一种快速检测扁桃酸含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测扁桃酸含量的方法，向待测样品中先加入十二烷基硫酸钠(SDS)溶液，接着加入三氯化铁溶液，震荡混匀，再加入铁氰化钾溶液，充分显色后，用紫外分光光度计测定710nm处的吸光度值，根据吸光度值的大小计算出扁桃酸浓度，测定得到相对标准偏差和回收率分别为0.36％～0.62％和96.51％～99.69％。此方法操作简单、快速、安全、廉价、精确，在扁桃酸含量的检测中有一定的应用价值，同时，也是一种以扁桃腈、4‑羟基扁桃腈与2‑氯扁桃腈为底物的腈水解酶活性的高通量筛选方法。

A Method for Rapid Detection of Mandelic Acid Content

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测扁桃酸含量的方法(一)
本专利技术属于生物化学分析领域，涉及一种扁桃酸，具体来说是一种快速检测扁桃酸及其衍生物含量的方法，同时也是一种以扁桃腈、4-羟基扁桃腈与2-氯扁桃腈为底物的腈水解酶活性的高通量筛选方法。(二)
技术介绍
扁桃酸又称苦杏仁酸，作为重要的医药中间体，可用于合成头孢菌素、抗肿瘤剂、抗肥胖剂等，其本身也是一种重要的手性拆分剂。扁桃酸最早在桃树叶、柳树叶中提取，与水杨酸有相同来源，扁桃酸具有显著的镇痛作用。目前，有关检测扁桃酸的方法已有报道，包括高效液相色谱法(食品工业,2019,40(03):306-310.)、气相色谱法(理化检验(化学分册),2017,53(11):1313-1317.)、反向离子色谱法(福州大学学报(自然科学版),2010,38(02):286-289.)等，但这些方法操作复杂、耗时较长，不适用于扁桃酸的快速检测。He等人在高氯酸羟胺和二环己基碳二亚胺(DCC)存在的条件下，用高氯酸铁作为显色剂，测定了有机酸的含量，其制备过程繁琐，安全性低、且高氯酸羟胺价格昂贵(ApplMicrobiolBiotechnol.2011.89(3)，817-823.)。徐毅等人报道了一种用羟肟酸铁比色法快速检测腈水解酶活性的方法，向腈水解酶反应样品中加入盐酸羟胺和DCC的乙醇溶液，震荡混匀，水浴加热后加入三氯化铁的乙醇溶液，充分显色后，用紫外分光光度计测定520nm处的吸光度值,从而测定有机酸的含量，其制备过程中涉及到对皮肤有刺激性且剧毒的盐酸羟胺(CN105548054A，2015)。(三)
技术实现思路
针对现有上述技术上的问题，本专利技术提供了一种快速检测扁桃酸含量的方法，所述的这种方法避免了现有技术中检测仪器昂贵、检测方法复杂、检测要求高等技术问题，提供了一种操作简单，精密度高、用途广泛、选择性好、使用方便的检测方法。本专利技术提供了一种快速检测扁桃酸含量的方法，向待测样品中加入十二烷基硫酸钠(SDS)溶液，接着加入三氯化铁溶液，震荡混匀，再加入铁氰化钾溶液，充分显色后，用紫外分光光度计测定710nm处的吸光度值，据吸光度值的大小计算扁桃酸的含量。进一步的，所述的酸类化合物为扁桃酸、4-羟基扁桃酸与2-氯扁桃酸，结构式如下所示：本专利技术提供了上述的一种快速检测扁桃酸及其衍生物含量的方法，包括如下步骤：取1mL6.57mM扁桃酸标准液25mL容量瓶中，加入4mL蒸馏水，再加入2.0mLSDS溶液，所述的SDS溶液的浓度为0-8mM，接着加入1.0mL三氯化铁溶液，所述的三氯化铁溶液浓度为0.01-0.07M，再加入1.0mL铁氰化钾溶液，所述的铁氰化钾溶液浓度为0.5-3.5mM，加入盐酸溶液定容，所述的盐酸溶液浓度为0-0.14M，恒温反应，温度范围为0-60℃，显色反应，反应时间范围为5-60min，用紫外分光光度计测定710nm处的吸光值，根据吸光值的大小计算扁桃酸的含量。进一步的，所述的SDS溶液的浓度为1mM。进一步的，所述的三氯化铁溶液的浓度为0.06M。进一步的，所述的铁氰化钾溶液的浓度为2mM。进一步的，所述的盐酸溶液的浓度为0.02M。进一步的，所述的反应温度为10℃。进一步的，所述的反应时间为35min。本专利技术是一种利用普鲁士蓝比色法快速检测扁桃酸含量的方法，扁桃酸先将三氯化铁溶液中的三价铁离子还原成二价铁离子，二价铁离子与铁氰化钾充分反应生成体系均一的普鲁士蓝络合物，用紫外分光光度计测定710nm处的吸光度值，根据吸光度值的大小计算扁桃酸的含量。测定得到相对标准偏差(RSD)和回收率分别是0.36％-0.62％和96.51％-99.69％，说明此方法操作简单、快速、安全、廉价、精确。本专利技术与已有技术相比，其技术的进步是显著的，所需的设备简单、操作简单，原料来源都已商品化，价格低廉，安全性高，在扁桃酸含量的快速检测中有巨大的应用潜力，也是一种以扁桃腈、4-羟基扁桃腈与2-氯扁桃腈为底物的腈水解酶活性的高通量筛选方法。(四)附图说明图1为普鲁士蓝比色法测定扁桃酸反应机理图图2为普鲁士蓝比色法测定不同浓度扁桃酸的全波长扫描图图3为普鲁士蓝比色法中扁桃酸浓度吸光度曲线图图4为普鲁士蓝比色法中扁桃酸标准曲线图图5为普鲁士蓝法测定扁桃酸的稳定性图(五)具体实施方式下面结合具体实例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：实施例1普鲁士蓝比色法测定不同浓度扁桃酸分别取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL0.0657M扁桃酸标准液于6个25mL容量瓶中，分别加入5、4.5、4、3.5、3、2.5mL蒸馏水，再依次加入10mMSDS溶液2.0mL、0.03M三氯化铁溶液1.0mL、0.02M铁氰化钾溶液1.0mL，加入0.1M盐酸溶液定容，反应20min，进行全波长扫描。如图2所示，在普鲁士蓝法中，反应体系的吸收光谱有显著性差异，反应体系的吸光度随着扁桃酸浓度的增加而升高，吸收光谱在710nm处出现最大吸收峰，与普鲁士蓝的吸收光谱特征相吻合，说明反应成功进行，证明了普鲁士蓝法测定扁桃酸含量的可行性。实施例2三氯化铁浓度优化分别取扁桃酸样品溶液5mL加入7个25mL容量瓶中，分别加入10mMSDS溶液2mL，分别加入0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07M三氯化铁溶液1mL，依次加入0.02MK3Fe[Fe(CN)6]溶液1mL，最后加入0.1M盐酸溶液定容。反应20min之后，用紫外分光光度计在710nm处测吸光度。结果如表1所示，随着FeCl3浓度的增加，吸光度随之增加，当三氯化铁浓度增加至0.06M时，吸光值趋于稳定，因此，三氯化铁溶液的最佳浓度为0.06M。表1三氯化铁浓度对吸光度值的影响三氯化铁浓度(M)0.010.020.030.040.050.060.07OD7100.0840.22510.30830.36040.39710.44070.4444实施例3铁氰化钾浓度优化分别取5mL样品溶液加入7个25mL容量瓶中，依次加入10mMSDS溶液2mL、0.06M三氯化铁溶液1mL，分别加入0.0005、0.001、0.0015、0.002、0.0025、0.003、0.0035M铁氰化钾溶液1mL，接着加入0.1M盐酸溶液定容。反应20min后，用紫外分光光度计在710nm测吸光度。结果如表2所示，随着K3Fe[Fe(CN)6]浓度的增加，吸光度呈先升高再降低趋势，在铁氰化钾浓度为0.002M时达到最高值，因此，铁氰化钾的最佳浓度为0.002M。表2铁氰化钾浓度对吸光度值的影响铁氰化钾浓度(mM)5101520253035OD7100.22530.27560.31370.39080.33560.25930.2519实施例4盐酸浓度优化分别取5mL样品溶液加入9个25mL容量瓶中，依次加入10mMSDS溶液2mL、0.06M三氯化铁溶液1mL、0.002M铁氰化钾溶液1mL，分别加入0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1、0.12、0.14M盐酸溶液定容。反应20min后，用紫外分光光度计在710nm测吸光度。结果如表3所示，随着HCl浓度的增加，吸光度先增加后降低，HCl溶液的浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测扁桃酸含量的方法，其特征在于：向含有扁桃酸的样品中加入十二烷基硫酸钠(SDS)溶液，接着加入三氯化铁溶液，震荡混匀，再加入铁氰化钾溶液，待充分反应后，用紫外分光光度计测定710nm处的吸光度值，根据吸光度值的大小计算出扁桃酸浓度。

