具有赋形剂的经干燥的微生物制造技术

本发明专利技术提供具有增加的保质期的经干燥的微生物。

Dry microorganisms with excipients

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有赋形剂的经干燥的微生物
本专利技术涉及经干燥的微生物领域。
技术介绍
通常将微生物干燥以用于储存，例如通过冷冻干燥或喷雾干燥。此类经干燥的微生物用于工业和食品用途，例如用于制造奶酪和酸奶，以及用作益生菌。在储存期间，经干燥的生物体的存活力在一定程度上降低，因此随着时间的推移活细胞计数减少。这在高湿度环境中尤其成问题。益生菌是活的微生物，当以适当的剂量施用时其对人或动物健康有益。施用益生菌的一种方式是通过摄取与赋形剂混合并包装在胶囊或小袋中的经干燥的益生菌。不幸的是，经干燥的益生菌细胞在储存期间不是非常稳定，结果活细胞计数随时间降低，从而使得治疗不那么有效。当益生菌与具有高湿含量的赋形剂混合时，当容器壁对外部大气水分是可透过的时，以及当益生菌储存在高相对湿度环境中时，尤其如此。
技术实现思路
在第一个方面，本专利技术提供了一种组合物，该组合物包含(a)经干燥的微生物和(b)粉末形式的磷酸盐的共混物。在第二个方面，本专利技术提供了一种单位微生物剂量，该剂量含有一种组合物，该组合物包含(a)经干燥的微生物和(b)粉末形式的磷酸盐的混合物。在第三个方面，本专利技术提供了一种用于制备组合物的方法，该方法包括以下步骤：(i)提供(a)经干燥的微生物，和(b)粉末形式的磷酸盐；以及(ii)将所述经干燥的微生物与所述粉末形式的磷酸盐混合以提供所述组合物。附图说明图1显示了对于与根据本专利技术的赋形剂(“K2HPO4”)混合、与常规赋形剂(“MCC”)混合或不含赋形剂(“冷冻干燥的益生菌”)的不同细菌菌株，在30℃在潮湿条件(aw＝0.4)下储存3个月后的％存活。图2显示了对于与根据本专利技术的赋形剂(“K2HPO4”)混合、与常规赋形剂(“MCC”)混合的冷冻干燥的嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)，在30℃下3个月后的％存活，为aw(aw＝0.1、aw＝0.2和aw＝0.3)的函数。图3显示了在30℃在潮湿条件(aw0.4)下6个月后，嗜酸乳杆菌的％存活，为共混物中K2HPO4赋形剂的百分比的函数。图4显示了在30℃在潮湿条件(aw0.4)下6个月后，嗜酸乳杆菌的％存活，为在与MCC的共混物中K2HPO4赋形剂的百分比的函数。图5显示了赋形剂的pH对冷冻干燥的嗜酸乳杆菌粉末在30℃在干燥条件(aw0.1)下1个月后和3个月后的％存活的影响。“KP”表示pH调节至指定pH的K2HPO4，“K2HPO4”表示没有经pH调节的K2HPO4，“MCC”表示微晶纤维素。图6显示了赋形剂的pH对冷冻干燥的嗜酸乳杆菌粉末在30℃在潮湿条件(aw0.4)下3个月后的％存活的影响。“K2HPO4”表示pH调节至指定pH的K2HPO4，“MCC”表示微晶纤维素。具体实施方式本文中所引用的所有文件均通过引用并入。本专利技术人惊讶地发现，通过使用磷酸盐作为赋形剂改善了经干燥的微生物的存活率。该效果在高水活度(aw)环境中尤其突出。高水活度被认为是aw＞0.15。通常，将微生物干粉末(特别是益生菌)与赋形剂混合以使微生物浓度标准化。最常用的赋形剂之一，特别是当微生物掺入胶囊和小袋中时，是微晶纤维素(MCC)。本专利技术人使用MCC作为参照赋形剂。本专利技术人发现，与MCC赋形剂中几乎0％的存活率相比，使用磷酸盐可以在3个月内提供经干燥微生物的大于60％的存活率。该效果在高水活度环境(aw＞0.15，特别是aw＞0.2，更特别是aw＞0.3)中尤其突出。水活度优选通过露点湿度计测量。微生物存活率以两种不同的方式表示。A)存活百分比％存活＝(储存后的CFU/CFUt0)X100％B)对数损失对数损失＝Log(CFUt0)-Log(储存后的CFU)经干燥的微生物本专利技术的组合物含有经干燥的微生物。微生物(特别是益生菌)可以通过任何手段干燥，然而，优选冷冻干燥和喷雾干燥，特别优选冷冻干燥。表述微生物意指涵盖任何细菌或酵母，或这些的混合物，且特别是益生菌。术语益生菌包括施用于宿主以赋予宿主健康益处的任何活的微生物。特别地，它可以是酵母或细菌，或这些中的任何一种的混合物。经干燥的微生物(特别是益生菌)能以适于递送的任何形式提供。例如，经干燥的微生物(特别是益生菌)能以颗粒或粉末的形式提供。在一个方面，所述微生物(特别是益生菌)是粉末形式。本专利技术的组合物可含有微生物(特别是益生菌)的一个物种，微生物(特别是益生菌)的一种菌株，微生物(特别是益生菌)物种的混合物，或微生物(特别是益生菌)菌株的混合物。在一个方面，本专利技术的组合物含有微生物(特别是益生菌)的一个物种，且任选地含有微生物(特别是益生菌)的一种菌株。在一个方面，本专利技术的组合物含有微生物(特别是益生菌)菌株的混合物。在一个方面，本专利技术的组合物含有微生物(特别是益生菌)物种的混合物。在一个优选的实施例中，所述微生物(特别是益生菌)选自乳杆菌(lactobacilli)、双歧杆菌(bifidobacteria)、酵母(saccharomyces)及其混合物。