量，缓冲液pH值，反应温度，反应时间进行了优化，进而建立了一种评价蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，具有操作简单，准确高效等优点。

A detection method of invertase value in honey

【技术实现步骤摘要】
一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法
本专利技术属于食品质量安全检测
，具体涉及一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法。
技术介绍
蜂蜜是蜂产业中最为重要的产品之一。蜂蜜中含有多种酶类，包括淀粉酶、蔗糖转化酶、葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、酸性磷酸脂酶、β-葡萄糖苷酶等，这些酶既有蜜源植物本身存在的，也有蜂蜜在酿造过程中由蜜蜂唾液腺分泌物混入的。蜂蜜中存在的酶受蜂蜜加工过程受热程度以及储藏时间的影响其活性会逐渐降低，因此，可通过测定蜂蜜中酶的活性来对蜂蜜的新鲜度及品质加以评价。常用的对蜂蜜酶值的评价方法是测定蜂蜜中淀粉酶酶值，但是通过测定蔗糖转化酶的酶值来综合评价蜂蜜的成熟度、加工过程受热情况及储藏时间更具合理性。这主要是因为，作为生物活性物指指标，蔗糖转化酶比淀粉酶对环境的稳定性要更为敏感。此外，从蜂蜜的成熟过程来看，其生物化学过程主要是蔗糖转化为葡萄糖和果糖的过程，该过程的转化程度和作用强弱取决于蔗糖转化酶的活性，而不是淀粉酶。目前，国际上已经有越来越多的国家逐步将蔗糖转化酶酶值的测定加入到评价蜂蜜的质量及判断蜂蜜新鲜度的体系之中，已有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)将蜂蜜溶解后离心，得到澄清液和沉淀，将所述沉淀复溶，得到复溶液，将所述澄清液进行超滤，得到的浓缩液稀释后再次超滤，得到的再次超滤浓缩液与所述复溶液混合定容，得到酶液；所述溶解、复溶或稀释用溶液为pH值4.0～6.8的缓冲液；/n2)分别量取2mL所述酶液置于两支试管中，试管1为实验组，试管2为对照组，向试管2中加入1mL灭活液进行灭活，将试管1、试管2和蔗糖溶液在30～50℃条件下水浴10min，分别吸取蔗糖溶液2mL加至试管1和试管2中，在30～50℃条件下反应0.5～3.0h，向试管1中加入1mL所述灭活液终止反应；...

【技术特征摘要】
1.一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将蜂蜜溶解后离心，得到澄清液和沉淀，将所述沉淀复溶，得到复溶液，将所述澄清液进行超滤，得到的浓缩液稀释后再次超滤，得到的再次超滤浓缩液与所述复溶液混合定容，得到酶液；所述溶解、复溶或稀释用溶液为pH值4.0～6.8的缓冲液；
2)分别量取2mL所述酶液置于两支试管中，试管1为实验组，试管2为对照组，向试管2中加入1mL灭活液进行灭活，将试管1、试管2和蔗糖溶液在30～50℃条件下水浴10min，分别吸取蔗糖溶液2mL加至试管1和试管2中，在30～50℃条件下反应0.5～3.0h，向试管1中加入1mL所述灭活液终止反应；
3)从试管1和试管2中吸取相同体积的反应液1～3mL分别移置两个具塞比色管后，分别加入显色剂溶液0.25～3.5mL，在沸水浴中反应5min，冷却，用水将各具塞比色管溶液定容至刻度，将得到的两个具塞比色管中溶液于540nm波长下测定吸光度OD值，用定容至所述刻度的不含所述反应液的显色剂溶液做空白调零；
4)绘制还原糖标准曲线，按照公式(2)计算蔗糖转化酶酶值；



式(2)中：5表示酶反应体系，单位为mL；
2表示取2mL酶液参与反应；
50表示酶液总体积，单位为mL；
X表示蜂蜜样品质量，单位为g；
1表示反应时间1h；
所述试样中还原糖量的计算方法按照式(1)计算；



式(1)中：Y表示反应液的体积，单位为mL；
所述蔗糖转化酶酶值为在40℃、pH6.0缓冲溶液实验条件下，1g蜂蜜中所含有的蔗糖转化酶1h能使蔗糖水解释放还原糖的毫克数。


2.根据权利要求1所述检测方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔令杰，张红城，乔江涛，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11