一种分析农药产品中农药隐性成分的LC‑MS/MS方法，其特征在于：采用液相色谱‑串联质谱法(LC‑MS/MS)，建立一种农药产品中80种农药隐性成分的精准筛查方法。准确称取适量农药产品，采用乙腈超声提取、稀释处理，过膜后直接进样分析。本发明专利技术方法筛查的农药品种覆盖面广、针对性和实用性强，适用于多种不同剂型农药产品，能够准确定性和定量；解决了目前农药隐性成分难于定性定量的难题，可为农药质量监督抽查提供精准检测技术支持。
A LC-MS / MS method for the analysis of pesticide recessive components in pesticide products
【技术实现步骤摘要】
一种分析农药产品中农药隐性成分的LC-MS/MS方法
：本专利技术属于农业投入品安全甄别
，涉及农业投入品中80种高风险、高检出率的农药隐性成分的精准筛查方法，适用于9种剂型农药产品，能满足农药质量安全监督抽检的技术需求。
技术介绍
：近年来，随着各级政府部门监管力度的加大，农药市场产品质量不断提升，但假劣农药仍占一定比例，且造假花样不断翻新，一些农药经销商、生产企业代表甚至把添加某些隐性成分作为“卖点”，向农户宣传推荐，对农业生产和农产品质量安全造成严重威胁，必须采取有力措施严厉打击非法添加行为。农药隐性成分从狭义上讲，指的是在农药制剂中人为添加标称有效成分以外的农药，主要包括：未经登记批准和未过专利保护期的农药以及国家已经禁用的高毒农药。从近年农业部公布的农药监督抽查结果来看，农药产品质量问题主要涉及标称的有效成分未检出、有效成分含量不足及非法添加隐性成分等，其中非法添加隐性成分问题呈逐年增加趋势，并因覆盖面广，检测设备和技术水平等问题而导致实际抽检过程中难于定性定量，是农药监督执法面临的主要难题。根据中华人民共和国农业部公告中规定的在禁用和限制使用的农药，以及近年来农业部发布的农药产品质量监督抽查结果，本研究确定了80种高风险、高检出率的农药作为研究对象，采用LC-MS/MS法，建立了一种农药产品中农药隐性成分的精准筛查方法。该方法涉及农药隐性成分种类多、范围广，灵敏度高，能准确定性定量，适用于农药产品质量监管部门的日常监控。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于解决农药产品非法添加隐性成分现有检测技术水平低、难定性定量的难题，建立一种农药产品中农药隐性成分的精准筛查方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的，本专利技术所述的一种分析农药产品中农药隐性成分的LC-MS/MS方法，包括以下步骤：a、准确称取农药产品20mg于烧杯中，精确至0.1mg，加入80mL乙腈，超声30min，全部转移至100mL容量瓶，加10mL乙腈清洗烧杯，并转移至容量瓶，冷却至室温，加乙腈定容至100mL，摇匀，此溶液为a液。a液中目标物的浓度在2-200μg/mL范围内。b、用刻度吸管准确移取a液适量，用乙腈稀释5倍，此溶液为b液。b液中目标物的浓度在0.4-40μg/mL范围内。c、用刻度吸管准确移取b液适量，用乙腈稀释至约0.1μg/mL，此溶液为c液。d、吸取c液400μL，加超纯水600μL，混匀，过0.22μm有机滤膜，用LC-MS/MS进样分析。为防止漏检，若通过LC-MS/MS仍未检出时，可将浓度增大至其10倍液复检。e、准备混合标准工作溶液：用乙腈稀释配制浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1μg/mL的混合标准工作溶液。f、采用UPLC-MS/MS法对混合标准溶液和供试样品进行测定，以浓度为横坐标，以定量离子的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算供试样品中目标农药的含量。UPLC-MS/MS测定的色谱条件为：色谱柱：AcquityTMBEHRP18柱(2.1×100mm，1.7μm)；流动相：A相为乙腈，B相为0.1％甲酸(含5mmol/L乙酸铵)；梯度洗脱条件见表1。流速：0.2mL/min；进样量：5μL；柱温：40℃。