在一个进一步优选的实施例中，所述微生物(特别是益生菌)选自以下物种，该物种选自凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)、长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacteriumlongumsubsp.infantis)、嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)、约氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)、罗伊氏乳杆菌保护亚种(Lactobacillusreuteriprotectis)、罗伊氏乳杆菌护牙亚种(Lactobacillusreuteriprodentis)、布拉氏酵母(Saccharomycesboulardii)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、植物乳杆菌、副干酪乳杆菌及其混合物。在一个进一步优选的实施例中，所述微生物(特别是益生菌)选自以下物种，该物种选自嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸双歧杆菌(Bifidobacteriumlacfis)、及其混合物。在一个方面，所述微生物(特别是益生菌)是选自以下菌株的微生物：凝结芽孢杆菌GBI-30，6086、长双歧杆菌婴儿亚种35624、嗜酸乳杆菌NCFM、副干酪乳杆菌St11(或NCC2461)、约氏乳杆菌La1(＝乳杆菌LC1、约氏乳杆菌NCC533)、植物乳杆菌299v、罗伊氏乳杆菌ATCC55730(罗伊氏乳杆菌SD2112)、罗伊氏乳杆菌保护亚种(DSM17938，ATCC55730的子菌株)、罗伊氏乳杆菌护牙亚种(DSM17938/ATCC55730和ATCCPTA5289的组合)、布拉氏酵母、鼠李糖乳杆菌GR-1、罗伊氏乳杆菌RC-14、嗜酸乳杆菌CL1285、干酪乳杆菌LBC80R、植物乳杆菌HEAL9、副干酪乳杆菌8700∶2、及其混合物。在一个方面，所述微生物(特别是益生菌)是选自以下菌株的益生菌：嗜酸乳杆菌(NCFM菌株)、干酪乳杆菌(LPC37菌株)、乳酸双歧杆菌(HN0019)、及其混合物。所述微生物(特别是益生菌)能以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，该组合物包含如下项的共混物：(a)经干燥的微生物和(b)粉末形式的磷酸盐。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.03.07 EP 17159494.8;2017.01.19 US 62/4480661.一种组合物，该组合物包含如下项的共混物：(a)经干燥的微生物和(b)粉末形式的磷酸盐。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述磷酸盐选自K2HPO4、KH2PO4、Na2HPO4、NaH2PO4、MgHPO4、Mg[H2PO4]2、CaHPO4、Ca[H2PO4]2、及其混合物。3.如权利要求1所述的组合物，其中所述磷酸盐选自K2HPO4、KH2PO4、Na2HPO4、NaH2PO4、及其混合物。4.如权利要求1、2或3所述的组合物，其中所述磷酸盐是HPO42-盐和H2PO4-盐的混合物。5.如任一前述权利要求所述的组合物，其中将所述磷酸盐的pH调节为pH6和9之间。6.如任一前述权利要求所述的组合物，其中将所述磷酸盐的pH调节为6.8-7.2之间。7.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述磷酸盐以基于微生物和磷酸盐的总重量的至少50wt％的量存在。8.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述磷酸盐以基于微生物和磷酸盐的总重量的至少60wt％的量存在。9.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述磷酸盐以基于微生物和磷酸盐的总重量的至少80wt％的量存在。10.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述微生物是经冷冻干燥的。11.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述微生物是益生菌。12.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述微生物选自乳杆菌(lactobacilli)、双歧杆菌(bifidobacteria)、酵母(saccharomyces)及其混合物。13.如任一前述...

【专利技术属性】
技术研发人员：C奥拉尔，G巴宾，
申请(专利权)人：杜邦营养生物科学有限公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK