【技术实现步骤摘要】
一种Rochel反转录试剂及其制备方法
本专利技术涉及细胞生物科技领域，更具体地说，本专利技术涉及一种Rochel反转录试剂及其制备方法。
技术介绍
牙周膜是连接牙骨质和牙槽骨的结缔组织，牙周膜细胞(periodontalligamentcells，PDLCs)中有多种细胞群体，主要有成纤维细胞，成牙骨质细胞，造骨细胞，内皮细胞，Malaseez上皮细胞，破骨细胞等。近年来的研究发现PDLCs有类似间充质干细胞(Mesenchymalstemcells，MSCs)功能的细胞，能在体外分化为成骨细胞，脂肪细胞及神经样细胞，使牙周组织的再生成为可能,遗憾的是牙周膜的再生机制尚不明晰。牙周膜的再生研究方面,主要受限于原代PDLCs的传代培养会降低细胞的分化潜能，并失去原代特性,比如,不同代数牙周膜的成骨分化能力差异非常大。所以建立与原代PDLCs表型和生长特性相同,并能稳定传代的PDLCs细胞系，对牙周膜再生机制的研究提供细胞平台,有着重大的意义。构建保留原代细胞特征的稳定的人PDLCs细胞系存在诸多难点。Kamata等人通过共转染hTERT和人乳头状瘤细胞病毒16成功...
【技术保护点】
1.一种Rochel反转录试剂，其特征在于：其中所使用的主料按重量计包括：去离子水2‑3ml、EASY Dilution for Real Time PCR 1‑2ml、gDNA Eraser 0.1‑0.3ml、5 x gDNA Eraser Buffer 0.2‑0.4ml、RNase抑制剂0.03‑0.05ml和基因引物0.3‑0.5ml，所述基因引物包括端粒酶反转录酶0.05‑0.1ml、酸甘油醛脱氢酶0.05‑0.1ml、碱性磷酸酶0.04‑0.06ml、核心结合因子0.04‑0.06ml、骨涎蛋白0.03‑0.05ml、骨钙素0.03‑0.05ml、骨桥素0.0...
【技术特征摘要】
1.一种Rochel反转录试剂，其特征在于：其中所使用的主料按重量计包括：去离子水2-3ml、EASYDilutionforRealTimePCR1-2ml、gDNAEraser0.1-0.3ml、5xgDNAEraserBuffer0.2-0.4ml、RNase抑制剂0.03-0.05ml和基因引物0.3-0.5ml，所述基因引物包括端粒酶反转录酶0.05-0.1ml、酸甘油醛脱氢酶0.05-0.1ml、碱性磷酸酶0.04-0.06ml、核心结合因子0.04-0.06ml、骨涎蛋白0.03-0.05ml、骨钙素0.03-0.05ml、骨桥素0.02-0.04ml和Ⅰ型胶原蛋白0.02-0.04ml。2.根据权利要求1所述的一种Rochel反转录试剂，其特征在于：所述基因引物中各引物序列具体如下：端粒酶反转录酶：F:5’-TCTGGGATGCGAACGGGC-3’；R:5’-TCCGGCTCAGGGGCAGC-3’；磷酸甘油醛脱氢酶:F:5’-GGAGTCCACTGGCGTCTTC-3’；R:5’–GCTGATGATCTTGAGGCTGTTG-3’端粒酶反转录酶：F:5’-CTCGTTGACACCTGGAAGAGCTTCAAACCG-3’,R:5’-GGTCCGTCACGTTGTTCCTGTTCAGC-3’；核心结合因子：F:5’-CACTATCCAGCCACCTTTAC-3’，R:5’-ATCAGCGTCAACATC-3’；骨涎蛋白:F:5’-CATAGCCATCGTATCCTTGTCCT-3’,R:5’–CTATGGAGAGGACGCCACGCCTGG-3’；骨钙素：F：5’-GCAGAGTCCAGCAAAGGGTG-3’，R：5’-GTCAGCAACTCGTCACAG-3’；骨桥素:F:5’-CCAAGTAAGTCCAACGAAAG-3’,R:5’-GGTGATGTCCTCGTCTGTA-3’；Ⅰ型胶原蛋白:F:5’-AGGGCTCCAACGAGATCGAGATCCG-3’,R:5’-TACAGGAAGCAGACAGGGCCAACGTCG-3’。3...
【专利技术属性】
技术研发人员：张志东，秦晓东，何祥一，曾飒，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃,62
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