表1梯度洗脱条件质谱条件为：电离模式：电喷雾离子源ESI(+,-)；毛细管电压：3.0Kv；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：500℃；脱溶剂气流量：1000L/hr；锥孔反吹气流量：7Bar；检测方式：多反应监测扫描(MRM)；80种农药的保留时间及质谱采集参数见表2。本专利技术方法建立了一种分析农药产品中80种高风险农药隐性成分的LC-MS/MS方法，具有简单、快速、能准确定性和定量等优势，灵敏度高，准确度和精密度均符合多残留分析方法的要求。与现有技术相比本专利技术方法具有以下优良效果。(1)本专利技术方法采用UPLC-MS/MS测定，灵敏度高、能准确定性和定量，能满足现行检测技术水平低、难定性定量的需求，目前尚无同类技术报道。(2)本专利技术方法筛查的农药品种覆盖面广、针对性强，均属于农业部近年来公布的高风险、高检出率农药隐性成分，能满足实际需要。(3)本专利技术方法适用于多种不同农药剂型，包括可湿性粉剂、水分散粒剂、颗粒剂、可溶性粒剂、可溶性粉剂、水剂、悬乳剂、悬浮剂、乳油。本专利技术方法的灵敏度：以信噪比为3计算方法的检测限，80种农药的检测限在0.001～0.01μg/mL之间。本专利技术方法的线性：以各组分的浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。90种目标农药在0.001～0.1μg/mL浓度范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数在0.991～0.999之间。本专利技术方法的准确度和精密度：对9种剂型农药产品进行了加标回收率试验，包括50％呋虫胺水分散粒剂、10％吡虫啉可湿性粉剂、6％毒死蜱·辛硫磷颗粒剂、40％赤霉酸可溶粒剂、0.004％芸苔素内酯水剂、42％异丙甲草胺·嗪草酮悬乳剂、25％氯虫苯甲酰胺·啶虫脒可分散油悬浮剂、620g/L莠去津-苯唑草酮悬浮剂、47.5g/L+475g/L氯氰菊酯·毒死蜱乳油，在已知含量的试样中添加一定量的目标物混合标准溶液，在上述色谱和质谱条件下进行测定，重复5次，结果表明各组分平均回收率在93％～101％之间，相对标准偏差小于6.8％，准确度和精密度均符合分析方法要求。表280种农药的保留时间、质谱采集参数、标准曲线、相关系数和灵敏度具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的说明，实施例仅为解释性的，决不意味着它以任何方式限制本专利技术的范围。实施例1以供试10％吡虫啉可湿性粉剂为样本，采用本专利技术方法进行样品前处理，采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。制备方法如下：1、仪器与试剂美国Waters超高效液相色谱-串联质谱仪I-Class/XevoTQ-S三重四极杆质谱仪；瑞士Mettler感量0.00001g电子天平；超声萃取仪；农药标准品纯度均不低于99％，购自德国Dr.E公司；乙腈、甲酸为色谱纯。2、样品前处理方法a、准确称取农药产品20mg于烧杯中，精确至0.1mg，加入80mL乙腈，超声30min，全部转移至100mL容量瓶，加10mL乙腈清洗烧杯，并转移至容量瓶，冷却至室温，加乙腈定容至100mL，摇匀，此溶液为a液。a液中吡虫啉的浓度为20μg/mL。b、用刻度吸管准确移取a液适量，用乙腈稀释5倍，此溶液为b液。b液中吡虫啉的浓度为4μg/mL。c、用刻度吸管准确移取b液适量，用乙腈稀释40倍，此溶液为c液。c液中吡虫啉的浓度为0.1μg/mL。d、吸取c液400μL，加超纯水600μL，混匀，过0.22μm有机滤膜，用LC-MS/MS进样分析。3、准备标准工作溶液用乙腈稀释配制浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1μg/mL的混合标准工作溶液。4、测定方法UPLC-MS/MS测定的色谱条件为：色谱柱：AcquityTMBEHRP18柱(2.1×100mm，1.7μm)；流动相：乙腈-0.1％甲酸(含5mmol/L乙酸铵)；梯度洗脱条件见表1。流速：0.2mL/min；进样量：5μL；柱温：40℃。