一种三环生物碱类化合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种三环生物碱类化合物及其制备方法与应用。所述的三环生物碱类化合物是从金丝马尾莲中分离得到，命名为5,6‑二氢‑8,9‑二甲氧基‑2‑甲基‑11H‑吡咯并[2,1‑b][3]苯并杂卓‑11‑酮，英文名为：5,6‑dihydro‑8,9‑dimethoxy‑2‑methyl‑11H‑pyrrolo[2,1‑b][3]benzazepin‑11‑one，其分子式为C16H17NO3，为棕红色胶状物，具有下述结构式：

A tricyclic alkaloid compound and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种三环生物碱类化合物及其制备方法与应用
本专利技术属于植物化学
，具体涉及一种三环生物碱类化合物及其制备方法与应用。
技术介绍
唐松草属(拉丁学名：ThalictrumL.)是毛茛科中的一属。该属植物为多年生草本，全球约有200种，广泛分布于亚洲、欧洲、非洲、北美洲和南美洲；其中中国约有67种，在全国各省区均有分布，多数分布于西南部。该属植物约有29种可供药用，一些种类均有清热、治湿、发汗、止痢、治目赤等作用。金丝马尾莲连(学名：Thalictrumglandulosissimum(Finet&Gagnep.)W.T.Wang&S.H.Wang)，为唐松草属草本植物，分布于中国云南大理鹤庆、宾川一带生海拔2500米山坡草地。金丝马尾莲连具有有清热、抗菌、降压等功效，常代替黄连使用。其根和茎为云南白族民间常用的中药材，用于肠炎，痢疾，黄疸，目赤肿痛等疾病。前期研究表明金丝马尾莲富含生物碱类活性成分，其中异喹啉生物碱是其最具特征的活性成分。为了研究金丝马尾莲中生物碱类化合物的构效关系，进一步研究和开发更多的活性生物碱类化合物，从中寻找有效的先导化合物和活性基团。本专利技术从采于云南鹤庆的金丝马尾莲中分离得到了一种新的三环生物碱类化合物，该化合物至今尚未见到相关报道，值得一提的是该化合物具有显著的抗烟草花叶病病毒活性。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种三环生物碱类化合物；第二目的在于提供所述的三环生物碱类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的三环生物碱类化合物的应用。本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的三环生物碱类化合物是从金丝马尾莲中分离得到，命名为5,6-二氢-8,9-二甲氧基-2-甲基-11H-吡咯并[2,1-b][3]苯并杂卓-11-酮，英文名为：5,6-dihydro-8,9-dimethoxy-2-methyl-11H-pyrrolo[2,1-b][3]benzazepin-11-one，其分子式为C16H17NO3，为棕红色胶状物，具有下述结构式：。本专利技术的第二目的是这样实现的，是以金丝马尾莲为原料，经浸膏提取、硅胶柱层析和高压液相色谱分离纯化步骤，具体包括：A、浸膏提取：将金丝马尾莲粉碎过筛，用95%乙醇回流提取2~3次，每次30~50min，合并提取液浓缩得到物料a，物料a中加入酒石酸溶液稀释得到物料b，物料b采用乙酸乙酯萃取1~3次，收集水相得到物料c，物料c用碳酸钠饱和，再次用乙酸乙酯萃取1~3次，合并萃取的乙酸乙酯相，减压浓缩得到浸膏d；B、硅胶柱层析：浸膏a用浸膏a重量2~8倍量的160~300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析，以体积配比为20:1~0:1的三氯甲烷-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，合并相同的部分；C、高压液相色谱分离：B步骤洗脱液的8:2部分经反相C18中压液相色谱分离纯化，所得32.2min的色谱峰对应的洗脱液，进一步经高压液相色谱分离纯化得到目标物三环生物碱类化合物。以上述方法制备的三环生物碱类化合物的结构是通过以下方法鉴定出来的：本专利技术化合物为棕红色胶状物，HRESI-MS显示其准分子离子峰为294.1112[M+Na]+，结合1H和13CNMR谱确定分子式为C16H17NO3，为生物碱类化合物，且化合物的不饱合度为9。其红外光谱显示化合物中有羰基(1652cm-1)，和芳环(1603、1568和1431cm-1)信号吸收，紫外光谱在253、326和352nm有吸收峰也证实化合物中存在芳环结构。根据1H和13CNMR信号，化合物中总共有16个碳和17个氢，根据其化学位移值的DEPT谱信号，可初步分类为1个甲基、两个亚甲基、2个甲氧基、1个羰基、4个双键次甲基、以及6个双键季碳(其中2个为氧化季碳)。结合其HSQC和HMBC相关谱，这些信号可进一步归类为1个1,2,4,5-四取代苯环(C-7~C-13，H-7和H-10),1个1,2,4-三取代的吡咯环(C-1~C-3,C-12,H-1和H-3),1个和N-连接的-CH2-CH2-片段(C-5和C-6,H2-5和H2-6)，1个羰基(C-11),1个甲基(C-15和H3-15)以及两个甲氧基(δC55.9、56.3q，δH3.79s、3.82)。