用于诊断慢性冠心病的分子标志物MYH11及其应用制造技术

本发明专利技术提供用于诊断慢性冠心病的分子标志物MYH11及其应用。本发明专利技术发现通过检测患者血液样品中的MYH11浓度，可以预测慢性冠心病等动脉粥样硬化引起的疾病的发生，以及用于诊断慢性冠心病。

Molecular marker MYH11 for diagnosis of chronic coronary heart disease and its application

【技术实现步骤摘要】
用于诊断慢性冠心病的分子标志物MYH11及其应用
本专利技术涉及生物检测
，特别是涉及用于诊断慢性冠心病的分子标志物MYH11及其应用。
技术介绍
心血管疾病是当前威胁全球人类健康最重要的疾病之一，已成为危害人类健康的第一杀手。而动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是导致心血管疾病死亡的主要原因之一。根据世界卫生组织的最新统计结果显示，每年全球死于AS相关疾病的患者约为1750万人，占全球死亡率的31％。中国的现状同样令人堪忧，据《中国心血管病报告2017》调查结果，2017年中国AS相关疾病患者就有2400万，而冠心病(coronaryheartdisease，CHD)就是最主要的疾病之一，具有1100万的病人，严重的威胁着人们的健康。CHD是由冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变进而引起血管狭窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏疾病。在CHD疾病中，慢性冠心病(chroniccoronaryheartdisease，CCHD)由于潜伏期长，发病较隐匿，发病时间比较短，且程度也比较轻，一般是过度劳累引起心肌缺血而引起，休息可以得到缓解，因此，人们往往不够重视，疾病很容易被忽略。随着病情的发展，病情逐渐向不稳定心绞痛发展，甚至会发生心肌梗死。而且，稳定心绞痛的病人发生猝死的风险也较高，因此，严重的威胁着人们的生命。目前，CCHD的诊断主要是根据患者的病情症状来做诊断，这就要求医生要有较高的经验，因此很容易漏诊。目前，诊断慢性心血管疾病的主要手段是影像学以及心电图检查，包括CT、MRI以及心电图仪器等。但是影像学及心电图检查的方法往往需要特殊的仪器，检查过程耗时耗力，价格昂贵，而且结果需要非常专业的医生才能解读，不适合大规模筛查，并且不适宜病程的监测和定期检查；而且诊断灵敏度和特异性都不高，不能满足临床的需求。循环生物标志物检查具有经济、方便、无创、适宜病程监测以及大规模筛查等优点，具有很大的应用价值。因此研究发现有效的慢性心血管疾病相关标志物应当成为当前的关注热点。目前慢性心血管疾病实验室检查主要包括甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、和高密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白a、载脂蛋白A1、载脂蛋白B等传统生化标志物。然而，这些标志物诊断稳定心绞痛都存在着灵敏度和特异度较低的问题。许多与心血管不相关的疾病都会引起这些标志物的升高，从而在一定程度上限制了其在临床上的应用。而且这些标志物都是针对疾病发作后而发挥诊断效果，并不能用于预防心血管疾病，减少慢性心血管疾病的发生。当前，每年全球因急性心血管事件而死亡的人数约有1750万人，占全球死亡率的31％。而中国的情况也异常严峻，2017年冠心病人数就有1100万左右，死亡率逐年上升。然而，现有技术中缺乏特异性的生物标志物，用于慢性冠心病的诊断。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供用于诊断慢性冠心病的分子标志物MYH11及其应用，用于解决现有技术中缺乏对慢性冠心病等心血管疾病的诊断具有高特异性标志物等问题。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供检测MYH11蛋白的存在的试剂盒或诊断装置在制备用于诊断和/或预防和/或治疗慢性冠心病的药剂中的应用，所述试剂盒或诊断装置用于慢性冠心病的体外诊断和/或危险分层。可选地，所述试剂盒用于测定体液样品中MYH11蛋白的表达量。可选地，所述试剂盒通过ELISA法检测MYH11蛋白的表达量。可选地，所述体液样品中MYH11蛋白的表达量与慢性冠心病疾病的严重程度正相关。可选地，所述体液样品选自血清。可选地，所述药剂用于诊断或监测慢性冠心病的存在和/或过程和/或严重程度和/或预后。