一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，包括有以下步骤：1）以甲醇溶液为溶剂制备盐酸小檗碱的对照品溶液；2）取克淋通胶囊装量差异项下的内容物，混匀得到待测样品；3）以盐酸‑甲醇混合溶液为溶剂制备供试品溶液；4）采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中盐酸小檗碱的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈‑0.025mol/L磷酸二氢钾溶液‑0.025mol/L十二烷基硫酸钠（50：25：25）；检测波长345nm；进样量10uL；本发明专利技术所采取的技术方案解决目前检测盐酸小檗碱的高效液相色谱法中，大多选择以0.033mol/L磷酸二氢钾‑乙腈（60：40）作为流动相，采用此流动相的检测方法在检测时，存在出峰拖尾严重，峰形较差的问题。

A Method for the Determination of Berberine Hydrochloride in Kelintong Capsules

【技术实现步骤摘要】
一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法
本专利技术涉及药品成份含量检测领域，具体涉及一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法。
技术介绍
克淋通胶囊用于清热泻火，利尿通淋。用于湿热下注，热结膀胱所至的热淋，症见小便频数，尿急、尿痛、小腹胀痛，腰痛，苔黄腻，脉滑数；克淋通胶囊作为一种纯中药制剂，成份包括有头花蓼和黄柏，其中的有效化学成份为盐酸小檗碱；目前检测盐酸小檗碱的高效液相色谱法中，大多选择以0.033mol/L磷酸二氢钾-乙腈（60：40）作为流动相，采用此流动相的检测方法在检测时，存在出峰拖尾严重，峰形较差的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，解决目前检测盐酸小檗碱的高效液相色谱法中，大多选择以0.033mol/L磷酸二氢钾-乙腈（60：40）作为流动相，采用此流动相的检测方法在检测时，存在出峰拖尾严重，峰形较差的问题。为解决上述的技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，包括有以下步骤：1）以甲醇溶液为溶剂制备盐酸小檗碱的对照品溶液；2）取克淋通胶囊装量差异项下的内容物，混匀得到待测样品；3）以盐酸-甲醇混合溶液为溶剂溶解提取待测样品，得到供试品溶液；4）采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中盐酸小檗碱的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-0.025mol/L十二烷基硫酸钠（50：25：25）；检测波长345nm；进样量10uL；进一步的，所述的克淋通胶囊采用以下制备方式制得：步骤S1:取头花蓼1000g，黄柏600g，酌予碎断，加水浸泡25min-35min，煎煮两次，每次1h-3h，合并煎液；步骤S2：将步骤S1得到的煎液过滤，滤液浓缩至相对密度为1.15-1.20的清膏；步骤S3：干燥步骤S2所得的清膏，加入200g淀粉，混匀，装入胶囊，即得到克淋通胶囊；进一步的，步骤1）中制备盐酸小檗碱的对照品溶液的具体操作为：取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.04mg盐酸小檗碱对照品的溶液，即可得到对照品溶液；进一步的，步骤3）包括：步骤A：精密称定0.2g待测样品，置于25mL容量瓶中；步骤B：加入盐酸-甲醇混合溶液15mL，超声处理后放冷；步骤C：加入盐酸-甲醇混合溶液至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得到供试品溶液；进一步的，步骤B和步骤C中盐酸与甲醇的体积比均为1：100；进一步的，所述超声处理的时间为10min-30min，功率为250W，频率为50KHz；进一步的，所述超声处理的时间为20min，超声处理结束后放冷至温度为20℃-28℃；进一步的，步骤4）中色谱检测的色谱柱的问题为为20℃-40℃；进一步的，步骤4）中色谱柱理论塔板数按盐酸小檗碱计算≥2000；更进一步的技术方案是步骤4）中色谱检测的洗脱方式为等度洗脱。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、采用乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-0.025mol/L十二烷基硫酸钠（50：25：25）为流动相，进样品后，盐酸小檗碱峰无拖尾，峰型较好；2、通过选择合适的检测条件，使得该HPLC测定克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的分离度、准确性、重现性、稳定性等都满足标准要求。附图说明图1为采用磷酸二氢钾-乙腈为流动相所测得的盐酸小檗碱色谱图。图2为采用乙腈-磷酸二氢钾溶液-十二烷基硫酸钠为流动相所测得的盐酸小檗对照品溶液碱色谱图。图3为采用乙腈-磷酸二氢钾溶液-十二烷基硫酸钠为流动相所测得的供试品溶液碱色谱图。图4为盐酸小檗碱标准曲线图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1：一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，包括有以下步骤：1）以甲醇溶液为溶剂制备盐酸小檗碱的对照品溶液；2）取克淋通胶囊装量差异项下的内容物，混匀得到待测样品；3）以盐酸-甲醇混合溶液为溶剂溶解提取待测样品，得到供试品溶液；4）采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中盐酸小檗碱的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-0.025mol/L十二烷基硫酸钠（50：25：25）；检测波长345nm；进样量10uL。所述的克淋通胶囊采用以下制备方式制得：步骤S1:取头花蓼1000g，黄柏600g，酌予碎断，加水浸泡25min-35min，煎煮两次，每次1h-3h，合并煎液；步骤S2：将步骤S1得到的煎液过滤，滤液浓缩至相对密度为1.15-1.20的清膏；步骤S3：干燥步骤S2所得的清膏，加入200g淀粉，混匀，装入胶囊，即得到克淋通胶囊。步骤1）中制备盐酸小檗碱的对照品溶液的具体操作为：取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.04mg盐酸小檗碱对照品的溶液，即可得到对照品溶液。步骤3）包括：步骤A：精密称定0.2g待测样品，置于25mL容量瓶中；步骤B：加入盐酸-甲醇混合溶液15mL，超声处理后放冷；步骤C：加入盐酸-甲醇混合溶液至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得到供试品溶液。超声能够加速介质质点运动，空化作用，超声波的振动匀化使样品介质内各点受到的作用一致，使整个样品萃取更均匀。超声波提取时不需要加热，避免了常规煎煮法、回流法长时间加热对有效成分的不良影响。适用于热敏物质的提取；同时不需要加热，因而节省能源。超声波提取提高了药物有效成分的提取率,有利于资源的充分利用,提高了经济效益。溶剂用量少,节约了溶剂。超声波提取是一个物理过程,在整个浸提过程中无化学反应发生,不影响大多数药物有效成分的生理活性。提取物有效成分含量高,有利干进一步精制。其中，步骤B和步骤C中盐酸与甲醇的体积比均为1：100。盐酸-甲醇作为溶剂有利于进一步提取黄柏中的盐酸小檗碱。其中所述超声处理的时间为10min-30min，功率为250W，频率为50KHz。其中，所述超声处理的时间为20min，超声处理结束后放冷至温度为20℃-28℃。步骤4）中色谱检测的色谱柱的问题为为20℃-40℃。步骤4）中色谱柱理论塔板数按盐酸小檗碱计算≥2000。步骤4）中色谱检测的洗脱方式为等度洗脱。（1）线性考察精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液（0.050781mg/ml）2、6、10、14、18、22μl进样，记录色谱，以峰面积为横坐标，以进样量（μg）为纵坐标作图，计算回归方程为：A=2951.58487C-10.709629(r=0.9999)，回归方程拟合过原点的直线方程为：A=2938.311641C；将一供试品溶液进样分析，所得峰面积分别代入上两式计算，相对偏差为0.61%，故可认为标准曲线过原点，回归方程截距为零。由此含量测定可采用外标一点法计算。在0.1016μg～1.1172μg之间线性关系良好。表1盐酸小檗碱线性关系考察（2）精密度试验取对照品溶液0.050781mg/ml，重复进样6次，记录色谱，结果见表2及精密度图谱，RSD为0.49%，说明有良好的精密度。表2精密度试验进样次数123本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，其特征在于，包括有以下步骤：1）以甲醇溶液为溶剂制备盐酸小檗碱的对照品溶液；2）取克淋通胶囊装量差异项下的内容物，混匀得到待测样品；3）以盐酸‑甲醇混合溶液为溶剂溶解提取待测样品，得到供试品溶液；4）采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中盐酸小檗碱的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈‑0.025mol/L磷酸二氢钾溶液‑0.025mol/L十二烷基硫酸钠（50：25：25）；检测波长345nm；进样量10uL。