【技术特征摘要】
1.一种快速检测扁桃酸含量的方法，其特征在于：向含有扁桃酸的样品中加入十二烷基硫酸钠(SDS)溶液，接着加入三氯化铁溶液，震荡混匀，再加入铁氰化钾溶液，待充分反应后，用紫外分光光度计测定710nm处的吸光度值，根据吸光度值的大小计算出扁桃酸浓度。2.如权利要求1所述的一种快速检测扁桃酸含量的方法，其特征在于：所述的酸类化合物为扁桃酸、4-羟基扁桃酸与2-氯扁桃酸。3.如权利要求1所述的一种快速检测扁桃酸含量的方法其特征在于包括如下步骤：取1mL6.57mM扁桃酸标准液25mL容量瓶中，加入4mL蒸馏水，再加入2.0mL十二烷基硫酸钠溶液，所述的SDS浓度为0-8mM，再加入1.0mL三氯化铁溶液，所述的三氯化铁溶液浓度为0.01-0.07M，再加入1.0mL铁氰化钾溶液，所述的铁氰化钾溶液浓度为0.5-3.5mM，加入盐酸溶液定容，所述的盐酸溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张新红，王储炎，赵海华，徐涛，
申请(专利权)人：合肥学院，
类型：发明
国别省市：安徽,34