本专利技术还提供MYH11蛋白或其肽段作为生物标志物在慢性冠心病诊断中的应用，所述血清MYH11用于慢性冠心病的体外诊断和/或危险分层。慢性冠心病通常由动脉粥样硬化引起。可选地，慢性冠心病患者的MYH11蛋白水平呈高表达。可选地，患者血清中的MYH11蛋白≥1990.0218pg/ml可诊断为慢性冠心病。本专利技术还提供用于表达MYH11蛋白的DNA或其mRNA或保有其功能的同源物作为生物标志物在制备或筛选慢性冠心病的诊断试剂中的应用。如上所述，本专利技术的用于诊断慢性冠心病的分子标志物MYH11及其应用，具有以下有益效果：本专利技术发现通过检测慢性冠心病患者血清样品中的MYH11浓度，可以诊断慢性冠心病。具体实施方式以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。寻找慢性心血管疾病的新型诊断标志物，对于早期诊断，早期干预，延缓疾病进展，减少急性心血管疾病发病率、死亡率与并发症起着至关重要的作用。MYH11是MYH家族的重要组成部分，MYH11基因编码血管平滑肌细胞的肌球蛋白重链，其氨基酸序列如序列1所示，其核苷酸序列的genebank号为GeneID:4629，是平滑肌收缩单元的重要组成部分，位于人类染色体的16P13.11，包含40个外显子和39个内含子。MYH11基因突变与血管性疾病密切相关。研究发现MYH11基因突变可导致主动脉瘤的发生，并且大多数患者合并动脉导管闭合不全。MYH11基因突变导致其结构的变化，从而影响平滑肌细胞的收缩功能，并导致主动脉顺应性和弹性降低以及血管平滑肌增生减弱。这可能是动脉瘤发生的原因。但是，MYH11与慢性冠心病的发生尚未清楚。针对MYH11在CCH中的作用以及其作为诊断标志物也成为心血管领域的研究热点。目前，本领域还未有将血清MYH11作为诊断慢性冠心病的生物标志物，因此，迫切需要开发特异性的生物标志物，用于稳定心绞痛的诊断。专利技术人经过广泛而深入的研究，通过ELISA方法检测健康人、HF(HeartFailure，心力衰竭)、ACS(AcuteCoronarySyndrome，急性冠状动脉综合症)以及CCHD(ChronicCoronaryHeartDisease，慢性冠脉心脏病)患者血清中MYH11浓度，首次发现，CCHD患者血清中MYH11浓度显著高于健康人(即对照组)，而与HF患者以及ACS患者血清浓度无显著差异。因此，MYH11可能在CCHC的发生发展中起着非常重要的作用，可能作为诊断以及预测CCHC的潜在生物标志物。本专利技术所用血清标本均来自于外周静脉血，征得志愿者的同意。收集了外周静脉血样本包括健康人18例，心衰病人9例，ACS病人23例以及CCHD病人39例；检测血清中MYH11浓度的ELISA试剂盒购自Biorbyt，产品名称为HumanMYH11ELISAKit，其货号为orb404884，根据操作说明书进行。临床生化标志物指标的检测试剂盒购自深圳迈瑞生物医疗电子有限公司，根据操作说明书进行，包括总胆固醇(TC)测定试剂盒(氧化酶法)，货号：105-001395-00；甘油三酯(TG)测定试剂盒(氧化酶法)，货号：105-001396-00；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒(直接法)，货号：105-001410-00；低密度脂蛋白胆固醇(LD本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测MYH11蛋白的存在的试剂盒或诊断装置在制备用于诊断和/或预防和/或治疗慢性冠心病的药剂中的应用，所述试剂盒或诊断装置用于慢性冠心病的体外诊断和/或危险分层。

【技术特征摘要】
1.检测MYH11蛋白的存在的试剂盒或诊断装置在制备用于诊断和/或预防和/或治疗慢性冠心病的药剂中的应用，所述试剂盒或诊断装置用于慢性冠心病的体外诊断和/或危险分层。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述试剂盒或诊断装置用于测定体液样品中MYH11蛋白的表达量。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述体液样品中MYH11蛋白的表达量与慢性冠心病严重程度正相关。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述试剂盒或诊断装置通过ELISA法检测MYH11...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑磊，胡炎伟，王前，卢远彬，丁立，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：广东,44