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检测前列腺特异性抗原的光电化学适体传感器的制备方法技术

技术编号:22386024 阅读:46 留言:0更新日期:2019-10-29 06:11
本发明专利技术公开了一种检测前列腺特异性抗原的光电化学适体传感器的制备方法。在纸基铂/氧化锌纳米片上负载大量的硫化镉量子点和一端标记有石墨烯量子点的信号转导探针,激活共敏化效应,增大光电流信号;当标记金纳米粒子的特异性识别前列腺特异性抗原的适配体与信号转导探针杂交形成三股螺旋分子开关时,抑制共敏化效应并产生金纳米粒子的信号猝灭效应,光电流信号降低;当前列腺特异性抗原识别适配体时,三股螺旋分子开关构象改变,重新活化共敏化效应和消除猝灭效应,光电流信号增强;基于转换的信号实现前列腺特异性抗原的灵敏检测。

【技术实现步骤摘要】
检测前列腺特异性抗原的光电化学适体传感器的制备方法
本专利技术涉及纸芯片技术、肿瘤标志物检测技术、光电化学分析技术及纳米材料合成
,更具体地说是一种用于高灵敏检测前列腺特异性抗原的光电化学适体传感器的制备方法。
技术介绍
灵敏的检测肿瘤标志物对癌症的诊断具有重要的意义,各种各样的分析方法已经被发展。光电化学分析方法由于其检测信号和激发源是两种完全分离的形式,其可以有效地降低背景信号,增强分析灵敏度,被广泛地用于肿瘤标志物的检测。然而,光电化学分析方法通常采用单一的信号模式,在分析过程中容易产生假阳性或假阴性的错误,因此需要发展信号转换的检测模式。传统的肿瘤标志物检测通常使用抗体作为分子识别元件,其具有一些固有的缺陷。由于抗体需要利用细胞系产生,其具有较高的成本,另外其稳定性较差不利于在恶劣的条件下储存和运输,因此,需要开发新的分子识别工具。适配体作为一种短的、化学合成的单链DNA/RNA寡核苷酸,可以识别小分子甚至蛋白质或细胞等特定的目标物。与抗体相比,适配体具有非免疫原性、易于大规模合成、易于功能化、稳定性高等优点。目标物特异性适配体序列与具有发夹结构的信号转导探针通过Hoo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测前列腺特异性抗原的光电化学适体传感器的制备方法,其特征是包括以下步骤:(1)通过计算机软件Adobe illustrator CS6设计纸芯片的疏水蜡打印图案,然后利用蜡打印机将疏水蜡打印图案打印在色谱纸上,在烘箱中150 ℃条件下加热30 s,使蜡完全融化,形成未打印蜡的亲水功能区;(2)通过丝网印刷技术,将利用计算机软件Adobe illustrator CS6设计好的碳工作电极、碳对电极和Ag/AgCl参比电极的印刷图案印刷在步骤(1)中获得的未打印蜡的亲水功能区;(3)利用原位还原法在步骤(2)中获得的碳工作电极的工作区域生长铂纳米粒子层:将30 μL新制备的含有浓度为10...

【技术特征摘要】
1.一种检测前列腺特异性抗原的光电化学适体传感器的制备方法,其特征是包括以下步骤:(1)通过计算机软件AdobeillustratorCS6设计纸芯片的疏水蜡打印图案,然后利用蜡打印机将疏水蜡打印图案打印在色谱纸上,在烘箱中150℃条件下加热30s,使蜡完全融化,形成未打印蜡的亲水功能区;(2)通过丝网印刷技术,将利用计算机软件AdobeillustratorCS6设计好的碳工作电极、碳对电极和Ag/AgCl参比电极的印刷图案印刷在步骤(1)中获得的未打印蜡的亲水功能区;(3)利用原位还原法在步骤(2)中获得的碳工作电极的工作区域生长铂纳米粒子层:将30μL新制备的含有浓度为100-300mM的氯铂酸和浓度为20-40mM的硼氢化钠的混合液滴加到工作区域,在4℃条件下反应10-30min后,用二次水洗涤,并在室温下自然干燥;(4)利用电沉积法在步骤(3)中获得的碳工作电极的工作区域沉积氧化锌纳米片:沉积电解液由浓度为0.03-0.06M的硝酸锌和浓度为0.1-0.3M的氯化钾组成,沉积温度为60-80℃,沉积电压为-1.0--1.5V,沉积时间为50-110min,沉积完成后,用二次水洗涤工作区域表面,并在室温下自然干燥;(5)合成硫化镉量子点,将200-300μL巯基乙酸加入到40-60mL浓度为0.01-0.03M的氯化镉溶液中,利用浓度为1.0M的氢氧化钠将溶液的pH调节至9-11,在100-120℃条件下加热反应30-60min,整个加热过程均在氮气氛围下进行,随后加入5-7mL浓度为0.1-0.3M的硫化钠溶液,继续在氮气氛围下加热回流3-5h,获得硫化镉量子点溶液;(6)合成石墨烯量子点:将1-3g柠檬酸置于50mL的烧杯中,在烘箱中,100-200℃条件下加热反应20-60min,待自然冷却到室温后,用浓度为2M的氢氧化钠将其溶解,并调节溶液的pH直至7.0,获得石墨烯量子点溶液;(7)标记金纳米粒子在特异性识别前列腺特异性抗原的适配体上,具体过程分为2步:第一步是合成金纳米粒子,将0.5-0.8mL浓度为0.1-0.3M的硼氢化钠加入到20-40mL浓度为200-300μM的氯金酸溶液中,获得的混合液在冰浴条件下搅拌反应10-20min后,在室温下静置3h,溶液由橙红色变为酒红色;第二步是标记金纳米粒子在特异性识别前列腺特异性抗原的适配体上,所用的适配体3′端和5′端均带有巯基,将10μL浓度为10mM的三(2-羧乙基)-...

【专利技术属性】
技术研发人员:于京华杨红梅李正林颜梅葛慎光
申请(专利权)人:济南大学
类型:发明
国别省市:山东,37

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