一种IL-2突变体与抗体的融合蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种IL‑2突变体与抗体的融合蛋白及其应用，所述融合蛋白是由IL‑2突变体(sumIL‑2)与肿瘤治疗抗体构成的异源三聚体蛋白，其结构与抗体类似，结构示意图如图2A所示，所述的异源三聚体的三个单体分别为：(1)单体一：IL‑2突变体(sumIL‑2)与免疫球蛋白Fc片段融合而成的融合蛋白，自N端至C端顺序包含sumIL‑2和免疫球蛋白Fc区；(2)单体二：单条所述肿瘤治疗抗体的重链，自N端至C端顺序包含所述抗体的重链可变区VH、重链CH区和免疫球蛋白Fc区，单体二包含的免疫球蛋白Fc区可以与单体一的免疫球蛋白Fc片段配对形成异二聚体；(3)单体三：单条所述肿瘤治疗抗体的轻链(包括VL和CL区)，单体三包含的CL区能够与单体二的CH配对形成半抗体结构的异二聚体；所述肿瘤治疗抗体为靶向肿瘤细胞表面高表达膜蛋白的抗体。

A fusion protein of IL-2 mutant and antibody and its application

【技术实现步骤摘要】
一种IL-2突变体与抗体的融合蛋白及其应用
本专利技术属于生物技术和抗体工程
，具体而言，涉及一种IL-2突变体与抗体的融合蛋白及其应用。
技术介绍
白细胞介素-2(IL-2)是一种由抗原刺激诱导的T细胞生长因子，是一种多效细胞因子，在免疫应答中起着关键作用1,2。作为细胞毒性T细胞和NK细胞的有效诱导剂，IL-2是FDA批准的首批用于转移性黑色素瘤和肾细胞癌的免疫治疗药物之一3,4。遗憾的是，由于体内半衰期短，治疗剂量和严重毒性5等问题，IL-2免疫治疗尚未得到广泛应用。IL2通过与IL-2受体α(IL-2Ra)结合诱导调节性T细胞(Tregs)的增殖，IL-2受体α优先在Tregs上表达6,7,8,9,10。已经显示Treg细胞对IL-2的消耗降低IL-2诱导的抗肿瘤免疫力，提示Treg可能是IL-2介导的CTL扩增的主要障碍11。IL-2通过与各种IL-2受体(IL-2R)结合发挥刺激和调节功能，包括单体，二聚体和三聚体IL-2R。一些T细胞，例如Tregs，表达由CD25(IL2Ra)，CD122(IL2Rb)和CD132(常见细胞因子受体g链)亚基组成的高亲和力异源三本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肿瘤靶向融合蛋白Ab‑sumIL2，所述融合蛋白是由IL‑2突变体(sumIL‑2)与肿瘤治疗抗体构成的异源三聚体蛋白，其结构与抗体类似，结构示意图如图2A所示，所述的异源三聚体的三个单体分别为：(1)单体一：IL‑2突变体(sumIL‑2)与免疫球蛋白Fc片段融合而成的融合蛋白，自N端至C端顺序包含sumIL‑2和免疫球蛋白Fc区；(2)单体二：单条所述肿瘤治疗抗体的重链，自N端至C端顺序包含所述抗体的重链可变区VH、重链CH区和免疫球蛋白Fc区，单体二包含的免疫球蛋白Fc区可以与单体一的免疫球蛋白Fc片段配对形成异二聚体；(3)单体三：单条所述肿瘤治疗抗体的轻链(包括VL和CL区)...

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤靶向融合蛋白Ab-sumIL2，所述融合蛋白是由IL-2突变体(sumIL-2)与肿瘤治疗抗体构成的异源三聚体蛋白，其结构与抗体类似，结构示意图如图2A所示，所述的异源三聚体的三个单体分别为：(1)单体一：IL-2突变体(sumIL-2)与免疫球蛋白Fc片段融合而成的融合蛋白，自N端至C端顺序包含sumIL-2和免疫球蛋白Fc区；(2)单体二：单条所述肿瘤治疗抗体的重链，自N端至C端顺序包含所述抗体的重链可变区VH、重链CH区和免疫球蛋白Fc区，单体二包含的免疫球蛋白Fc区可以与单体一的免疫球蛋白Fc片段配对形成异二聚体；(3)单体三：单条所述肿瘤治疗抗体的轻链(包括VL和CL区)，单体三包含的CL区能够与单体二的CH配对形成半抗体结构的异二聚体；所述肿瘤治疗抗体为靶向肿瘤细胞表面高表达膜蛋白的抗体。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述肿瘤细胞表面高表达的膜蛋白为EGFR、Her2、CD47或PD-L1；所述靶向肿瘤细胞表面高表达膜蛋白的抗体分别为EGFR抗体、Her2抗体、CD47抗体或PD-L1抗体，其与所述IL-2突变体(sumIL-2)组成的Ab-sumIL2分别为Erb-sumIL2、anti-Her2-sumIL2、anti-CD47-sumIL2或anti-PD-L1-sumIL2。3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述的IL-2突变体(sumIL-2)的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，所述抗EGFR、Her2、CD47、PD-L1抗体的单条重链的氨基酸序列分别为：抗EGFR抗体的单条重链的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；抗Her2抗体的单条重链的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示；抗CD47抗体的单条重链的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示；抗PD-L1抗体的单条重链的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示；所述抗EGFR、Her2、CD47、PD-L1抗体的轻链的氨基酸序列分别为：抗EGFR抗体的轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示；抗Her2抗体的轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示；抗CD47抗体的轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.8所示；抗PD-L1抗体的轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.9所示。4.根据权利要求1-3任一所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白Fc区可选自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的恒定区氨基酸序列；优选的，所述免疫球蛋白Fc区的氨基酸序列如SEQIDNO.10所示，更优选的，所述免疫球蛋白Fc区选用Knobandhole体系的Fc结构，其具体的氨基酸序列分别如SEQIDNO.11或SEQIDNO.12所示。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：彭华，孙志辰，其他发明人请求不公开姓名，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11