一种去乙酰毛花苷及杂质的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种采用毛花苷c或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷为原料，在碳酸氢盐为碱的条件下，进行水解定量的形成相应的去乙酰毛花苷和杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D,方便水解产物后期的制备分离。

A preparation method of deacetylated hairy anthocyanin and impurities

The invention discloses a kind of deacetylated digitalis glycoside a, B, D, which can be hydrolyzed to form corresponding deacetylated digitalis glycoside C and deacetylated digitalis glycoside a, B, D under the condition of bicarbonate as base, so as to facilitate the preparation and separation of the hydrolysate in the later stage.

【技术实现步骤摘要】
一种去乙酰毛花苷及杂质的制备方法
本专利技术涉及去乙酰毛花苷制备方法，特别涉及从洋地黄提取物混苷中制备去乙酰毛花苷及其杂质的制备方法。
技术介绍
去乙酰毛花苷注射液主要用于心力衰竭，由于其作用较快，适用于急性心功能不全或慢性心功能不全急性加重的患者；亦可用于控制伴快速心室率的心房颤动、心房扑动患者的心室率；终止室上性心动过速起效慢，已少用。其化学名称为：3-[0-β-D-葡吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核-已吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核-已吡喃糖基-(1→4)-O-2，6-二脱氧-β-D-核-已吡喃糖基)氧代]-12，14-二羟基-心甾-20(22)-烯内酯，化学式如式I所示，分子式为C47H74O19，分子量为943.09。据李舸远，陈东亚等在期刊《药学与临床研究》2011.19(6)发表的《去乙酰毛花苷注射液的杂质研究》中介绍，去乙酰毛花苷是通过水解毛花苷c进行去乙酰基而得来，后者是由毛花洋地黄中提取的一种速效强心苷，作用较洋地黄、地高辛快，但比毒毛花苷K稍慢。因此在制备去乙酰毛花苷时，一般均采用洋地黄提取物主含毛花苷c混苷进行水解去乙酰基形成去乙酰毛花苷；但是洋地黄提取物混苷中含量大量其他毛花洋地黄苷(如毛花洋地黄苷a，b,d)，使用混苷制备去乙酰毛花苷成品中成为去乙酰毛花苷杂质主要来源，一般也水解成相应的去乙酰化产物,命名为相应杂质去乙酰毛花洋地黄苷A，B，D。在药品的研究过程中，一般需要明确杂质来源去向提供相应杂质研究谱图，并且研究对有关物质进行有效的分离鉴定，将相应的杂质定入药品质量标准。去乙酰毛花苷中的杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D，目前国内市场并没有成熟的市售品可供购买，也没有文献报道，因而供其研究的样品只能完全依赖于自身制备及分离纯化。而去乙酰毛花苷及含有杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D的去乙酰混合苷的制备方法，通常是将毛花苷或其含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷经一步水解去乙酰基反应后，得到去乙酰混合苷粗品，再进行液相制备分离，因而其反应收率会严重影响各组份液相分离制备的难度及收率。目前去乙酰化反应公开的主要有如下几种制备方法。1933年，ArthurAtoll和WalterKreis在德文期刊HelveticaChimicaActa，1933,16:1390-1407中报道的去乙酰毛花苷制备方法，其主要使用混苷以氢氧化钙作为碱，室温反应过夜后过滤，滤液旋干后过滤得到产物。1975年，PekicB等在英文期刊PlantaMedica,1975,27:178-181中报道了一种去乙酰毛花苷的制备方法，其主要使用混苷以少量甲醇钠作为催化剂，将毛花苷进行甲醇分解反应，可得到去乙酰毛花苷。2015年，成都倍特药业公开了一篇关于去乙酰毛花苷合成方法的专利，专利号为CN104447933B，其直接用毛花苷c为原料使用一系列碳酸盐作为碱，室温下反应过夜后过滤得到去乙酰毛花苷，得到高收率和高纯度的去乙酰毛花苷，但是未明确说明原料的来源质量标准和纯度。对于上述文献或专利报道的三种合成方法，我们都已进行验证，在实际实验过程中，发现了较多问题。氢氧化钙水解体系在实际的大量生产中应用较为广泛，但其本身在水溶液中溶解性较差，一般要过滤后得到澄清液体才能下步操作，增加了操作难度；同时，该体系与碳酸盐体系同样由于碱性稍强，反应速率较快，难以及时终止反应而容易造成反应过度，进而影响体系收率及纯度。特别是在制备杂质A,B,D实验中，由于其在毛花苷混苷中的含量较少，各杂质反应速率不一，难以有效控制反应进程，导致水解不全或者过度水解，导致在水解产物体系中含量变少，造成某单个杂质在整个体系中的含量下降太多，就会增加某个杂质的分离难度，难以被简单的分离方法分离，如重结晶，柱层析、制备分离等；同时也给药学研究中杂质来源和去向研究造成麻烦。本专利技术人仍试图尝试通过制备分离起始原料含有杂质的毛花苷混苷，以可从起始原料中分别获得单一的杂质毛花洋地黄苷a，b,d，但是未能找到有效的分离手段，获得对应较高含量的单一组份。