用于活的减毒病毒的方法和组合物技术

公开了减少包括疫苗的活的减毒病毒失活和/或降解的一种或多种活的减毒病毒和组合物。这个组合物可以包括至少一种糖类、至少一种蛋白质和至少一种高分子量表面活性剂。

Methods and compositions for live attenuated viruses

One or more live attenuated viruses and compositions that reduce the inactivation and / or degradation of live attenuated viruses including vaccines are disclosed. The composition may include at least one carbohydrate, at least one protein, and at least one high molecular weight surfactant.

【技术实现步骤摘要】
用于活的减毒病毒的方法和组合物本申请是申请日为2008年4月4日、申请号为201510325174.X、专利技术名称为“用于活的减毒病毒的方法和组合物”的专利申请的分案申请。优先权本申请要求2007年4月6日提交的美国临时专利申请号60/910,579的优先权权益，其全文通过引用并入本文。
本文实施方式涉及用于稳定活的减毒病毒的组合物和方法。其他实施方式涉及用于减少活的减毒病毒降解的组合物和方法。其他实施方式还涉及这些组合物在便携式应用和方法的试剂盒中的应用。
技术介绍
防止病毒感染的疫苗已经被有效地用于减少人类疾病的发病率。用于病毒疫苗的最成功的技术之一是用减弱的或者减毒的病毒(“活的减毒病毒”)株免疫动物或者人类。由于免疫之后有限的复制，减毒株不会引起疾病。然而，该有限的病毒复制足以表达病毒抗原全部的所有组成成分并且对该病毒产生有效和持久的免疫反应。因此，当后来暴露于致病的病毒株时，该免疫个体被保护免于疾病。这些活的减毒病毒疫苗是用于公众健康的最成功的疫苗之一。在美国批准销售的病毒疫苗的十六分之十是活的减毒病毒。高度成功的活的病毒疫苗包括黄热病17D病毒，1、2和3型萨宾脊髓灰质炎病毒(Sabinpoliovirus)、麻疹病毒、腮腺炎病毒、风疹病毒、水痘病毒以及痘苗病毒。使用痘苗病毒疫苗控制天花爆发导致第一次和仅有的人类疾病的根除。萨宾脊髓灰质炎病毒疫苗已经帮助在全世界预防顽症并且在致力根除脊髓灰质炎中被使用。幼儿接种麻疹、流行性腮腺炎、风疹以及水痘疫苗在国际范围内防止成千上万的死亡和疾病。最近的技术进展例如重配、反求遗传学以及冷适应，已经导致用于流感和轮状病毒的活的减毒病毒的许可证的颁发。用重组DNA技术开发的许多活的病毒疫苗处于人类临床试验中，其包括用于西尼罗河疾病、登革热、疟疾、肺结核以及HIV的疫苗。这些重组病毒疫苗依赖于很好表征的减毒病毒疫苗的操作，例如腺病毒、痘苗病毒、黄热病17D或者登革热病毒、DEN-2PDK-53。安全的减毒病毒被基因工程化以表达其他病毒或者细菌性病原体的保护性抗原。几种重组病毒疫苗已经被批准用于动物用途，其包括金丝雀/猫科动物白血病重组病毒、金丝雀/犬瘟重组病毒、金丝雀/西尼罗河重组病毒以及黄热病/西尼罗河重组病毒。作为类群，活的减毒病毒疫苗是人类历史上是最成功的医学干涉之一，仅仅次于抗生素的出现并且有在全世界范围内改善公共健康的希望。为了使活的减毒病毒疫苗是有效的，它们必须在免疫之后能够复制。因此，任何使病毒失活的因素可以削弱疫苗。例如，第二次世界大战之前天花疫苗的广泛分发和应用被限制，因为该病毒在环境温度下仅仅几天后就失活。在20世纪20年代，法国科学家证明冷冻干燥的疫苗提供长期稳定性，并且在20世纪40年代发展了用于大规模生产冷冻干燥疫苗的技术(参见，例如Collier1955)。除了冷冻干燥外，各种能够帮助稳定活的减毒病毒疫苗中的病毒的添加剂也已经被确定(参见例如Burke,Hsu等1999)。这些稳定剂典型地包括一种或者多种以下的成分：二价阳离子、缓冲盐溶液、螯合剂、尿素、糖(例如，蔗糖、乳糖、海藻糖)、多元醇(例如，甘油、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇)、氨基酸、蛋白水解物(例如，酪蛋白水解物、乳清蛋白水解物、蛋白胨)、蛋白质(例如，明胶、人血清白蛋白)或者聚合物(例如，葡聚糖)。