一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液及其检测方法技术

本发明专利技术属于检测领域，具体的涉及一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液及其检测方法。本发明专利技术的预处理溶液由硝酸、硫酸、硫酸铜和五氧化二钒组成。本发明专利技术的粮油中真菌毒素的检测方法，取待检测的粮油加入上述预处理溶液反应,得到预处理后的粮油；接着加入氯化钠和乙腈水溶液后搅拌，得到混合溶液；在将混合溶液过滤后加入去离子水得到稀释后的滤液；接着将稀释后的滤液通过免疫亲和柱，并通过色谱级甲醇溶液配制包含待检测的真菌毒素的标准溶液得到标准曲线。最后通过激光诱导荧光检测器检测出待检测粮油中的真菌毒素的含量。本发明专利技术的检测方法可以检测多种真菌毒素，由于经过了预处理溶液的处理和检测方法的优化，得到了准确的检测结果。

A pretreatment solution for mycotoxin detection in grain and oil and its detection method

【技术实现步骤摘要】
一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液及其检测方法
本专利技术属于检测领域，具体的涉及一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液及其检测方法。
技术介绍
粮油是人们日常生活中的主要食用产品，属于不可缺少的生活必需品，故需求量巨大。真菌毒素是真菌在食品或饲料里生长所产生的代谢产物，对人类和动物都有害。目前人们已经发现400多种真菌毒素。毒性强的真菌毒素主要包括黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1，AFB1)、赭曲霉毒素A(OchratoxinA，OTA)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEA)、呕吐毒素(Deoxynivalenol，DON)、伏马毒素(fomoni-sin，FB)和T-2毒素(T-2toxin，T-2)等。一旦通过食物链进入人体后，将可能造成致畸、致突变和致癌等严重危害，由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响粮油的产量，降低农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。因此，对于粮油中真菌毒素的检测就显得尤其重要，是把控粮油产品质量，避免真菌毒素对人体造成伤害的关键手段。现有的粮油中真菌毒素的检测方法有免疫亲和柱-高效液相色谱法、酶联免疫试剂盒Elisa方法和胶体金免疫层析方法。其中，免疫亲和柱-高效液相色谱法虽然能实现对主要真菌毒素的快速测定，但是在检测结果的重现性、稳定性和准确性上存在不足。酶联免疫试剂盒Elisa方法和胶体金免疫层析方法虽然有着不错的准确度，但是只能测定单一的真菌毒素。鉴于此，有必要提供一种新的用于粮油中粮油中真菌毒素检测的方法，以解决现有技术的不足。>
技术实现思路
本专利技术的目的之一，是为了解决上述
技术介绍
中检测结果不准确的技术问题，提供一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液。本专利技术的用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液能够测定粮油中的多种真菌毒素。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液，由如下重量百分比的组分组成：硝酸43～45％、硫酸40～45％、硫酸铜5％～8％和五氧化二钒2～12％。本专利技术的有益效果是：通过硝酸和硫酸组成的强氧化剂可以将待测粮油中的大量有机物进行分解，有利于最后检测结果的准确性。通过硫酸铜和五氧化二钒组成的催化剂可以加快分解的过程，大大减少了反应的时间。本专利技术的预处理溶液并不会引入其它的干扰杂质，对于提高待检测粮油中真菌毒素的准确性有着十分重要的作用和意义。在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。进一步，由如下重量百分比的组分组成：硝酸43％、硫酸42％、硫酸铜5％和五氧化二钒10％。采用上述进一步方案的有益效果是，上述确定配比组成的预处理溶液能够对于粮油检测前的预处理达到更好的预处理效果。本专利技术的目的之二，是提供一种利用上述预处理溶液进行粮油中真菌毒素的检测方法。本专利技术的检测方法是利用上述的用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液进行粮油中真菌毒素的检测方法，本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种粮油中真菌毒素的检测方法，包括以下步骤：A、取待检测的粮油，加入权利要求1或2任一项所述的用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液，反应10～15min,得到预处理后的粮油，其中，所述待检测的粮油与所述用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液的质量比为100：(3～5)；B、向步骤A得到的预处理后的粮油中依次加入氯化钠和乙腈水溶液后搅拌，得到混合溶液，其中，所述预处理后的粮油、所述氯化钠和所述乙腈水溶液的质量比10：(4～20)：(20～50)；C、将步骤B得到的混合溶液过滤后，得到滤液，再向滤液中加入滤液2～3倍体积的去离子水进行稀释，再过滤后，得到稀释后的滤液；D、将步骤C得到的稀释后的滤液以流速为3～8mL/min通过免疫亲和柱的柱体，然后用去离子水清洗柱体，接着用色谱级甲醇溶液以2～5mL/min的流速通过柱体后进入收集器；E、用色谱级甲醇溶液配制与步骤A待检测的粮油中含有的真菌毒素种类相一致的标准溶液，接着采用激光诱导荧光检测器在激发波长为260～410nm，发射波长为450～510nm的条件下，检测所述标准溶液中的真菌毒素，得到标准曲线；F、采用激光诱导荧光检测器，在激发波长为260～410nm，发射波长为450～510nm的条件下，对步骤D中的收集器中的溶液进行检测，根据步骤E得到的标准曲线，得出待检测的粮油中的真菌毒素的含量。本专利技术的有益效果是：本专利技术的检测方法可以检测多种真菌毒素，且检测结果由于经过了本专利技术的预处理溶液的处理和检测方法的优化，能够得到十分准确的检测结果。解决了现有技术中结果容易受到干扰而不准确的技术问题。本专利技术检测方法以激光诱导荧光技术为核心，采用高速搅拌提取、免疫亲和净化、激光诱导荧光检测实现真菌毒素的检测，具有前处理程序简单快速、准确可靠、灵敏度高、重现性好，安全无污染等优点，能够满足粮油食品的检测。本检测方法操作条件要求低，采用激光诱导荧光检测器相对于液相色谱对操作人员的健康危害小。在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。进一步，在步骤A中，所述待检测的粮油中含有的真菌毒素为黄曲霉毒素、赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮中的任意一种。采用上述进一步方案的有益效果是上述真菌毒素的含量能够被更好的检测且是粮油好坏的主要指标。能够让本专利技术实现多种真菌毒素的检测。进一步，在步骤A中，所述待检测的粮油与所述用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液的质量比为100：5。采用上述进一步方案的有益效果是，确定的配比能够让最后的检测结果更加的准确。进一步，在步骤B中，搅拌的频率为3000～4000r/min，搅拌时间为2～5min。采用上述进一步方案的有益效果是，有效的保证了混合的效果，实现了充分的混合。进一步，在步骤D中，所述免疫亲和柱中填充的抗体为黄曲霉毒素、赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮中的任意一种，且与步骤A中待检测的粮油中含有的真菌毒素的种类相对应。采用上述进一步方案的有益效果是，相配合的免疫亲和柱能够让检测结果更加准确。进一步，在步骤D中，所述收集器采用陶瓷材料制成。采用上述进一步方案的有益效果是，陶瓷材料制成的收集器，避免了其它杂质的干扰。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例1、本实施例用于食用油中黄曲霉毒素检测的预处理溶液，由如下重量百分比的组分组成：硝酸43％、硫酸42％、硫酸铜5％和五氧化二钒10％。本实施例利用上述用于食用油中黄曲霉毒素检测的预处理溶液进行食用油中黄曲霉毒素的检测方法，包括以下步骤：A、取100g待检测的食用油加入上述预处理溶液反应10min,得到预处理后的食用油，待检测的食用油与所述预处理溶液的质量比为100：5；B、向步骤A的预处理后的食用油中依次加入氯化钠和乙腈水溶液后搅拌，得到混合溶液，所述预处理后的食用油与所述氯化钠和乙腈水溶液的质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液，其特征在于，由如下重量百分比的组分组成：硝酸43～45％、硫酸40～45％、硫酸铜5％～8％和五氧化二钒2～12％。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液，其特征在于，由如下重量百分比的组分组成：硝酸43～45％、硫酸40～45％、硫酸铜5％～8％和五氧化二钒2～12％。