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供一种毛花苷c或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷为起始原料进行水解，定量的形成相应去乙酰毛花苷和杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D,方便水解产物后期的制备分离，特别是杂质的质量研究。本专利技术提供一种去乙酰毛花苷及其杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D的制备方法，包括将毛花苷c或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷溶于适量溶剂中，加入适量碳酸氢盐进行水解，得到水解产物进一步后处理得到目标产物粗品。其中所述的杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷和杂质去乙酰毛花洋地黄苷A，B，D为前所述的结构。其中混合苷含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d质量分数分别为10-20％，10-20％，0.5-5％；得到水解产物进一步后处理得到目标产物粗品，可以用常规的重结晶或者制备液相分离分别得到单一高纯度的去乙酰毛花苷及其杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D。进一步地，所述的碳酸氢盐选自碳酸氢钾，碳酸氢钠，碳酸氢铵，碳酸氢钙和或碳酸氢锂中一种或者几种，其中优选为碳酸氢钠；碳酸氢盐与毛花苷或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷的质量比为1：1-10，优选为1：1-4，最优选为1：1-2。进一步地，反应的溶剂为混合溶剂，包括水和能与水互溶的有机溶剂，其中能与水互溶的有机溶剂选自：醇类溶剂、酮类溶剂、乙腈中的一种或者几种；优选为醇类溶剂，更优选为甲醇、乙醇、异丙醇。其中毛花苷或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷的质量与混合溶液的体积比为1：3-20，优选的为1：3-10；能与水互溶的有机溶剂与水的体积比为5：1-20，优选的为5：1-5。进一步地，反应在温度为15-65℃下反应6-24小时。更进一步地，得到水解产物进一步后处理一般是指在水解反应结束体系中滴加稀酸调节体系PH值至7-8，减压浓缩至干得类白色固体，减压浓缩温度为15-65℃。本专利技术所指的减压浓缩条件一般是指本领域技术人员常规所能理解的进行相应操作下的真空压力和温度，稀酸一般是本领域人员常规可以中和反应体系中的碱均可。再进一步地，目标产物粗品用常规的重结晶或者制备分离得到单一高纯度的去乙酰毛花苷及其杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D，一般是指在粗产品中含有足够含量的目标物去乙酰毛花苷或者杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D，然后本领域技术人员通过常规重结晶或者制备液相分离技术进行分离收集目标物，优选为制备液相分离。特别本专利技术所指的杂质去乙酰毛花洋地黄苷B,D的制备方法。其中一种制备液相分离方法如下：以碳酸氢铵溶于纯化水作为流动相A，以乙腈作为流动相B，LH40岛津液相色谱仪，LC20AP泵和SPD-20A检测器，色谱柱，ACE5C18柱(150×30.0mmid5μm)，流速：30ml/分钟，柱温：室温，波长：220nm和/或254nm，梯度洗涤：本专利技术有益效果本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种去乙酰毛花苷及其杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D的制备方法，其特征在于，包括将毛花苷或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷，溶于溶剂中，加入碳酸氢盐进行水解，得到水解产物进一步后处理得到目标产物粗品，/n

【技术特征摘要】
1.一种去乙酰毛花苷及其杂质去乙酰毛花洋地黄苷A,B,D的制备方法，其特征在于，包括将毛花苷或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷，溶于溶剂中，加入碳酸氢盐进行水解，得到水解产物进一步后处理得到目标产物粗品，





2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的碳酸氢盐选自碳酸氢钾，碳酸氢钠，碳酸氢铵，碳酸氢钙和或碳酸氢锂中一种或者几种，其中优选为碳酸氢钠。


3.根据权利要2所述的制备方法，其特征在于，所述的碳酸氢盐与毛花苷或含有杂质毛花洋地黄苷a,b,d的混合苷的质量比为1：1-10，优选为1：1-4，最优选为1：1-2。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，反应的溶剂为混合溶剂，包括水和能与水互溶的有机溶剂，其中能与水互溶的有机溶剂选自：醇类溶剂、酮类溶剂、乙腈中的一种或者几种；优选为醇类溶剂，更优选为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或者几种。


5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈小林，王刚，梁屹，杨易可，张帆，占娅锋，高鹏飞，毛亮，
申请(专利权)人：上海旭东海普药业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31