The problem solved by the invention is to provide a reagent for extracting / amplifying the nucleic acid of the nucleic acid extracting object, which is characterized by simple, rapid and efficient extraction of nucleic acid from the nucleic acid extracting object and minimizing the inhibition of the nucleic acid amplification reaction, and the problem solved is to provide a method for extracting and amplifying the nucleic acid using the reagent. The problem is solved by using a kit for extracting and amplifying the nucleic acid of the nucleic acid extraction object from a sample containing the nucleic acid extraction object, the kit comprising (I) a nucleic acid extraction reagent having at least a surfactant having a steroid skeleton, (II) a \u03b3 - cyclodextrin having a 1-4-carbon hydroxyalkyl group, and (III) a nucleic acid amplification reagent.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于提取和扩增核酸的试剂
本专利技术涉及用于简单、快速且高效地提取和扩增核酸的试剂,以及使用该试剂提取和扩增核酸的方法。
技术介绍
在传染病的临床检查领域,简单、快速且高灵敏度地检测病原体是非常重要的,并且快速检测试剂盒已广泛普及。使用核酸扩增技术的检测方法已知是用于高灵敏度检测病原体的方法。当通过使用核酸扩增技术的这类检测方法检测病原体时,通常预先进行从含有病原体的样品中提取核酸的操作。在这样的情况下采用的方法已知涉及使用表面活性剂从病原体提取核酸、使用环糊精中和表面活性剂对核酸扩增反应的抑制作用、以及使核酸进行扩增核酸的步骤。在专利文献1中,将通过用官能团修饰来制备的α、β、γ-环糊精列为用于核酸扩增反应的试剂的组分,并且例示碳数为1-4的羟烷基等作为官能团。专利文献1进一步描述了在文中添加的2-羟丙基-β-环糊精和例如脱氧胆酸钠等表面活性剂共存的情况下进行PCR,然后通过添加环糊精改善DNA聚合酶对抑制作用的抗性。然而,专利文献1并没有具体记载作为环糊精的具有碳数为1-4的羟烷基的γ-环糊精。现有技术文献专利文献专利文献1:日本特开2014-198029号公 ...
【技术保护点】
1.一种用于从含有核酸提取对象的样品中提取和扩增所述核酸提取对象的核酸的试剂盒,其包括以下(i)、(ii)和(iii),其中所述核酸提取对象选自微生物、动物细胞、植物细胞、和细胞外小泡:(i)核酸提取试剂,其至少含有具有甾体类骨架的表面活性剂;(ii)具有碳数为1‑4的羟烷基的γ‑环糊精;和(iii)核酸扩增试剂。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.03.13 JP 2017-047428;2017.05.16 JP 2017-097201.一种用于从含有核酸提取对象的样品中提取和扩增所述核酸提取对象的核酸的试剂盒,其包括以下(i)、(ii)和(iii),其中所述核酸提取对象选自微生物、动物细胞、植物细胞、和细胞外小泡:(i)核酸提取试剂,其至少含有具有甾体类骨架的表面活性剂;(ii)具有碳数为1-4的羟烷基的γ-环糊精;和(iii)核酸扩增试剂。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述具有碳数为1-4的羟烷基的γ-环糊精为2-羟丙基-γ-环糊精。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其中所述具有碳数为1-4的羟烷基的γ-环糊精包含在所述核酸扩增试剂中。4.根据权利要求1至3任一项所述的试剂盒,其中所述具有碳数为1-4的羟烷基的γ-环糊精的浓度是所述具有甾体类骨架的表面活性剂的浓度的4倍以上。5.根据权利要求1至4任一项所述的试剂盒,其中所述核酸提取对象是微生...
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