试样的制备方法以及分析方法技术

本发明专利技术的技术问题在于迅速地使糖链中的内酯稳定化。一种试样的制备方法，是制备含有糖链的试样的制备方法，该制备方法包括以下步骤：进行内酯化反应，所述内酯化反应使糖链所含的唾液酸的至少一部分内酯化；和进行酰胺化反应，所述酰胺化反应将酰胺化反应溶液加入至试样中而使已内酯化的唾液酸的内酯酰胺化，所述酰胺化反应溶液含有从由与内酯化的唾液酸反应的氨、胺及它们的盐组成的组中选择的至少一种。

Preparation and Analysis of Samples

【技术实现步骤摘要】
试样的制备方法以及分析方法
本专利技术涉及试样的制备方法以及分析方法。
技术介绍
唾液酸是在生物体内大量存在的糖。唾液酸在生物体内包含于与蛋白质结合的糖链中,较多地存在于糖链的末端(非还原末端)。因此,唾液酸在这样的糖蛋白分子中配置于分子的外侧,能够直接从其他分子识别,因此承担重要的作用。存在唾液酸与相邻的糖之间的结合方式(linkagetype)不同的情况。例如,已知：在人的N型糖链中,主要为α2,3-以及α2,6-的结合方式，而在O型糖链或鞘糖脂中,除了这些以外,还存在α2、8-以及α2、9-的结合方式。根据这样的结合方式的不同,能够从不同的分子识别出唾液酸,从而可以具有不同的作用。此外,还已知所表达的糖蛋白中的唾液酸的结合方式随着癌变的进行而发生变化,从而也期待其作为癌症的生物标记物的利用。进而,已知糖链修饰对生物药品的效果的影响,在生物药品的质量管理中,唾液酸的结合方式的解析也是至关重要的。但是,由于唾液酸具有负电荷,在正离子模式下难以离子化或者唾液酸容易分解,因此通过含有唾液酸的唾液酸糖链的质谱分析进行的解析并不容易。除此之外,分子量并不会根据唾液酸的结合方式而变化,因此区本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种试样的制备方法，是制备含有糖链的试样的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：进行内酯化反应，所述内酯化反应使所述糖链所含的唾液酸的至少一部分内酯化；和进行酰胺化反应，所述酰胺化反应将酰胺化反应溶液加入至所述试样中而使所述已内酯化的所述唾液酸的内酯酰胺化，所述酰胺化反应溶液含有从由与内酯化的所述唾液酸反应的氨、胺及它们的盐组成的组中选择的至少一种。

【技术特征摘要】
2018.03.01 JP 2018-0363671.一种试样的制备方法，是制备含有糖链的试样的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：进行内酯化反应，所述内酯化反应使所述糖链所含的唾液酸的至少一部分内酯化；和进行酰胺化反应，所述酰胺化反应将酰胺化反应溶液加入至所述试样中而使所述已内酯化的所述唾液酸的内酯酰胺化，所述酰胺化反应溶液含有从由与内酯化的所述唾液酸反应的氨、胺及它们的盐组成的组中选择的至少一种。2.如权利要求1所述的试样的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：在所述内酯化反应之后,进行从所述试样去除用于所述内酯化反应的内酯化反应溶液的操作。3.如权利要求1所述的试样的制备方法，其特征在于，所述酰胺化反应仅通过使所述试样与所述酰胺化反应溶液接触来进行。4.如权利要求1所述的试样的制备方法,其特征在于，所述酰胺化反应溶液不含有与所述内酯反应的脱水缩合剂。5.如权利要求1所述的试样的制备方法,其特征在于，在所述试样中加入所述酰胺化反应溶液后,不进行使所述试样与脱水缩合剂反应的操作。6.如权利要求1所述的试样的制备方法，其特征在于，为了进行所述酰胺化反应而使所述试样与所述酰胺化反应溶液接触的时间短于30分钟。7.如权利要求1所述的试样的制备方法,其特征在于，所述胺为伯胺。8.如权利要求1所述的试样的制备方法,其特征在于，所述胺包含烷基。9.如权利要求8所述的试样的制备方法，其特征在于，所述烷基不具有支链。10.如权利要求1所述的试样的制备方法,其特征在于，所述胺包含烯丙基以及羟基中的至少一种。11.如权利要求1所述的试样的制备方法,其...

【专利技术属性】
技术研发人员：西风隆司，花松久寿，古川润一，
申请(专利权)人：株式会社岛津制作所，
类型：发明
国别省市：日本,JP