一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用，属于植物提取技术领域。本发明专利技术所述制备方法先对铁皮石斛进行杀青，然后将杀青后的铁皮石斛制成石斛粉；再将石斛粉与无水乙醇混合，浸提后固液分离，将浸提液真空浓缩，干燥后得到无水乙醇浸膏；然后将无水乙醇浸膏溶于水中，加入石油醚萃取，收集第一下相；再将第一下相与正丁醇混合，萃取，收集第二下相；最后将第二下相真空冷冻干燥，得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。实验表明，本发明专利技术所述方法制备得到的铁皮石斛提取物具有抗胃癌作用，能诱导胃癌细胞凋亡，在含有250μg/mL铁皮石斛提取物的培养基中，胃癌细胞总凋亡率可达80％。

A Dendrobium candidum extract with anti-gastric cancer effect and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用
本专利技术属于植物提取
，具体涉及一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
胃癌是一种较为普遍的恶性肿瘤疾病，其发病率在我国癌症疾病中位于前列，抗胃癌药物的开发是我国抗肿瘤研发的热点。铁皮石斛(DendrobiumofficinaleKimuraetMigo)又名铁皮兰、黑节草，为兰科石斛属多年生草本植物，分布广泛，作为传统中草药和保健食品在我国使用已有千年的历史。传统中医学认为，铁皮石斛性甘，微寒，归胃、肾经，具有益胃生津，滋阴清热的功效。现有文献表明铁皮石斛对小鼠肺癌、人乳腺癌等细胞均有增殖抑制作用，但对胃癌的研究较少。
技术实现思路
有鉴于
技术介绍
中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用。本专利技术提供了一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)对铁皮石斛进行杀青，得到杀青后的铁皮石斛；(2)将所述杀青后的铁皮石斛粉碎，制成石斛粉；(3)将所述石斛粉与无水乙醇混合，浸提后固液分离，得到浸提液；(4)将所述浸提液真空浓缩，然后氮吹干燥，得到无水乙醇浸膏；(5)将所述无水乙醇浸膏与水混合，得到浸膏水溶液；(6)将所述浸膏水溶液与石油醚混合，萃取后静置分相，收集第一下相；(7)将所述第一下相与正丁醇混合，萃取后静置分相，收集第二下相；(8)将所述第二下相真空冷冻干燥，得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。优选的，所述步骤(1)中杀青的温度为100～110℃，杀青的时间为15～25min。优选的，所述步骤(2)粉碎的颗粒度为30～50目。优选的，所述步骤(3)石斛粉与无水乙醇的料液比为1g：(10～30)mL。优选的，所述步骤(3)浸提的温度为20～30℃，浸提的时间为24～72h。优选的，所述步骤(3)浸提后超声处理30～60min；所述超声的强度为100～150W；所述超声的频率为40～80Hz；所述超声处理的温度为50～60℃。优选的，所述步骤(3)固液分离依次采用离心和过滤实现；所述离心的转速为4000～8000rpm；所述离心的时间为5～15min；所述过滤的孔径为200～250nm。优选的，所述步骤(5)无水乙醇浸膏和水的料液比为1g：(10～15)mL；所述步骤(6)浸膏水溶液与石油醚的的混合体积比为(2～4)：1；所述步骤(7)第一下相与正丁醇的混合体积比为(2～4)：1。本专利技术提供了述制备方法制备得到的铁皮石斛提取物。本专利技术还提供了上述铁皮石斛提取物在制备抗胃癌药物中的应用。有益效果：本专利技术提供了一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)对铁皮石斛进行杀青，得到杀青后的铁皮石斛；(2)将所述杀青后的铁皮石斛粉碎，制成石斛粉；(3)将所述石斛粉与无水乙醇混合，浸提后固液分离，得到浸提液；(4)将所述浸提液真空浓缩，然后氮吹干燥，得到无水乙醇浸膏；(5)将所述无水乙醇浸膏与水混合，得到浸膏水溶液；(6)将所述浸膏水溶液与石油醚混合，萃取后静置分相，收集第一下相；(7)将所述第一下相与正丁醇混合，萃取后静置分相，收集第二下相；(8)将所述第二下相真空冷冻干燥，得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。实验表明，本专利技术所述方法制备得到的铁皮石斛提取物具有抗胃癌作用，其能诱导胃癌细胞凋亡，250μg/mL时，胃癌细胞总凋亡率可达80％。附图说明图1为本专利技术实施例1所述制备方法的流程图；图2为本专利技术实施例2所述胃癌细胞增殖抑制实验结果图；图3为本专利技术实施例3所述胃癌细胞集落形成实验结果图；图4为本专利技术实施例4所述胃癌细胞凋亡检测结果图。具体实施方式本专利技术提供了一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)对铁皮石斛进行杀青，得到杀青后的铁皮石斛；(2)将所述杀青后的铁皮石斛粉碎，制成石斛粉；(3)将所述石斛粉与无水乙醇混合，浸提后固液分离，得到浸提液；(4)将所述浸提液真空浓缩，然后氮吹干燥，得到无水乙醇浸膏；(5)将所述无水乙醇浸膏与水混合，得到浸膏水溶液；(6)将所述浸膏水溶液与石油醚混合，萃取后静置分相，收集第一下相；(7)将所述第一下相与正丁醇混合，萃取后静置分相，收集第二下相；(8)将所述第二下相真空冷冻干燥，得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。