一种提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法技术

本发明专利技术涉及发酵工程技术领域，具体涉及一种提高N‑乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法。发酵过程中，当发酵液的OD660nm大于或等于25时，按照前5h以5mL/h的流加速度流加半乳糖和L‑天门冬氨酸的混合液，之后以3mL/h的流速流加至发酵结束，所述半乳糖和L‑天门冬氨酸的质量比为25:3。本发明专利技术在发酵培养过程中，当OD660nm大于或等于25时流加半乳糖和L‑天门冬氨酸的混合液，控制半乳糖和L‑天门冬氨酸的浓度和比例，通过在半乳糖中添加L‑天门冬氨酸使得glmS与gfa1过量表达增加氨基葡萄糖的积累浓度，最后将N‑乙酰氨基葡萄糖产量提高至120g/L。

【技术实现步骤摘要】
一种提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法
本专利技术涉及发酵工程
，具体涉及一种提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法。
技术介绍
N-乙酰氨基葡萄糖是葡萄糖的一种衍生物，是在葡萄糖二号的羟基被乙酰氨基取代的产物，在自然界中广泛存在。目前，国内关于N-乙酰氨基葡萄糖的获取方法主要有化学法和生物法两种，其中生物法是通过微生物发酵法合成N-乙酰氨基葡萄糖，其优点在于生产时间短，效率高，没有鱼腥味。但是发酵法合成N-乙酰氨基葡萄糖存在积累的氨基葡萄糖或N-乙酰氨基葡萄糖会被细胞从胞外转入胞内作为碳源利用使得发酵液中无法大量积累N-乙酰氨基葡萄糖。公开号为CN104988196A的中国专利技术专利公开了一种N-乙酰氨基葡萄糖的发酵生产方法，在发酵过程，当发酵液的残糖含量将至0.5g/L以下时，向发酵液中流加葡糖糖溶液，当发酵液的OD660nm＝25～28时，加入IPTG进行诱导，显著提高了发酵终点N-乙酰氨基葡萄糖含量和转化率，然而补加IPTG诱导剂进行诱导表达外源蛋白有以下缺点：(1)IPTG具有一定的毒性且价格昂贵。(2)IPTG是通过过滤后溶解于无菌水中，在此过程中有染菌的风险不利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高N‑乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，发酵过程中，当发酵液的OD660nm大于或等于25时，按照前5h以5mL/h的流加速度流加半乳糖和L‑天门冬氨酸的混合液，之后以3mL/h的流速流加至发酵结束，所述半乳糖和L‑天门冬氨酸的质量比为25:3。

【技术特征摘要】
1.一种提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，发酵过程中，当发酵液的OD660nm大于或等于25时，按照前5h以5mL/h的流加速度流加半乳糖和L-天门冬氨酸的混合液，之后以3mL/h的流速流加至发酵结束，所述半乳糖和L-天门冬氨酸的质量比为25:3。2.根据权利要求1所述的提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，当发酵液的OD660nm为25～28时，按照前5h以5mL/h的流加速度流加半乳糖和L-天门冬氨酸的混合液，之后以3mL/h的流速流加至发酵结束，所述半乳糖和L-天门冬氨酸的质量比为25:3。3.根据权利要求1所述的提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，所述混合液的体积与发酵液的体积比为1:100。4.根据权利要求1所述的提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，具体包括如下步骤：将成熟的N-乙酰氨基葡萄糖种子液按照12～15％接种量接种到含有发酵培养基的发酵罐中培养，控制发酵温度36-38℃，罐压0.03-0.05Mpa，搅拌转速250-450rpm，通气比0.6-1.0v/v/m，溶氧25％～27％，pH＝6.8；当发酵液的OD660nm大于或等于25时，按照前5h以5mL/h的流加速度流加半乳糖和L-天门冬氨酸的混合液，之后以3mL/h的流速流加至发酵结束，所述半乳糖和L-天门冬氨酸的质量比为25:3。5.根据权利要求4所述的提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基原料包括：葡萄糖0.54％，硫酸铵0.35％，磷酸二氢钾1.0％，硫酸镁0.26％，稳定剂0.46％，消泡剂0.05％，氧化钙0.0046％和微量元素0.18％；所述微量元素为七水硫酸铁5.00g/L、硼酸0.10g/L、一水硫酸锰0.10g/L、七水硫酸锌3.80g/L、二水钼酸钠0.10g/L和硫酸钴0.10g/L的混合液。6.根据权利要求4所述的提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法，其特征在于，所述成熟的N-乙酰氨基葡萄糖种子液的制备方法为：配制种子培养基，控制温度36-38℃，罐压0.03-0.05Mpa，搅拌转速300-400rpm...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾德桦，暨火兴，刘原君，王为民，
申请(专利权)人：丽珠集团福州福兴医药有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35