进一步分析其HMBC谱(图2)：1,2,4,5-四取代苯环和通过H-7和C-8、C-9、C-13、C-14，以及H-10和C-8,C-9、C-13、C-14的HMBC相关得到证实；1,2,4-三取代的吡咯环可通过H-1和C-2、C-3、C-12，以及H-3和C-1、C-2、C-12的HMBC相关得到证实；存在-N-CH2-CH2-结构片段可通过H2-5和C-6，以及H2-6和C-5的HMBC相关得到证实。此外，化合物的不饱合度为9，除去苯环的不饱合度4、吡咯环的不饱合度3、羰基的不饱合度1，化合物中还应该有一个环以支持其不饱合度。从HMBC相关谱(图3和4)中可观测到H2-6和C-7、C-13、C-14，H-5和C-3、C-12，以及H-3和C-5的HMBC相关，可推测N-CH2-CH2-结构片段的一端和苯环相了解，另一端和吡咯环的氮相连接。根基苯环上的氢(H-10)和吡咯环上的氢(H-1)和羰基都有HMBC相关信号，这可证实该羰基一端连接到苯环上、另一端连接到和吡咯环上。这样，苯环，吡咯环、羰基、-N-CH2-CH2-结构片段形成了一个氮杂卓环，化合物的母体结构定位苯并杂卓类三环生物碱。化合物的母体结构确定后，进一步通过HMBC相关信号确定取代基团(两个甲氧基和一个甲基)的位置。根据H3-15与C-1、C-2、C-3，以及H-1和H-2与C-15的HMBC相关，可证实该甲基取代在C-2位。根据两个甲氧基氢信号(δH3.79s、3.82)分别和C-8、C-9有HMBC相关信号，可证实两个甲氧基分别取代在C-8和C-9位。至此化合物1的结构得到确认，该化合物命名为：5,6-二氢-8,9-二甲氧基-2-甲基-11H-吡咯并[2,1-b][3]苯并杂卓-11-酮(1)。化合物的红外、紫外和质谱数据：UV(CH3OH)λmax(logε)220(4.24)、253(3.68)、326(3.60),352(3.87)nm；IR(KBr)νmax3055、2928、1652、1603、1568、1431、1389、1267、1172、1138、1069、1027、953、796cm-1;1HNMR和13CNMR数据(CDCl3,125和500MHz)见表-1；正离子模式ESIMSm/z294[M+Na]+，HRESIMSm/z294.1112[M+Na]+(计算值C16H17NNaO3,294.1106)。本专利技术的第三目的是这样实现的，所述的三环生物碱类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。用半叶法进行了本专利技术化合物的抗烟草花叶病毒活性测试，结果明本化合物的相对抑制率为48.6%，超过对照宁南霉素的相对抑制率30.3%，说明化合物有很好的抗烟草花叶病毒活性。本专利技术化合物是首次被分离出来的，通过上述核磁共振和质谱测定方法确定为三环生物碱类化合物，并表征了其具体结构。活性检测结果揭示了本专利技术的化合物在制备抗烟草花叶病毒生物农药中有良好的应本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三环生物碱类化合物，其特征在于所述的三环生物碱类化合物是从金丝马尾莲中分离得到，命名为5,6‑二氢‑8,9‑二甲氧基‑2‑甲基‑11H‑吡咯并[2,1‑b][3]苯并杂卓‑11‑酮，英文名为：5,6‑dihydro‑8,9‑dimethoxy‑2‑methyl‑11

【技术特征摘要】
1.一种三环生物碱类化合物，其特征在于所述的三环生物碱类化合物是从金丝马尾莲中分离得到，命名为5,6-二氢-8,9-二甲氧基-2-甲基-11H-吡咯并[2,1-b][3]苯并杂卓-11-酮，英文名为：5,6-dihydro-8,9-dimethoxy-2-methyl-11H-pyrrolo[2,1-b][3]benzazepin-11-one，其分子式为C16H17NO3，为棕红色胶状物，具有下述结构式：。2.一种权利要求1所述的三环生物碱类化合物的制备方法，其特征在于是以金丝马尾莲为原料，经浸膏提取、硅胶柱层析和高压液相色谱分离纯化步骤，具体包括：A、浸膏提取：将金丝马尾莲粉碎过筛，用95%乙醇回流提取2~3次，每次30~50min，合并提取液浓缩得到物料a，物料a中加入酒石酸溶液稀释得到物料b，物料b采用乙酸乙酯萃取1~3次，收集水相得到物料c，物料c用碳酸钠饱和，再次用乙酸乙酯萃取1~3次，合并萃取的乙酸乙酯相，减压浓缩得到浸膏d；B、硅胶柱层析：浸膏a用浸膏a重量2~8倍量的160~300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析，以体积配比为20:1~0:1的三氯甲烷-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，合并相同的部分；C、高压液相色谱分离：B步骤洗脱液的8:2部分经反相C18中压液相色谱分离纯化，所得32.2min的色谱峰对应的洗脱液，进一步经高压液相...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔光辉，吴玉萍，师君丽，李薇，胡秋芬，杨光宇，李晶，宋春满，刘欣，黄海涛，李雪梅，
申请(专利权)人：云南省烟草农业科学研究院，云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53