【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】唾液酸化化合物的体内合成
本专利技术属于合成生物学和代谢工程
更具体而言，本专利技术属于代谢工程微生物的发酵
本专利技术描述了能够通过细胞内生物合成途径合成唾液酸化化合物的工程微生物。这些微生物可使N-乙酰葡糖胺-6-磷酸去磷酸化成为N-乙酰葡糖胺，并将N-乙酰葡糖胺转化为N-乙酰甘露糖胺。这些微生物还能将N-乙酰甘露糖胺转化为N-乙酰神经氨酸。此外，本专利技术提供了通过在培养基中培养微生物大规模体内合成唾液酸化化合物的方法，所述培养基任选地包含外源性前体，例如但不限于乳糖、乳-N-二糖、N-乙酰乳糖胺和/或苷元，其中所述微生物在细胞内使N-乙酰葡糖胺-6-磷酸去磷酸化成为N-乙酰葡糖胺，将N-乙酰葡糖胺转化为N-乙酰甘露糖胺并将后者进一步转化为N-乙酰神经氨酸。
技术介绍
诸如唾液酸和唾液酸化寡糖的唾液酸化化合物由于其广泛的应用范围而在近年来受到关注。例如，唾液酸被认为是抗病毒前体。唾液酸化寡糖形成人乳的重要部分，并认为具有抗粘连特性和免疫调节特性；其他人描述了它们参与大脑发育。通常，蛋白质、脂质或苷元的唾液酸化用于抗癌药物和神经疾病的治疗中。唾...
【技术保护点】
1.在微生物中产生唾液酸化化合物的方法，所述方法包括：‑在培养基中培养微生物，所述培养基任选地包含外源性前体，其中所述微生物包含至少一种编码磷酸酶的核酸、至少一种编码N‑乙酰甘露糖胺差向异构酶的核酸和至少一种编码唾液酸合酶的核酸，且其中所述微生物不能i)将N‑乙酰葡糖胺‑6‑P转化为葡糖胺‑6‑P，ii)将N‑乙酰葡糖胺转化为N‑乙酰葡糖胺‑6‑P，和iii)将N‑乙酰神经氨酸转化为N‑乙酰甘露糖胺；和‑调节所述微生物中编码HAD类磷酸酶多肽的核酸的表达，其中所述HAD类磷酸酶多肽包含：‑至少下列基序之一：基序1：hDxDx[TV](SEQ ID NO:73)，或基序2：[...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.12.27 EP 16206916.51.在微生物中产生唾液酸化化合物的方法，所述方法包括：-在培养基中培养微生物，所述培养基任选地包含外源性前体，其中所述微生物包含至少一种编码磷酸酶的核酸、至少一种编码N-乙酰甘露糖胺差向异构酶的核酸和至少一种编码唾液酸合酶的核酸，且其中所述微生物不能i)将N-乙酰葡糖胺-6-P转化为葡糖胺-6-P，ii)将N-乙酰葡糖胺转化为N-乙酰葡糖胺-6-P，和iii)将N-乙酰神经氨酸转化为N-乙酰甘露糖胺；和-调节所述微生物中编码HAD类磷酸酶多肽的核酸的表达，其中所述HAD类磷酸酶多肽包含：-至少下列基序之一：基序1：hDxDx[TV](SEQIDNO:73)，或基序2：[GSTDE][DSEN]x(1-2)[hP]x(1-2)[DGTS](SEQIDNO:74、75、76、77)，其中h表示疏水性氨基酸(A、I、L、M、F、V、P、G)，且x可以是任何不同的氨基酸；-或SEQIDNO:43、44、45、47、48、50、51、52、54、55或57中任一个的与所述多肽具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的总体序列同一性的同源物或衍生物。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述HAD类多肽包含SEQIDNO:43、44、45、47、48、50、51、52、54、55或57中的任何一个。3.根据权利要求1所述的方法，其中通过在微生物中引入并表达编码HAD类多肽的核酸来实现受调节的表达。4.根据权利要求1所述的方法，其中通过组成型启动子的作用实现受调节的表达。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述唾液酸化化合物选自N-乙酰神经氨酸、唾液酸化寡糖、唾液酸化脂质、唾液酸化蛋白质、唾液酸化苷元。6.根据前述权利要求所述的方法，其中所述唾液酸化化合物是唾液酸化寡糖。7.根据权利要求6的方法，其中所述唾液酸化寡糖是唾液酸乳糖。8.根据权利要求6所述的方法，其中所述唾液酸化寡糖是二唾液酸乳-N-四糖。9.根据权利要求5所述的方法，其中所述唾液酸化化合物是N-乙酰神经氨酸。10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述唾液酸化化合物是唾液酸化乳-N-三糖、乳-N-四糖或乳-N-新四糖，并且其中所述微生物还包含半乳糖基转移酶(EC2.4.1.38)活性。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述微生物不能表达编码UDP糖水解...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·博普雷兹，P·库西蒙特，D·范赫普，G·彼得斯，A·瓦考特兰，
申请(专利权)人：因比奥斯公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE
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