【技术特征摘要】
1.一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，其特征在于，包括有以下步骤：1）以甲醇溶液为溶剂制备盐酸小檗碱的对照品溶液；2）取克淋通胶囊装量差异项下的内容物，混匀得到待测样品；3）以盐酸-甲醇混合溶液为溶剂溶解提取待测样品，得到供试品溶液；4）采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中盐酸小檗碱的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-0.025mol/L十二烷基硫酸钠（50：25：25）；检测波长345nm；进样量10uL。2.一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，其特征在于：所述的克淋通胶囊采用以下制备方式制得：步骤S1:取头花蓼1000g，黄柏600g，酌予碎断，加水浸泡25min-35min，煎煮两次，每次1h-3h，合并煎液；步骤S2：将步骤S1得到的煎液过滤，滤液浓缩至相对密度为1.15-1.20的清膏；步骤S3：干燥步骤S2所得的清膏，加入200g淀粉，混匀，装入胶囊，即得到克淋通胶囊。3.根据权利要求1所述的一种克淋通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定方法，其特征在于：步骤1）中制备盐酸小檗碱的对照品溶液的具体操作为：取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.04mg盐酸小檗碱对照品的溶液，即可得...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐会，罗玉江，杨应群，
申请(专利权)人：贵州联盛药业有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52