一种细胞层多气泡触碰装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术提出了一种细胞层多气泡触碰装置，包括定制细胞培养皿和微气泡制备器，定制细胞培养皿包括皿盖、皿底和内置接种皿，内置接种皿游离倒置或正置于皿底，且内置接种皿的上缘呈垛口形；微气泡制备器包括三通管、两个注射器和注射器针头，两个注射器分别连接三通管的上端和侧端，注射器针头连接三通管的下端。微气泡制备器通过调节注射器所抽取液体和气体的比例，可制备直径在500～1000μm之间的微气泡混悬液。在注入倒置的内置接种皿后，依靠细胞培养基的溶解破碎作用，形成直径100～250μm的微气泡。通过控制向内置接种皿内注入的微气泡混悬液的剂量，可调节微气泡密度；通过及时翻转内置接种皿，控制微气泡触碰时间。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞层多气泡触碰装置
本技术涉及实验室设备
，具体涉及一种细胞层多气泡触碰装置，用于细胞水平研究气泡对血管内皮的损伤作用及机制。
技术介绍
随着我国“海洋强国”战略的开展，海上各类经济和军事活动日益频繁。减压病是潜水活动中面临的最主要的医学问题，其致病原因是体内(包括血管内)形成气泡。在临床手术和动静脉输液操作时，也可能因操作不当导致气体进入血液循环，形成气泡。深入研究血管内气泡导致机体损伤的效应、阐明制伤机制、探索有效防治措施，成为潜水医学的重点，也是临床医学研究的重要内容。血管内气泡形成后，在血管内流动时会接触并损伤内皮细胞，并继发一系列免疫炎症反应，诱发机体病理进程。目前关于血管内气泡对内皮细胞的损伤效应和机制的研究方法主要有两种，一是通过模拟潜水快速减压使动物体内自发产生气泡，该方法能够真实模拟减压病的发生，但由于动物间存在严重的个体差异，导致其体内生成的气泡数量不等，气泡大小也难以控制，且会影响气泡损伤机制的研究；二是使用注射器直接向动物血管或细胞培养皿注射气体，这种方法的优点是简单易行，可控制气体注射量，但所形成的气泡体积较大，甚至是气柱，难以精确控制气泡损伤强度，也不利于进行损伤机制的研究。当前用于非医学领域的微气泡制备装置结构复杂，加工困难，多使用油性液体，且无精确控制气泡数量的要求。尽管，本申请人前期已获批专利技术名称为“一种微气泡制备装置”(专利号ZL201420373485.4)和“一种离体血管微气泡灌流装置”(专利号ZL201420580635.9)的两项中国技术专利申请，但该微气泡制备装置的结构仍有待简化。综上所述，目前在潜水医学和临床医学研究领域尚无成熟的细胞层多气泡触碰技术。因此，如果能够设计出简单易行的微气泡制备器，按需生成大小均一、密度可控的微气泡，结合特制的细胞培养皿，搭建细胞层多气泡触碰装置，必将对系统研究血管内气泡损伤效应、深入探索其损伤机制和防治措施等产生极大的帮助。
技术实现思路
本技术的目的是为研究血管内气泡对血管内皮细胞的损伤效应和机制以及探索有效防治措施提供刺激强度可精确控制的一种细胞层多气泡触碰装置。为实现上述目的，本技术提出的细胞层多气泡触碰装置，包括：定制细胞培养皿，所述定制细胞培养皿包括皿盖、皿底和内置接种皿，所述内置接种皿游离倒置或正置于皿底，且所述内置接种皿的上缘呈垛口形；微气泡制备器，所述微气泡制备器包括三通管、两个注射器和注射器针头，两个所述注射器分别连接三通管的上端和侧端，注射器针头连接三通管的下端。优选地，在所述的细胞层多气泡触碰装置中，所述皿盖直径为30mm，高度为14mm；所述皿底直径为28mm，高度为15mm。优选地，在所述的细胞层多气泡触碰装置中，所述内置接种皿直径为10mm，高度为8mm。优选地，在所述的细胞层多气泡触碰装置中，所述内置接种皿上缘垛口形由间隔均匀分布的凸起和凹陷形成，所述注射器针头于所述凹陷处探入倒置在皿底的内置接种皿内。优选地，在所述的细胞层多气泡触碰装置中，所述注射器均选用1ml注射器。优选地，在所述的细胞层多气泡触碰装置中，所述注射器针头的规格为25G或26G。其中，25G针头外径0.51mm，内径0.26mm；26G针头外径0.45mm，内径0.23mm。与现有技术相比，本技术的有益效果：细胞层多气泡触碰装置使用无毒无害材料制成，可保证技术本身对实验对象无害；微气泡制备器结构简单，所用配件均可市购；可精确控制微气泡大小、密度和触碰时间，实现不同强度微气泡触碰。附图说明图1为细胞层多气泡触碰装置的结构示意图；图2为定制细胞培养皿的结构示意图；图3为微气泡制备器的结构示意图。图中：1-定制细胞培养皿，2-微气泡制备器，3-皿盖，4-内置接种皿，5-皿底，6-医用输液三通管，7-注射器，8-注射器，9-注射器针头。具体实施方式下面将结合示意图对本技术的细胞层多气泡触碰装置进行更详细的描述，其中表示了本技术的优选实施例，应该理解本领域技术人员可以修改在此描述的本技术，而仍然实现本技术的有利效果。因此，下列描述应当被理解为对于本领域技术人员的广泛知道，而并不作为对本技术的限制。本技术提出了一种细胞层气泡触碰装置，既能实现制备出大小均一的微气泡，又能通过定制细胞培养皿实现细胞层多气泡触碰，并通过精确控制注入的气泡液剂量实现细胞层触碰强度的控制。如图1所示，细胞层多气泡触碰装置的结构包括定制细胞培养皿1和微气泡制备器2。定制细胞培养皿1，外观与普通细胞培养皿类似，包括皿盖3、皿底5两部分。所述的皿盖3直径30mm，高度14mm；所述的皿底5直径28mm，高度15mm。同普通细胞培养皿相较，定制细胞培养皿1内部多出一个内置接种皿4；所述的内置接种皿4游离置于皿底5，既可正置，也可倒置。所述的内置接种皿4直径10mm，高度8mm，确保皿底5注满细胞培养基时，在皿底5内翻转内置接种皿4时，内置接种皿4不会超出液面；所述的内置接种皿4，上缘呈垛口形，三凸起三凹陷均匀分布，其中凹陷处用于倒置内置接种皿4时探入注射器针头9，向内置接种皿4内注射微气泡。微气泡制备器2包括医用输液三通管6(又称医用三通阀、医用三通连接管或医用三通旋塞)、两个注射器(7，8)、注射器针头9。所述的医用输液三通管6清洁无菌，为商购一次性产品；所述的注射器(7，8)清洁无菌，为商购一次性产品；所述的两个注射器(7，8)容积相同，分别连接于医用输液三通管6的上端和侧端；所述的注射器针头9，优选地规格为25G或26G(取自1ml注射器)，连接于医用输液三通管6的下端。所述的两个注射器(7，8)，分别用于抽取气体和细胞培养基。注射器(7，8)均选用1ml注射器，便于精确控制注射的微气泡混悬液剂量。注射器8抽取气体时，可根据研究对象选择不同气体，如研究减压病气泡时，可选用混合气体，研究临床气泡时，可选择空气。该细胞层多气泡触碰装置，具体使用方法如下：如图2所示，将血管内皮细胞接种于定制细胞培养皿1内的内置接种皿4上，此时内置接种皿4正置，皿底5内尚未注入细胞培养基。待细胞融合成层后，将皿底5注满细胞培养基，在液面下翻转内置接种皿4，使其倒置。如图3所示，连接好微气泡制备器，其中，注射器7内吸取0.4毫升细胞培养基，注射器8内吸取0.2毫升空气。旋转医用输液三通管6旋钮，连通两个注射器(7,8)，双手分别执注射器(7,8)，反复推吸10次后，将所有微气泡混悬液推注到连接于医用输液三通管6上端的注射器7内。旋转医用输液三通管6旋钮，连通注射器7和注射器针头9，轻轻推动注射器7，排出注射器针头9内的空气。如图1所示，将微气泡制备器2的注射器针头9从内置接种皿4上缘凹陷处探入内置接种皿4，将注射器7内的微气泡混悬液全部注入内置接种皿4。盖上皿盖3，将定制细胞培养皿1放于细胞培养箱，接触一定时间后，翻转内置接种皿4，结束微气泡触碰。在本技术中，微气泡制备器通过调节注射器所抽取液体和气体的比例，可制备直径在500～1000μm之间的微气泡混悬液。在注入倒置的内置接种皿后，依靠细胞培养基的溶解破碎作用，形成直径100～250μm的微气泡。通过控制向内置接种皿内注入的微气泡混悬液的剂量，可调节微气泡密度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞层多气泡触碰装置，其特征在于，包括：定制细胞培养皿，所述定制细胞培养皿包括皿盖、皿底和内置接种皿，所述内置接种皿游离倒置或正置于皿底，且所述内置接种皿的上缘呈垛口形；微气泡制备器，所述微气泡制备器包括三通管、两个注射器和注射器针头，两个所述注射器分别连接三通管的上端和侧端，注射器针头连接三通管的下端。

【技术特征摘要】
1.一种细胞层多气泡触碰装置，其特征在于，包括：定制细胞培养皿，所述定制细胞培养皿包括皿盖、皿底和内置接种皿，所述内置接种皿游离倒置或正置于皿底，且所述内置接种皿的上缘呈垛口形；微气泡制备器，所述微气泡制备器包括三通管、两个注射器和注射器针头，两个所述注射器分别连接三通管的上端和侧端，注射器针头连接三通管的下端。2.根据权利要求1所述的细胞层多气泡触碰装置，其特征在于，所述皿盖直径为30mm，高度为14mm；所述皿底直径为28mm，高度为15mm。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐伟刚，张坤，俞旭华，王蒙蒙，衣洪杰，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：新型
国别省市：上海,31