一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法。包括以下步骤：（1）将斜面保藏的马链球菌兽疫亚种BNCC3369999菌株接入装有种子培养基的摇瓶中，摇床恒温培养，得到含有菌体的种子液；（2）将种子液接入装有在原有培养基成分基础上添加了六偏磷酸钠或谷氨酸钠或同时添加了六偏磷酸钠和谷氨酸钠的发酵基础培养基的发酵罐中，接种量为4‑5％v/v，培养温度36‑37℃，通气量1‑1.5 vvm，搅拌转速为600‑700 rpm，发酵周期22‑24小时，结果：透明质酸产量达到4.1g/L,分子量1.56×106Da。本发明专利技术打破了菌体合成高分子量透明质酸能量和氨基供给水平的限制，提高了透明质酸分子量，为透明质酸的生产提供了新方法。

A Method for Improving the Molecular Weight of Hyaluronic Acid by Fermentation

The invention discloses a method for improving the molecular weight of hyaluronic acid produced by fermentation. It includes the following steps: (1) inserting the obliquely preserved strain BNCC3369999 of Streptococcus equina subspecies into a shaking flask containing seed culture medium, culturing in a shaking bed at constant temperature, and obtaining the seed liquid containing the bacteria; (2) inserting the seed liquid into the flask containing the original medium ingredients, adding sodium hexametaphosphate or sodium glutamate, or adding sodium hexametaphosphate and sodium glutamate as the fermentation basis at the same time. In the fermentation tank of the medium, the inoculation amount was 4 5% v/v, the culture temperature was 36 37 C, the ventilation rate was 1 1.5 vvm, the stirring speed was 600 700 rpm, and the fermentation period was 22 24 hours. The results showed that the production of hyaluronic acid reached 4.1 g/L and the molecular weight was 1.56 106 Da. The invention breaks the restriction of energy and amino supply level of high molecular weight hyaluronic acid synthesized by bacteria, improves the molecular weight of hyaluronic acid, and provides a new method for the production of hyaluronic acid.

【技术实现步骤摘要】
一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法。
技术介绍
透明质酸(Hyaluronicacid,HA)是由葡萄糖醛酸与N-乙酰氨基葡萄糖组成的双糖单位重复连接而成的生物多糖。分子量显著影响其理化性质和应用效果。高分子量透明质酸具备优异的保湿性、粘弹性以及润滑作用，被广泛应用于医药及化妆品领域。微生物发酵法是目前透明质酸的主要生产方法，但是在工业生产中如何实现分子量的可控性仍是一个难题，这导致附加值较高的高分子量透明质酸产品，占发酵总产量的比例并不高。因此，提高微生物菌体合成透明质酸的分子量是亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法，通过强化透明质酸合成的关键营养因子，打破高分子量透明质酸生产的技术瓶颈。具体的，本专利技术的方法包括如下步骤：（1）将斜面保藏的马链球菌兽疫亚种BNCC3369999菌株接入装有100mL的种子培养基的摇瓶中，摇床恒温培养，培养条件为：摇床转速220-250rpm，设定培养温度为36-37℃，培养时间为12-14小时，得到含有菌体的种子液；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将斜面保藏的马链球菌兽疫亚种BNCC3369999菌株接入装有100mL的种子培养基的摇瓶中，摇床恒温培养，培养条件为：摇床转速220‑250rpm，设定培养温度为36‑37℃，培养时间为12‑14小时，得到含有菌体的种子液；其中，种子培养基的组成为：葡萄糖30g/L、酵母浸膏15g/L、大豆蛋白胨20g/L、磷酸二氢钾2 g/L，无水硫酸镁1 g/L，种子培养基pH值灭菌前调节至7.2；（2）将种子液接入装有发酵基础培养基的发酵罐中，接种量为4‑5％v/v，培养温度36‑37℃，通气量1‑1.5 vvm，搅拌转速为600...

【技术特征摘要】
1.一种提高发酵生产透明质酸分子量的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将斜面保藏的马链球菌兽疫亚种BNCC3369999菌株接入装有100mL的种子培养基的摇瓶中，摇床恒温培养，培养条件为：摇床转速220-250rpm，设定培养温度为36-37℃，培养时间为12-14小时，得到含有菌体的种子液；其中，种子培养基的组成为：葡萄糖30g/L、酵母浸膏15g/L、大豆蛋白胨20g/L、磷酸二氢钾2g/L，无水硫酸镁1g/L，种子培养基pH值灭菌前调节至7.2；（2）将种子液接入装有发酵基础培养基的发酵罐中，接种量为4-5％v/v，培养温度36-37℃，通气量1-1.5vvm，搅拌转速为...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘金龙，孙锡友，危晶晶，王勇，赵国群，李志敏，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：河北,13