The invention relates to a faecal Enterococcus capable of separating a faecal Enterococcus strong phage and an application thereof, belonging to the field of bioengineering. The bacteria was deposited in the typical culture preservation center of China with the preservation number of CCTCC No: m2019275 and the preservation date of April 19, 2019. The bacteria was isolated from the retreatment root canal of the stomatology department of Yan'an Hospital Affiliated to Kunming Medical University. In the invention, it is observed by transmission electron microscope that the bacteria has no spore and flagella, with a diameter of 0.9-1.1 \u03bc M. The growth temperature range is 20 \u2103 ~ 42 \u2103, and the optimum temperature is about 37 \u2103. The growth cycle is divided into four stages: tardiness, logarithm, stability and decay. The logarithm growth period is about 160-240 min. The Enterococcus faecalis of the invention can separate the virulent phage against Enterococcus faecalis; at the same time, the model of abdominal infection of Enterococcus faecalis of SD rats and periapical inflammation model of Enterococcus faecalis of small ear in southern Yunnan can be established with the bacteria as the infection source, so that it can be comprehensively used for the evaluation of Enterococcus faecalis infection and treatment.
【技术实现步骤摘要】
一株粪肠球菌及其应用
本专利技术属于生物工程领域，具体而言涉及一株能分离出粪肠球菌烈性噬菌体的粪肠球菌及其应用。
技术介绍
粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)属于肠球菌科肠球菌属，为革兰阳性兼性厌氧菌，呈圆形或椭圆形，直径0.5～1.0nm，大多数成对或短链状排列，通常不运动，是人体重要的条件致病菌。粪肠球菌多定居在人类和动物的胃肠和泌尿生殖器官，口腔中也有一定量的存在，它是引起口腔粘膜损害、牙周病及根管感染的重要细菌，是难治性根尖周炎中根管内混合感染的主要致病菌。难治性根尖周炎(RefractoryPeriapicalPeriodontitis)，又称顽固性根尖周炎，是指经反复多次规范根管治疗，根尖周病变仍迁延不愈的疾病。临床表现为复发性根尖周脓肿和进行性骨质破坏，并导致牙齿丧失和牙槽骨缺损，严重影响患者的治疗效果和生存质量，是口腔医师面临的棘手问题，也是牙髓病临床治疗的难题。粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)是根管治疗后再感染和难治性根尖周炎的主要病。在根管治疗后持续性...
【技术保护点】
1.一株粪肠球菌，其特征在于：该细菌被命名为粪肠球菌YN771，于2019年4月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2019275。/n
【技术特征摘要】
20190805 CN 201910716031X1.一株粪肠球菌，其特征在于：该细菌被命名为粪肠球菌YN771，于2019年4月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M2019275。
2.一株粪肠球菌用于分离粪肠球菌烈性噬菌体。
3.一株粪肠球菌用于建立SD大鼠粪肠球菌腹腔感染模型。
4.一株粪肠球菌用于建立滇南小耳猪粪肠球菌感染根尖周炎模型。
5.一种如权利要求2所述的一株粪肠球菌用于分离粪肠球菌烈性噬菌体，其分离特征包括以下步骤：(1)宿主菌的准备：以粪肠球菌YN771作为分离噬菌体的宿主菌，将粪肠球菌YN771，在BHI固体培养基上划线，32～40℃恒温孵育20～30h，然后挑取单菌落接种于5mLBHI液体培养基中，培养至对数生长早期OD为0.3，供分离粪肠球菌烈性噬菌体用；
(2)噬菌体的分离：以分离的培养至对数生长早期OD为0.3的粪肠球菌YN771为宿主菌，从昆明医科大学附属延安医院口腔科污水口取回的未经氯水处理的污水为样本，两者富集培养，2～8℃，8000～11,000rpm离心9～12min，收集上清液，用0.40～0.48μm无菌滤膜抽滤，再用0.20～0.24μm无菌滤膜过滤，收集滤液，将过滤液7倍稀释，从每个稀释梯度中分别取80～130μL与280～320μL宿主菌液混合，放置32～40℃恒温箱中静止吸附12～15min，然后加入冷却至40℃、琼脂浓度为0.75％的BHI半固体培养基4～8mL，混匀后快速的倾倒于普通BHI固体培养基上，形成双层平板，超净工作台下静置12～18min，使其充分凝固，倒置于37℃恒温箱静置培养，10～13h后，观察到BHI双层平板上长出边缘清晰的噬菌斑；
(3)噬菌体的纯化：以分离的培养至对数生长早期OD为0.3的粪肠球菌YN771为宿主菌，用无菌棒挑取噬菌体单个噬菌斑，接种到宿主菌液，32～40℃，120～170rpm，培养10～24h，取混合物...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏云林，向盈盈，季秀玲，宋飞，杨向红，于鸿滨，周静，秦堃豪，秦榕，
申请(专利权)人：昆明理工大学，昆明市延安医院，
类型：发明
国别省市：云南;53
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。