血液样本DNA提取试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种血液样本DNA提取试剂盒及其应用。所述试剂盒包含细胞裂解液A和稳定液B。本发明专利技术通过向细胞裂解液中添加稳定液，使得血液样本DNA提取过程中由抗凝剂所导致的PCR抑制得以有效消除。本发明专利技术方法提取成本低，提取耗时10min左右，总检测耗时仅需60min左右，非常适合于大规模96孔板快提操作。

Blood sample DNA extraction kit and its application

The invention provides a blood sample DNA extraction kit and an application thereof. The kit comprises a cell lysate A and a stable solution B. The invention can effectively eliminate the PCR inhibition caused by anticoagulants in the process of DNA extraction of blood samples by adding a stable solution to the cell lysate. The method has the advantages of low extraction cost, extraction time of about 10min and total detection time of about 60min, which is very suitable for large-scale 96 hole plate fast lifting operation.

【技术实现步骤摘要】
血液样本DNA提取试剂盒及其应用
本专利技术涉及生物
，具体地说，涉及一种血液样本DNA提取试剂盒及其应用。
技术介绍
随着分子检测技术在育种领域中的应用普及，养殖场或育种场对生产性状关联SNP检测需求增多，目前生产中多采用提取血液DNA后进行PCR，随后对PCR产物电泳的方法进行SNP分型检测。该方法不仅在DNA提取过程中需要用到多种仪器，耗费大量人力、试剂、时间成本，且增加了检测区域PCR气溶胶污染几率，影响了基因分型检测技术的广泛应用。基于目前市场上对快速获得DNA进行基因分型检测的需求，亟待开发一种能够快速从血液获得DNA以用于下游Taqman检测的方法，一步实现从血液到分型，降低成本，减少时间、人力和试剂消耗。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种血液样本DNA提取试剂盒及其应用。本专利技术技术原理如下：实现血液快速获取DNA，用于下游TaqmanSNP检测需要实现血液DNA的快速简便获取，并克服血液裂解液或粗提DNA中杂质对PCR的抑制和荧光信号的淬灭。研究显示，常用的血液抗凝剂如EDT本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.血液样本DNA提取试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含细胞裂解液A和稳定液B；/n所述细胞裂解液A选自50～100mM Tris-HCl、50～75mM NaCl、0.5％～5％Triton X-100、50～100mM DTT中的至少一种；/n所述稳定液B选自10％～30％甘油、10％～25％DMSO、0.5％～5％Tween-20中的至少一种。/n

【技术特征摘要】
1.血液样本DNA提取试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含细胞裂解液A和稳定液B；
所述细胞裂解液A选自50～100mMTris-HCl、50～75mMNaCl、0.5％～5％TritonX-100、50～100mMDTT中的至少一种；
所述稳定液B选自10％～30％甘油、10％～25％DMSO、0.5％～5％Tween-20中的至少一种。


2.权利要求1所述试剂盒在DNA提取及基因检测中的应用。


3.血液样本DNA提取及基因检测方法，其特征在于，所述方法包括：向采集的血液样本中加入样本10～30倍体积量的细胞裂解液A，25℃～35℃振荡混匀；然后，加入与细胞裂解液A等量的稳定液B，25℃～35℃振荡混匀后静置，取上清用水稀释10～20倍作为模板，用于PCR反应，进行目标基因的检测或分型；
其中，所述细胞裂解液A、稳定液B采用权利要求1中所述的细胞裂解液A、稳定液B。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所采集的血液样本中含有抗凝剂，所述抗凝剂选自EDTA、肝素、柠檬酸钠中的至少一种。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法包括：将5μL血液样本加入到96孔板中，加入50μL细胞裂解液A，震混瞬离，室温振荡裂解...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘继强，
申请(专利权)人：北京康普森生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11