【技术实现步骤摘要】
一种基于羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器及使用方法
本专利技术属于免疫检测和分析
，具体涉及一种基于羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器及使用方法。
技术介绍
蛋白质作为生物活动的功能载体，在生物体内发挥着无比重要的作用。人类绝大多数疾病的发生都会引起体内蛋白质的异常，因此蛋白质的表达可以作为细胞生理和病理状态的有效指示。传统的蛋白质免疫学检测方法有酶联免疫技术(ELISA)、放射免疫技术、荧光免疫技术以及胶体金免疫技术。以上这些方法要么检测时间长、仪器昂贵，要么灵敏度有限。因此开发出一种简单快速、灵敏且低成本的蛋白质检测方法显得尤为必要；现有技术通过纳米金标记获得较好的信号效果，但需要进一步改进。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有纳米金标记制备的试纸条生物传感器灵敏度有待进一步提高的问题，提供了一种基于羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器及使用方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种基于羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器，其制备方法包括以下内容：（1）羧基修饰多壁碳纳米管预处理：将20mg羧基修饰多壁碳纳米管加入4....
【技术保护点】
1.一种基于羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器，其特征在于，其制备方法包括以下内容：（1）羧基修饰多壁碳纳米管预处理：将羧基修饰多壁碳纳米管加入浓硫酸与浓硝酸的混合液中，在超声条件下处理6小时，然后在10000转/分钟的条件下离心10分钟，然后用超纯水洗涤3次后溶于超纯水，得到羧基修饰多壁碳纳米管溶液，备用；所述浓硫酸与浓硝酸的混合液由浓硫酸与浓硝酸以体积比3:1混合得到；（2）羧基修饰多壁碳纳米管标记抗体的制备（2.1）取EDC和sulfo‑NHS溶于MES缓冲液中，然后加入步骤（1）所得羧基修饰多壁碳纳米管溶液，使羧基修饰多壁碳纳米管的最终浓度为0.5mg/ml...
【技术特征摘要】
1.一种基于羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器，其特征在于，其制备方法包括以下内容：（1）羧基修饰多壁碳纳米管预处理：将羧基修饰多壁碳纳米管加入浓硫酸与浓硝酸的混合液中，在超声条件下处理6小时，然后在10000转/分钟的条件下离心10分钟，然后用超纯水洗涤3次后溶于超纯水，得到羧基修饰多壁碳纳米管溶液，备用；所述浓硫酸与浓硝酸的混合液由浓硫酸与浓硝酸以体积比3:1混合得到；（2）羧基修饰多壁碳纳米管标记抗体的制备（2.1）取EDC和sulfo-NHS溶于MES缓冲液中，然后加入步骤（1）所得羧基修饰多壁碳纳米管溶液，使羧基修饰多壁碳纳米管的最终浓度为0.5mg/ml；（2.2）在室温下反应15分钟，然后在10000转/分钟的条件下离心10分钟，弃去上清液，用PBS缓冲液重复洗涤2次，最后溶于PBS缓冲液中，超声3-5秒使分散均匀；（2.3）加入羊抗兔抗体，在室温条件下反应过夜，然后在5000转/分钟的条件下离心5分钟，弃去上清液，加入PBS缓冲液，在10000转/分钟的条件下离心10分钟，重复洗涤2次，去掉未结合的羊抗兔抗体，得到羧基修饰多壁碳纳米管标记抗体，溶于Eluent缓冲液中，置于4℃下保存备用；（3）羧基修饰多壁碳纳米管标记的试纸条生物传感器的制备：所述试纸条生物传感器包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫和固定底板；（3.1）所述样品垫的材质为纤维素纤维膜，样品垫在使用前用samplepad缓冲液浸泡30分钟，然后在37℃的干燥箱中干燥4h，然后在干燥器中保存备用；所述samplepad缓冲液按重量百分比计包括以下溶质：0.05MTris-HCl、0.15mMNaCl、0.25%TritonX-100和2.5%Tween-20；（3.2）所述结合垫上喷有一定量的羧基修饰多壁碳纳米管标记抗体，室温干燥；（3.3）用多克隆羊抗兔IgG喷在硝酸纤维素膜上得到检测线，用小鼠抗羊IgG喷在硝酸纤维素膜上形成控制线，在室温下干燥后，置于4℃的条件下保存备用；（3.4）将步骤（3.3）处理后的硝酸纤维素膜粘贴在固定底板上，然后在硝酸纤维素膜上表面从左到右粘贴步骤（3.1）处理后的样品垫和步骤（3.2）处理后的结合垫，粘贴于纤维素膜上方的样品垫和结合垫部分重叠，且重叠部分样品垫在上，吸收垫粘贴于硝酸纤维素膜的右侧上表面，其中检测线和控制线位于结合垫和吸收垫之...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘国东，范川，邱万伟，钱立生，李坤，
申请(专利权)人：安徽科技学院，
类型：发明
国别省市：安徽,34
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