本专利技术先对铁皮石斛进行杀青。在本专利技术中，所述铁皮石斛优选为铁皮石斛全株。本专利技术对所述铁皮石斛的具体品种和来源不作特别限定，本领域常规市售品种或来源均可。在本专利技术的实施例中，所述铁皮石斛购自安徽省霍山县石斛基地，为两年生鲜条。在本专利技术中，所述杀青的温度优选为100～110℃，更优选为105℃。所述杀青的时间优选为15～25min，更优选为20min。杀青后，本专利技术将所述杀青后的铁皮石斛粉碎，制成石斛粉。在本专利技术中，所述粉碎的颗粒度优选为30～50目，更优选为40目。本专利技术对具体的粉碎装置和方法不作特别限定，本领域常规用于粉碎的装置和方法均可。得到石斛粉后，本专利技术将所述石斛粉与无水乙醇混合，浸提。在本专利技术中，所述石斛粉与无水乙醇的料液比优选为1g：(10～30)mL，更优选为1g：(15～25)mL，更优选为1g：20mL。所述浸提的温度优选为20～30℃，更优选为25℃。所述浸提的时间优选为24～72h，更优选为36～60h，更优选为48h。在本专利技术中，所述浸提后优选还包括超声处理。所述超声的强度优选为100～150W，更优选为120W。所述超声的频率优选为40～80Hz，更优选为60Hz。所述超声处理的温度优选为50～60℃，更优选为55℃。所述超声处理的时间优选为30～60min，更优选为45min。所述超声处理能加速生物碱的溶解，提高提取率。浸提后，本专利技术进行固液分离，得到浸提液。在本专利技术中，所述固液分离优选依次采用离心和过滤的方法。所述离心的转速优选为4000～8000rpm，更优选为6000rpm；所述离心的时间优选为5～15min，更优选为10min。离心后，本专利技术收集上清液，然后对上清液进行过滤。在本专利技术中，所述过滤的孔径优选为200～250nm，更优选为220nm，过滤后的滤液即为浸提液。得到浸提液后，本专利技术将所述浸提液真空浓缩，然后氮吹干燥。在本专利技术中，所述真空浓缩的温度优选为50～60℃，更优选为55℃。本专利技术对所述氮吹干燥的工具和具体方法不作特别限定，本领域常规用于氮吹干燥的工具和方法均可。氮吹干燥后，得到无水乙醇浸膏。本专利技术将所述无水乙醇浸膏与水混合，得到浸膏水溶液。在本专利技术中，所述无水乙醇浸膏与水的料液比优选为1g：(10～15)mL，更优选为1g：12mL。本专利技术将所述浸膏水溶液与石油醚混合，萃取。在本专利技术中，所述浸膏水溶液与石油醚的的混合体积比优选为(2～4)：1，更优选为3：1。所述萃取的次数优选为2～4次，更优选为3次。每次萃取的时间优选为5～15min，更优选为10min。萃取后静置分相，收集得到第一下相。本专利技术将所述第一下相与正丁醇混合，萃取。在本专利技术中，所述第一下相与正丁醇的混合体积比优选为(2～4)：1，更优选为3：1。所述萃取的次数优选为2～4次，更优选为3次。每次萃取的时间优选为5～15min，更优选为10min。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)对铁皮石斛进行杀青，得到杀青后的铁皮石斛；(2)将所述杀青后的铁皮石斛粉碎，制成石斛粉；(3)将所述石斛粉与无水乙醇混合，浸提后固液分离，得到浸提液；(4)将所述浸提液真空浓缩，然后氮吹干燥，得到无水乙醇浸膏；(5)将所述无水乙醇浸膏与水混合，得到浸膏水溶液；(6)将所述浸膏水溶液与石油醚混合，萃取后静置分相，收集第一下相；(7)将所述第一下相与正丁醇混合，萃取后静置分相，收集第二下相；(8)将所述第二下相真空冷冻干燥，得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)对铁皮石斛进行杀青，得到杀青后的铁皮石斛；(2)将所述杀青后的铁皮石斛粉碎，制成石斛粉；(3)将所述石斛粉与无水乙醇混合，浸提后固液分离，得到浸提液；(4)将所述浸提液真空浓缩，然后氮吹干燥，得到无水乙醇浸膏；(5)将所述无水乙醇浸膏与水混合，得到浸膏水溶液；(6)将所述浸膏水溶液与石油醚混合，萃取后静置分相，收集第一下相；(7)将所述第一下相与正丁醇混合，萃取后静置分相，收集第二下相；(8)将所述第二下相真空冷冻干燥，得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中杀青的温度为100～110℃，杀青的时间为15～25min。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)粉碎的颗粒度为30～50目。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)石斛粉与无水乙醇的料液比为1g：(10～30)mL。5.根据权利要求4所述的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏练平，郑帅，韩震，王亭，蔡永萍，金青，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34