与青光眼发生发展相关的生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了与青光眼发生发展相关的生物标志物及其应用。本发明专利技术首次发现了SPATA33和WDR61在青光眼患者中表达上调，基于此，本发明专利技术公开了SPATA33或WDR61在制备诊断青光眼的产品中的应用，以及包含检测SPATA33或WDR61表达水平的试剂的诊断青光眼的产品。

Biomarkers associated with the development of glaucoma and their applications

【技术实现步骤摘要】
与青光眼发生发展相关的生物标志物及其应用
本专利技术涉及生物医学领域，涉及一种与青光眼发生发展相关的生物标志物及其应用，所述生物标志物为SPATA33或WDR61。
技术介绍
青光眼是一组以特征性视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病，病理性眼压升高是其主要危险因素。是现今世界第二大的致盲性眼病，位居不可逆盲目的第一位。据统计，2013年全球有6.43亿人患有青光眼，到2020年大约有7.60亿人将患有青光眼，2040年青光眼患病人数将上升至11.18亿人(ThamYC,LiX,WongTY,QuigleyHA,AungT,ChengCY.Globalprevalenceofglaucomaandprojectionsofglaucomaburdenthrough2040:asystematicreviewandmeta-analysis[J].Ophthalmology2014；121:2081-2090.)。青光眼以高发病率及高致盲率，严重威胁人类的生活质量。临床上通常将青光眼分为原发性青光眼、继发性青光眼、儿童(发育)性青光眼三种类型。各类型青光眼的发病机制目前不完全清楚。目前大多数学者认为青光眼眼底视神经损害很大程度上与病理性眼压升高相关，眼压升高后可机械性压迫视神经纤维，或使视网膜血管缺血缺氧，最终导致视网膜神经节细胞的凋亡。青光眼的发病和遗传方式很复杂，可能是多种基因之间的相互作用及基因与环境的相互作用共同引起。青光眼可能与家族史、特征性结构、年龄、种族、环境、遗传等危险因素有关，其中遗传因素在其中占据重要地位。目前临床明确诊断青光眼，青光眼的病程已不在早期，青光眼是不可逆的致盲病，所以早期诊断、早期治疗具有重大意义。随着基因研究技术的发展，发现越来越多的青光眼相关致病基因、位点及相关基因突变，对于进一步明确青光眼的分子发病机制，对人群实行早期基因干预，高危人群筛查，临床前诊断及基因治疗，提高青光眼患者生活质量，甚至根治青光眼具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术基于遗传因素在青光眼的发生发展中的作用，研究与青光眼发生发展相关的生物标志物，从而为青光眼的诊断和治疗提供新的手段。本专利技术提供了检测生物标志物的试剂在制备诊断青光眼的产品中的应用，所述生物标志物选自SPATA33或WDR61。进一步，与正常人相比，当SPATA33或WDR61在受试者样本中的表达水平上调时，则受试者患有青光眼或者存在患有青光眼的风险。其中样本包括但不限于组织或流体，如组织、血液、血浆、血清、淋巴液、尿液、浆膜腔液、脊髓液、滑液、房水、泪液、唾液、或其组分或经过处理的材料。进一步，所述样本为组织，更进一步地，所述组织为小梁网组织。进一步，所述试剂包括：特异性识别SPATA33或WDR61基因的探针；特异性扩增SPATA33或WDR61基因的引物；或特异性结合SPATA33或WDR61编码的蛋白的结合剂。进一步，所述特异性扩增SPATA33或WDR61基因的引物序列对分别如SEQIDNO.1～2和SEQIDNO.3～4所示。本专利技术提供了一种诊断青光眼的产品，所述产品包括检测SPATA33或WDR61水平的试剂。进一步，所述产品包括核酸膜条、芯片或试剂盒。进一步，核酸膜条包括基底和固定于所述基底上的特异性识别SPATA33或WDR61的寡核苷酸探针；所述基底可以是任何适于固定寡核苷酸探针的基底，例如尼龙膜、硝酸纤维素膜、聚丙烯膜、玻璃片、硅胶晶片、微缩磁珠等。进一步，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片，其中基因芯片包括针对SPATA33或WDR61的引物或寡核苷酸探针，蛋白质芯片包括特异性结合SPATA33或WDR61蛋白的结合剂。其中，特异性结合剂是例如蛋白质SPATA33或WDR61的受体、结合蛋白质SPATA33或WDR61的凝集素、针对蛋白质SPATA33或WDR61的抗体、针对蛋白质SPATA33或WDR61的肽抗体(peptidebody)、双特异性双重结合剂或双特异性抗体形式。