然而，即使使用这些稳定剂，许多常用的疫苗为了稳定仍然需要冷藏。其他常用的疫苗对温度极限敏感；过分的热或者意外的冷冻可以使疫苗失活。在整个分送期间维持这种“冷链(低温运输系统，coldchain)”在发展中国家特别困难。因此，仍然存在对于改进现有和新开发的活的减毒病毒疫苗的稳定性的需求。黄病毒是最不稳定的病毒之一。它们是具有大约11,000个碱基的RNA基因组的有包膜病毒。大多数黄病毒通过节肢动物媒介——通常为蚊子——传播。有超过70种不同的黄病毒，其基于血清学分组为三种主要类别：登革热组、日本脑炎组以及黄热病组。在已知的黄病毒中，40种通过蚊子传播，16种通过虱类传播以及18种病毒没有确定的昆虫媒介。因此，大多数黄病毒已经进化到既在它们的节肢动物媒介中又在它们的脊椎动物宿主种类(通常是鸟类或者哺乳动物)中复制。扩张的都市化、世界范围的旅行以及环境变化(例如采伐森林或者雨水类型)已经导致威胁人类公共健康的数种黄病毒的出现。这种病毒包括但不限于黄热病病毒、登革热病毒、西尼罗河病毒、日本脑炎病毒和蜱传脑炎病毒。通过加强的蚊子控制和接种疫苗努力，黄热病从北美洲、中美洲和南美洲、加勒比海和欧洲的大部分地区消除。然而，最近20年中，报道病例的国家数量已经增加。黄热病病毒在非洲和南美州以及一些加勒比海岛屿的主要地区现在是地方病。世界卫生组织(WHO)估计：每年200,000例黄热病的病例出现，这导致30,000人死亡。自第二次世界大战以来，登革黄病毒已经传播到遍及全世界的热带和亚热带区域并且现在威胁到超过35亿人，这大约是世界人口的一半。WHO估计每年5000万-1亿的登革热病例出现。这些中的500,000例为更严重、威胁生命的疾病类型，称作登革出血热，其导致每年25,000以上的病例死亡。西尼罗河病毒的特别致命的形式在1999年在纽约大概通过旅行被引入到西半球。蚊子传播的病毒感染鸟类作为第一宿主，但是也在人类和马中引起疾病和死亡。西尼罗病毒传遍美国并且传入加拿大和墨西哥。因为其传入，西尼罗河病毒已经引起超过20,000例报道的西尼罗河疾病病例，在美国导致950人死亡。日本脑炎病毒每年导致30,000到50,000例的神经系统疾病，主要是在东亚和南亚。报道病例的25-30％是致命的。蜱传脑炎病毒对于欧洲和亚洲的部分地区是地方病，并且继续导致影响成千上万个体的突然爆发(episodicoutbreaks)。与具有更有限的地理传播相关的病毒包括澳洲和新几内亚的库京病毒(kujingvirus)(西尼罗河的近属)和澳洲墨莱溪谷脑炎病毒、北美和南美的圣路易斯脑炎病毒、非洲的乌苏土、库坦戈以及雅温德病毒、和南美洲的Cacipacore病毒。已经开发了安全并且防御黄病毒疾病例如黄热病和日本脑炎的活的减毒病毒疫苗。活的减毒病毒疫苗17D已经被广泛用于预防黄热病。目前的黄病毒疫苗在稳定剂的存在下被冷冻干燥。但是，该疫苗要求在2–8℃储存和运输，这在发展中国家和发达国家较为偏僻的地区这是难以达到的要求。此外，一旦重构，即使储存在2–8℃，该疫苗也迅速丧失效价。麻疹疫苗是世界范围内使用以预防疾病的不稳定减毒病毒的另一个例子。麻疹病毒是副黏病毒家族有包膜的、非分段(non-segmented)的负链RNA病毒。麻疹是高度传染性、季节性疾病，其几乎可以影响每个青春期之前不接种的儿童。在发展中国家，麻疹感染儿童的死亡率可以高达2到15％。实际上，虽然努力建立世界范围内免疫接种，但是麻疹每年仍然导致7,000个以上的儿童死亡。麻疹疫苗是在原代鸡成纤维细胞中制造的活的减毒病毒。疫苗用明胶和山梨糖醇稳定并随后冻干。如果在2到8℃下储存，稳定的冻干疫苗具有2年或更长的保存期。然而，该本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.活的减毒病毒组合物，其包括：/n一种或者多种活的减毒病毒；/n一种或者多种高分子量表面活性剂；/n一种或者多种蛋白质剂，和/n一种或者多种糖剂；/n其中所述组合物能够减少所述活的减毒病毒的失活。/n