质谱条件为：电离模式：电喷雾离子源ESI(+,-)；毛细管电压：3.0Kv；离子源温度：15本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种分析农药产品中农药隐性成分的LC‑MS/MS方法，其特征在于：采用液相色谱‑串联质谱法(LC‑MS/MS)，建立一种农药产品中80种农药隐性成分的精准筛查方法。准确称取适量农药产品，采用乙腈超声提取、稀释处理，针筒过滤后直接进样分析。本专利技术方法解决了目前农药隐性成分难于定性定量的难题，可为农药质量监督抽查提供精准检测技术支持。具体步骤如下：a、准确称取农药产品20mg于烧杯中，精确至0.1mg，加入80mL乙腈，超声30min，全部转移至100mL容量瓶，加10mL乙腈清洗烧杯，并转移至容量瓶，冷却至室温，加乙腈定容至100mL，摇匀，此溶液为a液。a液中目标物的浓度在2‑200μg/mL范围内。b、用刻度吸管准确移取a液适量，用乙腈稀释5倍，此溶液为b液。b液中目标物的浓度在0.4‑40μg/mL范围内。c、用刻度吸管准确移取b液适量，用乙腈稀释至约0.1μg/mL，此溶液为c液。d、吸取c液400μL，加超纯水600μL，混匀，过0.22μm有机滤膜，用LC‑MS/MS进样分析。为防止漏检，若通过LC‑MS/MS仍未检出时，可将浓度增大至其10倍液复检。e、准备标准储备溶液：分别称取各农药标准品适量，用乙腈溶解，配制浓度为200μg/mL的农药标准储备溶液。f、准备混合标准溶液：分别取适量标准储备溶液，用乙腈稀释并定容，配制浓度为10μg/mL的混合标准溶液，用乙腈稀释配制浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1μg/mL的混合标准工作溶液。g、采用LC‑MS/MS法对混合标准工作溶液和供试样品进行测定，以浓度为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，以此标准曲线来计算供试样品中目标物的含量。...
【技术特征摘要】
1.一种分析农药产品中农药隐性成分的LC-MS/MS方法，其特征在于：采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)，建立一种农药产品中80种农药隐性成分的精准筛查方法。准确称取适量农药产品，采用乙腈超声提取、稀释处理，针筒过滤后直接进样分析。本发明方法解决了目前农药隐性成分难于定性定量的难题，可为农药质量监督抽查提供精准检测技术支持。具体步骤如下：a、准确称取农药产品20mg于烧杯中，精确至0.1mg，加入80mL乙腈，超声30min，全部转移至100mL容量瓶，加10mL乙腈清洗烧杯，并转移至容量瓶，冷却至室温，加乙腈定容至100mL，摇匀，此溶液为a液。a液中目标物的浓度在2-200μg/mL范围内。b、用刻度吸管准确移取a液适量，用乙腈稀释5倍，此溶液为b液。b液中目标物的浓度在0.4-40μg/mL范围内。c、用刻度吸管准确移取b液适量，用乙腈稀释至约0.1μg/mL，此溶液为c液。d、吸取c液400μL，加超纯水600μL，混匀，过0.22μm有机滤膜，用LC-MS/MS进样分析。为防止漏检，若通过LC-MS/MS仍未检出时，可将浓度增大至其10倍液复检。e、准备标准储备溶液：分别称取各农药标准品适量，用乙腈溶解，配制浓度为200μg/mL的农药标准储备溶液。f、准备混合标准溶液：分别取适量标准储备溶液，用乙腈稀释并定容，配制浓度为10μg/mL的混合标准溶液，用乙腈稀释配制浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1μg/mL的混合标准工作溶液。g、采用LC-MS/MS法对混合标准工作溶液和供试样品进行测定，以浓度为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，以此标准曲线来计算供试样品中目标物的含量。2.权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：李娜，张玉婷，李辉，刘磊，邵辉，卢娜，李晋津，张宇娇，郭永泽，
申请(专利权)人：天津市农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津,12
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