特异性结合剂的例子是肽、肽模拟物、aptamer、spiegelmer、darpin、锚蛋白重复蛋白、Kunitz型域、抗体、单域抗体和单价抗体片段。在本专利技术的具体实施例中，所述特异性结合剂为SPATA33或WDR61特异性抗体。进一步，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白检测试剂盒，所述基因检测试剂盒包括特异性针对SPATA33或WDR61的引物、寡核苷酸探针或芯片；所述蛋白检测试剂盒包括特异性结合SPATA33或WDR61蛋白的结合剂。试剂盒包括一种或多种无菌容器，这样的容器可以是盒、安瓿、瓶子、管形瓶、管、袋、小袋、泡罩包装、或本领域已知的其它合适的容器形式。这样的容器可以由塑料、玻璃、层压纸、金属箔、或适于容器药物的其它材料。进一步，特异性针对SPATA33或WDR61的引物序列如SEQIDNO.1～4所示。本专利技术提供了一种诊断青光眼的方法，包括步骤：1)获取样本；2)提取样本中的RNA；3)检测RNA中的SPATA33或WDR61的表达水平；4)比较判断，与正常人相比，当SPATA33或WDR61的表达水平显著升高时，则受试者患有青光眼。本专利技术提供了SPATA33或WDR61在制备治疗青光眼的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括SPATA33或WDR61的抑制剂。其中，所述抑制剂可以在转录或翻译水平降低SPATA33或WDR61的表达。在本专利技术中，SPATA33(基因ID：124045)包括人SPATA33基因及其所编码的蛋白。作为非限制性的实例，SPATA33的基因序列如NM_001271907.1、NM_001271908.1、NM_001271909.1、NM_001271910.1、NM_153025.2任一转录本所示，相应的氨基酸序列如NP_001258836.1、NP_001258837.1、NP_001258838.1、NP_001258839.1、NP_694570.1所示。其中，一种代表性的SPATA33的基因序列如NM_001271907.1所示，相对应的氨基酸序列如NP_001258836.1所示。WDR61(基因ID：80349)包括人WDR61基因及其所编码的蛋白。作为非限制性的实例，WDR61的基因序列如NM_001303247.2、NM_001303248.2、NM_025234.3任一转录本所示，其相应的氨基酸序列如NP_001290176.1、NP_001290177.1、NP_079510.1所示。在本申请中，一种代表性的WDR61的基因序列如NM_001134870.2所示，氨基酸序列如NP_001290176.1所示。本领域技术人员应当理解，测定基因表达的手段不是本专利技术的重要方面。本专利技术可以利用本领域内已知的任何方法测定基因的表达水平。本专利技术的SPATA33或WDR61使用本领域普通技术人员已知的多种核酸以及蛋白技术进行检测，这些技术包括但不限于：核酸测序、核酸杂交、核酸扩增技术、蛋白免疫技术。本专利技术中诊断青光眼的产品可用于检测包括SPATA33或WDR61基因在内的多个基因(例如，与青光眼相关的多个基因)的表达水平，将青光眼的多个标志物同时进行检测，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测生物标志物的试剂在制备诊断青光眼的产品中的应用，其特征在于，生物标志物选自SPATA33或WDR61。

【技术特征摘要】
1.检测生物标志物的试剂在制备诊断青光眼的产品中的应用，其特征在于，生物标志物选自SPATA33或WDR61。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，与正常人相比，当SPATA33或WDR61在受试者样本中的表达水平上调时，则受试者患有青光眼。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述样本为组织。4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述试剂包括：特异性识别SPATA33或WDR61基因的寡核苷酸探针；特异性扩增SPATA33或WDR61基因的引物；或特异性结合SPATA33或WDR61编码的蛋白的结合剂。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述特异性扩增SPATA33或WDR61基因的引物序列分别如SEQIDNO.1～2和SEQIDNO.3～4所示。6.一种诊断青光眼的产品，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：高鸽，
申请(专利权)人：汶上县中医院，
类型：发明
国别省市：山东,37