The invention discloses a Candida detection device and a detection method, which comprises a centrifuge, a polymerase chain reaction instrument, a magnetic resonance detection system, a Candida magnetic nano probe, a probe holding device and a conveying device, wherein the whole blood sample is sent to the centrifuge for centrifugation and centrifugation treatment by the conveying device, and then to the polymerase chain reaction instrument by the conveying device The blood sample is mixed with the magnetic nanoprobe of Candida after centrifugation and polymerase chain reaction, and then the mixed liquid is sent to the magnetic resonance detection system by the transmission device for T2 relaxation time measurement. According to the T2 relaxation time, the existence of Candida is detected and the species of Candida is determined. The invention can realize sensitive and fast Candida detection.
【技术实现步骤摘要】
念珠菌检测设备及检测方法
本专利技术涉及医疗设备领域，具体地说是一种念珠菌检测设备及检测方法。
技术介绍
近年来由于广谱抗菌药物、糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛应用，导管、插管、化疗及介入治疗、器官移植等新诊疗技术的广泛开展，加上肿瘤、移植、糖尿病、艾滋病等高危人群的逐年增多，念珠菌病的发病率呈明显上升趋势，已成为目前最常见的深部真菌病，其中念珠菌血症是最常见的血流感染之一，病死率可达40％，显著高于细菌引起的血流感染，且治疗疗程长，医疗费用巨大。念珠菌血症早期诊断、早期治疗预后较好，但临床初期症状不明显，早期诊断困难，延误诊断或播散性感染预后不良。研究表明，在12小时内开始针对性的抗真菌治疗可以将病死率从40％降低至11％，念珠菌血症发展成败血症后，每延迟一个小时治疗，病死率将提高7.6％。在缺乏依据的情况下，加用抗真菌药物会增加治疗成本和不良反应的风险，因而念珠菌的早期快速分型具有重要的临床意义，早期将念珠菌鉴定到种的水平对指导用药有很大的帮助。念珠菌检测主要包括形态学方法、免疫学检测、血液培养和分子生物学...
【技术保护点】
1.一种念珠菌检测设备，其特征在于：包括离心机、聚合酶链式反应仪、磁共振检测系统、念珠菌磁性纳米探针、探针盛放装置和传送装置，全血试样由所述传送装置送至离心机旋转离心处理，再由传送装置送至聚合酶链式反应仪进行聚合酶链式反应，全血试样经过旋转离心处理和聚合酶链式反应后与所述念珠菌磁性纳米探针混合，之后由传送装置将混合液体送至磁共振检测系统进行T2弛豫时间测量，根据所述T2弛豫时间检测念珠菌是否存在，并确定念珠菌的种类。/n
【技术特征摘要】
1.一种念珠菌检测设备，其特征在于：包括离心机、聚合酶链式反应仪、磁共振检测系统、念珠菌磁性纳米探针、探针盛放装置和传送装置，全血试样由所述传送装置送至离心机旋转离心处理，再由传送装置送至聚合酶链式反应仪进行聚合酶链式反应，全血试样经过旋转离心处理和聚合酶链式反应后与所述念珠菌磁性纳米探针混合，之后由传送装置将混合液体送至磁共振检测系统进行T2弛豫时间测量，根据所述T2弛豫时间检测念珠菌是否存在，并确定念珠菌的种类。
2.如权利要求1所述的念珠菌检测设备，其特征在于：所述念珠菌磁性纳米探针包含具有缀合到磁性粒子表面的第一探针和第二探针，第一探针的作用是结合到靶核酸的第一区段，第二探针的作用是结合到靶核酸的第二区段，磁性粒子在靶核酸存在下形成聚集体，显著增大分析物的T2弛豫时间；所述磁共振检测系统使用在念珠菌与念珠菌磁性纳米探针结合之前的纳米粒子溶液来测量T2弛豫时间的基线值，然后对所述混合液体测量T2弛豫时间，以判断T2弛豫时间是否发生变化。
3.如权利要求2所述的念珠菌检测设备，其特征在于：在聚合酶链式反应正向引物和反向引物存在下对待检测的核酸进行扩增，寡核苷酸探针分别与聚合酶链式反应产物的5’和3’端的嵌套序列互补，杂交到扩增子的5’端的捕获探针被3’胺化，杂交到扩增子的3’端的捕获探针被5’胺化，所述正向引物包含寡核苷酸序列5’—GGCATGCCTGTTTGAGCGTC—3’，所述反向引物包含寡核苷酸序列5’—GCTTATTGATATGCTTAACAGCGGGT—3’。
4.如权利要求3所述的念珠菌检测设备，其特征在于：所述念珠菌属物种是白色念珠菌，所述念珠菌磁性纳米探针的第一探针包含寡核苷酸序列ACCCAGCGGTTTGAGGGAGAAAC，所述念珠菌磁性纳米探针的第二探针包含寡核苷酸序列AAAGTTTGAAGATATACGTGGTGGACGTTA。
5.如权利要求3所述的念珠菌检测设备，其特征在于：所述念珠菌属物种是热带念珠菌，所述念珠菌磁性纳米探针的第一探针包含寡核苷酸序列AAAGTTATGAAATAAATTGTGGTGGCCACTAGC，所述念珠菌磁性纳米探针的第二探针包含寡核苷酸序列ACCCGGGGGTTTGAGGGAGAAA。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：娄海芳，张鞠成，张乔冶，胡娟，吴海翔，
申请(专利权)人：浙江省人民医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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