一种监测pre-mRNA剪接过程报告基因影像探针及其构建方法技术

技术编号:22069339 阅读:87 留言:0更新日期:2019-09-12 12:12
本发明专利技术公开了一种监测pre‑mRNA剪接过程报告基因影像探针及其构建方法。所述的探针包括载体pCDNA3.1(+)、基因片段BD、Rluc intron、AD,载体pG5 luc,所述的基因片段BD、Rluc intron、AD按照BD‑Rluc intron‑AD顺序与线性化的pcDNA3.1(+)载体重组。本发明专利技术的报告基因分子影像探针可以模拟活体pre‑mRNA加工为成熟mRNA的过程,为模拟活体pre‑mRNA加工过程的动态变化提供了一种实时、无创的监测工具,同时为作用于剪接体的药物研究提供了有效的筛选工具。

A Reporter Gene Image Probe for Monitoring Pre-RNA Splicing Process and Its Construction Method

【技术实现步骤摘要】
一种监测pre-mRNA剪接过程报告基因影像探针及其构建方法
本专利技术属于分子生物学和基因工程
,涉及一种监测pre-mRNA剪接过程的基因影像探针及其构建方法,具体为一种BD-Rlucintron-AD/pG5luc报告基因影像探针。
技术介绍
真核生物中,DNA携带的遗传信息从转录到翻译成蛋白质的过程中,前体信使RNA(pre-mRNA)的剪接起着非常关键的作用,pre-mRNA的剪接失调是产生许多疾病的根本原因。pre-mRNA的剪接遵循GU-AG规则,通过生物体内的顺式作用元件和反式作用因子调节进行调控,剪接的发生取决于对内含子-外显子边界连接的短共有序列的识别,并由一系列的剪接体核小核糖核蛋白颗粒(snRNPs,由U1,U2,U4,U5,U6,U11,U12,U4atac和U6atac组成)和多种蛋白质形成的RNA-蛋白质复合物参与完成。剪接体装配严格依赖内含子的保守序列元件5'剪接位点、分支点序列(branchpointsequence,BPS)和3'剪接位点的存在进行。内含子保留(intronretention,IR)是内含子被转录成pre-mRNA并且保留在成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种监测pre‑mRNA剪接过程的报告基因影像探针,其特征在于,所述的探针包括载体pcDNA3.1(+)、基因片段BD、Rluc intron和AD以及载体pG5 luc,所述的基因片段BD、Rluc intron和AD按照BD‑Rluc intron‑AD顺序与线性化的pcDNA3.1(+)载体重组。

【技术特征摘要】
1.一种监测pre-mRNA剪接过程的报告基因影像探针,其特征在于,所述的探针包括载体pcDNA3.1(+)、基因片段BD、Rlucintron和AD以及载体pG5luc,所述的基因片段BD、Rlucintron和AD按照BD-Rlucintron-AD顺序与线性化的pcDNA3.1(+)载体重组。2.根据权利要求1所述的一种监测pre-mRNA剪接过程的报告基因影像探针,其特征在于,所述的片段BD-Rlucintron-AD的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。3.根据权利要求1所述的一种监测pre-mRNA剪接过程的报告基因影像探针,其特征在于,述的探针的核苷酸序列如SE...

【专利技术属性】
技术研发人员:王福郑海锋王希楠陈思解锦荣施潇蕊毛文杰
申请(专利权)人:西安电子科技大学
类型:发明
国别省市:陕西,61

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