【技术特征摘要】
20070406 US 60/910,5791.活的减毒病毒组合物，其包括：
一种或者多种活的减毒病毒；
一种或者多种高分子量表面活性剂；
一种或者多种蛋白质剂，和
一种或者多种糖剂；
其中所述组合物能够减少所述活的减毒病毒的失活。


2.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述活的减毒病毒选自黄病毒、披膜病毒、冠状病毒、棒状病毒、线状病毒、副黏病毒、正黏病毒、布尼亚病毒、沙粒病毒、反转录病毒、嗜肝DNA病毒、疱疹病毒、痘病毒家族和其组合。


3.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述活的减毒病毒是黄病毒。


4.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述组合物为含水的形式。


5.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述组合物是部分或全部脱水的。


6.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述表面活性剂具有1500或更大的分子量。


7.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述表面活性剂还包括一种或者多种共聚物，其中所述所述表面活性剂的分子量是3000或更大。


8.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述表面活性剂由一种或者多种EO-PO嵌段共聚物组成。


9.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述蛋白质剂选自乳清蛋白、血清白蛋白、甲胎蛋白、维生素D结合蛋白、源于脊椎动物种的α白蛋白和其组合。


10.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述蛋白质剂为源于脊椎动物种的血清白蛋白。


11.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述糖剂是糖类、多元醇或其组合的至少一种。


12.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述糖剂的一种或多种选自海藻糖、蔗糖、壳聚糖、山梨糖醇、甘露醇和其组合。


13.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中所述糖剂是海藻糖。


14.根据权利要求1所述的病毒组合物，其中至少一种表面活性剂是EO-PO嵌段共聚物普鲁罗尼克F127，至少一种蛋白质剂是血清白蛋白，和至少一种糖剂是海藻糖。


15.根据权利要求14所述的病毒组合物，其中所述EO-PO嵌段共聚物普鲁罗尼克F127浓度为0.1％到4％(w/v)，其中所述血清白蛋白浓度为0.001％到3％(w/v)，并且所述海藻糖浓度为5％到50％(w/v)。


16.减少活的减毒病毒组合物的失活的方法，其包括：将一种或者多种活的减毒病毒与组合物组合，所述组合物包括一种或者多种高分子量表面活性剂、一种或者多种蛋白质剂和一种或者多种糖类，其中所述组合...

【专利技术属性】
技术研发人员：DT斯廷奇克姆，JE奥索里奥，ON威根，
申请(专利权)人：武田疫苗公司，
类型：发明
国别省市：美国;US