一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法，包括PVC底板，所述PVC底板的顶部从左到右依次设置有样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫，且硝酸纤维素膜检测垫的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线、钙卫蛋白检测线和质控线，所述胶体金标记垫的左侧位于样品垫的内侧。本发明专利技术可以全面反应肠道炎症情况，用于区分炎症性肠病和肠易激综合征的辅助鉴别和诊断、肠道肿瘤、息肉等器质性病变的早期筛查，急性细菌性腹泻与非细菌性腹泻的鉴别，同时可以指导用药，避免抗生素滥用，同时其检测工艺简单、重复性好、成品结构稳定、使用性能佳，可以部分代替目前有创的检测手段，临床实用性强。

A combined detection reagent of fecal calyguard protein or lactoferrin and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法
本专利技术涉及医疗检测
，具体为一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法。
技术介绍
钙卫蛋白是一种分子量为36kDa与钙锌结合的异二聚体蛋白，相关的研究日益增多，目前认为钙卫蛋白的功能主要涉及免疫调节、诱导细胞凋亡、抑制细菌生长等，而钙卫蛋白与肿瘤关系的研究也逐渐成为热点；乳铁蛋白属于铁蛋白家族，它是一种分泌性的糖蛋白，分子量为80kDa，乳铁蛋白具有参与铁代谢、抗菌、抗病毒、免疫调节和抗炎、抗肿瘤等多种生物学功能，近年来发现乳铁蛋白具有明显的抗肿瘤作用。由于钙卫蛋白、乳铁蛋白在粪便中极其稳定，因而远优于以往的粪便标志物，特别是与肿瘤的粪便DNA检测比较，标本无须冷冻保存，在临床应用极为方便，采用胶体金法检测粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白，也比酶联免疫法检测更为方便快捷，无需仪器，5-10min即可判读结果(而不是长达2-3h)，标本也不需要集中检测。现有的研究表明，钙卫蛋白、乳铁蛋白均参与炎性反应及肿瘤免疫，具有广泛的生物学活性，而在肠道肿瘤、溃疡等器质性病变的发生过程中，常常有出血以及大量炎性细胞浸润，因而，患者粪便中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，包括PVC底板(1)，其特征在于：所述PVC底板(1)的顶部从左到右依次设置有样品垫(2)、胶体金标记垫(3)、硝酸纤维素膜检测垫(4)和吸水垫(6)，且硝酸纤维素膜检测垫(4)的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线(8)、钙卫蛋白检测线(7)和质控线(5)，所述胶体金标记垫(3)的左侧位于样品垫(2)的内侧，且硝酸纤维素膜检测垫(4)的左侧位于胶体金标记垫(3)的内侧，硝酸纤维素膜检测垫(4)的右侧位于吸水垫(6)的内侧。

【技术特征摘要】
1.一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，包括PVC底板(1)，其特征在于：所述PVC底板(1)的顶部从左到右依次设置有样品垫(2)、胶体金标记垫(3)、硝酸纤维素膜检测垫(4)和吸水垫(6)，且硝酸纤维素膜检测垫(4)的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线(8)、钙卫蛋白检测线(7)和质控线(5)，所述胶体金标记垫(3)的左侧位于样品垫(2)的内侧，且硝酸纤维素膜检测垫(4)的左侧位于胶体金标记垫(3)的内侧，硝酸纤维素膜检测垫(4)的右侧位于吸水垫(6)的内侧。2.根据权利要求1所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，其特征在于：所述胶体金标记垫(3)的材质为聚酯膜，样品垫(2)材质为聚酯膜或玻璃纤维素膜。3.一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：A、制备样品垫(2)：将样品垫(2)置于处理液中浸泡，然后将含有处理液的样品垫(2)置于温度为18-24℃、相对湿度小于40％的环境中烘干16-24h，备用；B、制备胶体金标记垫(3)：胶体金溶液、抗体标记及胶体金标记垫(3)制备；C、制备硝酸纤维素膜检测垫(4)：①、按照配方要求配置好包被用的鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体的抗体溶液，且最终抗体溶液浓度为1.0-1.2mg/ml；②取硝酸纤维素膜(规格宽度25mm)，按照距离间隔一次性划出乳铁蛋白检测线(8)、钙卫蛋白检测线(7)和质控线(5)，划膜时，抗体溶液的消耗量设定为1.0-1.2ul/cm，乳铁蛋白检测线(8)包被有鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4，钙卫蛋白检测线(7)包被有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1，质控线(5)包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体；D、贴板及切割：将样品垫(2)、胶体金标记垫(3)、硝酸纤维素膜检测垫(4)和吸水垫(6)顺序搭接PVC底板(1)上，并按照规格要求切割成宽度3.3mm(条型)和4mm(卡型)。4.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤A中，处理液为样品垫处理液，且处理液由0.5％吐温-20、1％BSA的pH为8.0的1mol/L磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液组成。5.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，胶体金溶液的制备方法(以制备1000ml为例)包括以下步骤：①、用量筒量取980mL工艺用水到烧瓶中；②、加入制备量1％氯化金溶液，边搅拌边加热至沸腾；③、在搅拌过程中，迅速加入制备量1％柠檬酸三钠溶液；④、颜色变成橙红色后，继续煮沸15min；⑤、关闭搅拌器，让胶体金溶液自然冷却，用工艺用水将胶体金溶液定容至1000mL。6.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，抗体标记及胶体金标记垫(3)的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭勇华，刘现杰，
申请(专利权)人：珠海市医友生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44