2.根据权利要求1所述的用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液，其特征在于，由如下重量百分比的组分组成：硝酸43％、硫酸42％、硫酸铜5％和五氧化二钒10％。


3.一种利用如权利要求1或2任一项所述的用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液进行粮油中真菌毒素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、取待检测的粮油，加入权利要求1或2任一项所述的用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液，反应10～15min,得到预处理后的粮油，其中，所述待检测的粮油与所述用于粮油中真菌毒素检测的预处理溶液的质量比为100：(3～5)；
B、向步骤A得到的预处理后的粮油中依次加入氯化钠和乙腈水溶液后搅拌，得到混合溶液，其中，所述预处理后的粮油、所述氯化钠和所述乙腈水溶液的质量比10：(4～20)：(20～50)；
C、将步骤B得到的混合溶液过滤后，得到滤液，再向滤液中加入滤液2～3倍体积的去离子水进行稀释，再过滤后，得到稀释后的滤液；
D、将步骤C得到的稀释后的滤液以流速为3～8mL/min通过免疫亲和柱的柱体，然后用去离子水清洗柱体，接着用色谱级甲醇溶液以2～5mL/min的流速通过柱体后进入收集器；
E、用色谱级甲醇溶液配制与步骤A待检测的粮油中...

【专利技术属性】
技术研发人员：王轶楠，冯子琪，韩梅，袁芳，袁家厚，高宝财，许娜，张继明，季宏波，黄永东，
申请(专利权)人：黄永东，
类型：发明
国别省市：辽宁;21